药物分析学：各论第一章 羧酸及其酯类药物的分析

1、各论 第一章 羧酸及其酯类药物的分析药物分析学目 录芳酸及其酯类药物的分析1脂肪酸及其酯类药物的分析221.芳酸及其酯类药物的分析3 结构特征： 苯环 直接与苯环相连的羧基 羧基可形成盐或酯 主要类别：苯甲酸类药物水杨酸类药物结构与性质-典型药物结构4salycylic acid 水杨酸aspirin 阿司匹林sodium aminosalicylate对氨基水杨酸钠salsalate 双水杨酯水杨酸类结构与性质-典型药物结构5苯甲酸类结构与性质-主要理化性质6-OH、-OCOCH3：邻位致活基团 酸性增强水杨酸阿司匹林苯甲酸 HAc H2CO3 苯酚（1）羧基-酸性pKa 2.953.49

2、4.264.76pKa1 6.38 9.95用于含量测定 酸性大小： 邻位-OH: 分子内氢键 酸性增强结构与性质-主要理化性质7（2）酯基-水解性酸性介质: 不可能全部水解碱性介质: 过量碱(氢氧化钠和碳酸钠)存在，可水解完全用于鉴别、特殊杂质产生依据、含量测定结构与性质-主要理化性质8（3）官能团反应特性含酚羟基、潜在酚羟基的水杨酸类 （4） UV 和 IR 特征与三氯化铁试液反应，显色重氮化反应、重氮化-偶合反应含芳伯氨基、潜在芳伯氨基含硫的丙磺舒 分解生成硫化物用于鉴别、含量测定 用于鉴别、含量测定 鉴别试验9 水解反应 与三氯化铁反应 重氮化-偶合反应分解产物的反应 UV、IR鉴别试

3、验10（1）水解反应 白色水杨酸沉淀 醋酸的臭气阿司匹林：碱( Na2CO3试液) 水解强酸(稀硫酸)酸化 白色水杨酸沉淀双水杨酯：碱 (NaOH试液) 水解强酸(稀盐酸)酸化溶于醋酸铵试液，生成水杨酸铵和醋酸鉴别试验11鉴别试验 12反应最适宜 pH：4-6强酸性溶液分解碱性溶液水解产生Fe(OH)3 红棕色沉淀（2）与三氯化铁反应水杨酸及其盐类：鉴别试验 13（2）与三氯化铁反应 含酚羟基或潜在酚羟基的药物, 在中性或弱酸性条件下, 可与FeCl3试液反应, 生成类似紫色 (紫色, 紫堇色,紫红色) 的配位化合物加水煮沸水解加氢氧化钠煮沸水解稀盐酸酸化成弱酸性阿司匹林：对氨基水杨酸钠：双水

4、杨酯：FeCl3紫色类配位化合物鉴别试验 14（2）与三氯化铁反应苯甲酸类：丙磺舒钠盐在pH5.06.0水溶液中与三氯化铁试液反应，生成米黄色沉淀鉴别试验 15（4）分解反应丙磺舒的鉴别：熔融显硫酸盐反应（3）重氮化-偶合反应对氨基水杨酸钠 贝诺酯水解产物 鉴别试验 16（5）UV 最大、最小吸收波长 最大波长及其吸收系数或吸光度 两特征吸收波长及其吸光度之比 应注明所用溶剂、药物的浓度等条件 UV鉴别参数：特殊杂质检查17 阿司匹林中特殊杂质的检查 对氨基水杨酸钠中间氨基酚等 有关物质的检查甲芬那酸中 2, 3 -二甲基苯胺的检查特殊杂质检查18阿司匹林中特殊杂质的检查 检查方法： 溶液的澄

5、清度 检查碳酸钠试液中的不溶物：未反应完全的水杨酸脱羧产生的 苯酚乙酸苯酯水杨酸苯酯乙酰水杨酸苯酯一定量阿司匹林在碳酸钠试液中溶解应澄清。苯酚发生副反应产生的 阿司匹林溶于碳酸钠特殊杂质检查19游离水杨酸 来源：生产中乙酰化不完全、贮藏中水解都会产生检查原因：有毒；易氧化，形成醌型有色物质Chp(2005) 检查依据及方法： 阿司匹林无酚羟基，不能与直接高铁盐作用 水杨酸可直接与高铁盐反应呈色对照法：与一定量水杨酸对照液生成的色泽比较，控制游离水杨酸的限量。特殊杂质检查20游离水杨酸 Chp(现行版)检查方法：HPLC法 流动相： 乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70） 固定相： O

6、DS 定量方法：外标一点法说明：一般，制剂不再检查原料药项下的相关杂质，但ASA制剂在制备和贮藏过程中均可能引入水杨酸,故仍需检查游离水杨酸的限量。特殊杂质检查21有关物质 检查方法：HPLC中不加校正因子的主成分自身对照法除“游离水杨酸”之外的其他合成副产物包括：固定相： ODS流动相: A为乙腈- 四氢呋喃- 冰乙酸-水（205570） B为乙腈 梯度洗脱 苯酚 乙酸苯酯水杨酸苯酯 乙酰水杨酸苯酯双水杨酯 乙酰水杨酰水杨酸水杨酸酐 乙酰水杨酸酐特殊杂质检查22对氨基水杨酸钠中间氨基酚等有关物质的检查检查方法：HPLC有关物质：间氨基酚、5- 氨基水杨酸、其他未知杂质来源：未反应完全的间氨基

