同种免疫性血小板减少症诊断新方法ppt课件

1、同种免疫性血小板减少症诊断新方法 Dr. Sentot Santoso PhD血小板输注讨论会中国 广州2021.4.27-4.30同种免疫性血小板减少综合症胎儿/新生儿同种免疫性血小板减少 (FNAIT)血小板输注无效输注后紫癜被动性血小板减少症移植相关性血小板减少FAINT的发病机制人类血小板同种抗原新的人类血小板同种抗原中国人群的人类血小板同种抗原中国人群的人类血小板同种抗原表统计同种免疫性血小板减少症的诊断学抗原测定 表型PIFT, MAIPA 基因分型PCR-RFLP, PCR-SSP, TaqMan 特异血清，血小板及稀有的HPA基因型抗体测定 结合测定PIFT, ELISA, F

2、lowcytometry 糖蛋白特异免疫测定法(MAIPA血小板抗原单克隆抗体固定法) 新一代血小板抗体实验？问题我们如何改良同种免疫性血小板减少症的诊断呢？以稳定的细胞系为来源的DNA产品和血小板同种抗原基因分型，来自于人类血小板同种抗原的表型的献血者的淋巴细胞系抗体鉴定，转染的CHO细胞稳定表达的人类血小板同种抗原以淋巴细胞系作为来源获得规范DNA人类血小板同种抗原基因分型的淋巴细胞系ISTH/ISBT血小板基因型鉴定实验室特异等位片段细胞系表达人类血小板同种抗原被转染的CHO细胞表达鉴定低频抗原HPA-8bw,-11bw,13bw引起的同种免疫反响问题血小板抗体测定能否可以进一步改善？血

3、小板抗体测定的进展血小板抗原单克隆抗体固定法测定的步骤抗原捕获测定的优点和缺陷新的血小板抗体测定？w/o theuseof mabw/o theuseof wholeplateletsw/o anywashingstep快速、敏感、特异、可靠新的血小板抗体测定？某些血小板同种异体抗体，用现有的技术是检测不到的漏检anti-HPA-1a 的胎儿与母亲不相容的疑似抗体检测的影响要素血小板抗原三维构造密度表位血小板抗体浓度亲和力异质性其他要素比如说：配体血小板糖蛋白IIb/IIIa的构象两种类型HPA-1a 的同种异体抗体抗原密度异种表位：单克隆抗体抗体表达的稳定性新的血小板抗体测定方法重组血小板抗

4、原在ELISA体系中的运用在昆虫细胞中可溶的重组人类血小板抗原产品可溶性重组HPA-1a and -1b用rGPIIIa抗体检测anti-HPA-1a ELISA凝胶抗原特异测定(GASA)血小板抗体测定：MAIPA vs. GASA抗原-抗体的“锁与钥匙的概念新的血小板抗体测定方法 纯化血小板抗原或者重组血小板抗原 在SPR外表激元共振，Surface Plasmon Resonance,SPR)中的运用借助SPR技术的抗原-抗体相互作用的实时分析外表等离激元SPR实时蛋白质-蛋白质交互作用在SPR中用Mabs 的HPA-1a and HPA-1b 抗原的反响SPR技术的原那么MabSZ21

5、: HPA-1a “Specific 单克隆抗体SZ-21 和抗PlA1 抗体的竞争性结合及这种结合潜在的临床运用 Xi X，Zhao Y，Jiang H，Wu Q，LI P， RUAN C 中国 江苏血液研讨所 、苏州医科大学 Nouv Rev Fr Hematol.1992;34(3):239-42 Mab SZ21 (HPA-1a类似体) 与固定的HPA-1a and HPA-1b 抗原在SPR中的反响严重的NAIT 病例中低亲和力的HPA-1a 同种异体抗体1严重的NAIT 病例中低亲和力的HPA-1a 同种异体抗体2严重的NAIT 病例中低亲和力的HPA-1a 同种异体抗体3人类血小

6、板抗体的分析 动物模型？ 抗体介导的血小板去除和相关 抑制因子的测定以NOD/SCID 鼠作为模型进展人类血小板抗体的研讨在NOD/SCID 鼠体内循环期间人类血小板存活的动力学FNAIT的病理机制Mab SZ21 抑制体内的HPA-1a 同种异体抗体介导的血小板去除？Mab SZ21 抑制体外的HPA-1a 同种异体抗体与人类血小板的结合Mab SZ21 抑制体内的HPA-1a 同种异体抗体介导的血小板去除结论基于在分子生物学根底上的HPA的第四代基因分型技术的开展，此技术可以进展快速的基因分型。参照DNA来源于永生化细胞系，可以用于基因分型的质量控制但是，抗体的检查依然个难题。新一代的血小板抗体检测的运用SPR技术势在必行对于新一代的血小板抗体检测技术，检测自然抗原，表位的复杂性，抗体的异质性等附加条件的要求是非常重要体内实验可以研讨致病的抗体和免疫介导的血小板减少症的病理机制。动物模型对于药物检测的研讨必不可少新一代血小板抗体测定？致谢1、 Justus Liebig University 和临床免疫输注医学研讨所 Giessen, 德国 Ines Socher ， Cornelia Andrei-Selmer ，Tamam Bakchoul，Ulrich Sachs，Hartmut Kroll 2、剑桥大学和国家安康效力血液移植英国PrachiStaff