7、酚原料,在贮藏过程中脱羧产生检查原因：易氧化成醌型化合物，使药物变色；有毒间氨基酚：外标一点法定量其它有关物质：不加校正因子的主成分自身对照法,限量检查固定相：ODS流动相：甲醇-10% 四丁基氢氧化钠溶液 -0.05 mol/LNa2HPO4-0.05 mol/LNaH2PO4（ 20019400400） 含量测定23 酸碱滴定法 UV法 HPLC法直接滴定法水解后剩余滴定法非水溶液滴定法含量测定24酸碱滴定法强碱滴定本类药物的羧基 直接滴定法乙醇溶解样品：样品易于溶解; 防止水解而导致结果偏高阿司匹林的含量测定：边滴边摇：防止局部碱度过大，促使水解中性乙醇：对所用指示剂显中性 (取乙醇适量

8、，加酚酞指示液2滴，用 0.1mol/LNaOH液滴定至微红色，即得。)专属性差：供试品中所含游离水杨酸超过规定限量时，不宜采用含量测定25水解后剩余滴定法阿司匹林的含量测定：空白试验: 校正 NaOH 滴定液因加热吸收空气中 CO2 带来的误差专属性差：供试品中所含游离水杨酸超过规定限量时，不宜采用1mol Asp 2mol NaOH 1mol H2SO4含量测定26UV 法直接 UV 法丙磺舒片剂的含量测定：取本品10 片，精密称定，研细，精密称取适量，置200 ml 量瓶中，加乙醇150 ml 与盐酸溶液（9 100）4 ml，置70水浴上加热30 min，放冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀，

9、滤过，精密量取续滤液5 ml，置100 ml 量瓶中，加盐酸溶液（9 100）2 ml，用乙醇稀释至刻度，摇匀，在249 nm 波长处测定吸光度，按C13H19NO4S 的吸收系数 为338 计算含量。含量测定27柱色谱- UV 法固定相： 硅藻土和新制NaHCO3液的混合物USP用于阿司匹林栓剂、胶囊的含测:ASA和SA与碳酸氢钠反应成钠盐，保留于柱上三氯甲烷洗脱，除去中性和碱性杂质 大量冰醋酸-三氯甲烷酸化洗脱，ASA游离，测定SA酸性较大，不易游离，仍保留在柱上。样品处理：含量测定 28栓剂样品的预处理：多粒栓剂加热熔融，混匀，冷却，称样，加溶剂溶解待测药物，定容，摇匀，冰浴，过滤，取续

10、滤液 HPLC法对氨基水杨酸钠及其制剂：离子对分离模式 （流动相中加入四丁基氢氧化铵作为离子对试剂）其余芳酸类药物及制剂：离子抑制分离模式 （流动相为酸性，抑制芳酸类药物电离）定量方式：外标一点法阿司匹林肠溶栓剂的含量测定案 例 分 析阿司匹林原料药及片剂的检验29 2.脂肪酸及其酯类药物的分析30 结构特征：与脂肪链碳原子相连接的羧基羧基可形成盐或酯芳基烷酸类脯氨酸类（普利类）2- 甲基丁酸萘酯类（他汀类）苯氧基烷酸类 主要类别：结构和性质-典型药物结构31芳基烷酸类结构和性质-典型药物结构32脯氨酸类（普利类）结构和性质-典型药物结构332- 甲基丁酸萘酯类（他汀类）结构和性质-典型药物结

11、构34苯氧基烷酸类结构和性质-主要理化性质35 溶解性氯贝丁酯: 无色至黄色澄清油状液体 相对密度1.1381.144 水中几乎不溶酸碱性和水解性依那普利：含有羧基、仲胺基，显酸、碱两性氯贝丁酯：脂肪酸酯，在碱性溶液中易水解-酸碱滴定含量测定法的依据结构和性质-主要理化性质36官能团反应特性光谱特性卡托普利：含巯基，具有还原性，巯基还能被酰化酮洛芬：含酮基，可与羰基试剂反应-用于鉴别、特殊杂质产生依据、含量测定-用于鉴别、含量测定旋光性-用于纯度检查鉴别试验37 异羟肟酸铁反应 官能团反应 UV, IR鉴别试验38异羟肟酸铁反应-多用于酯类药物的鉴别氯贝丁酯的鉴别：紫色鉴别试验39官能团反应酰

12、化反应-卡托普利的鉴别亚硝酰硫醇酯，红色缩合反应-酮洛芬的鉴别酮洛芬 + 二硝基苯肼 偶氮化合物 (橙色）鉴别试验40UV 法规定一定浓度药物的 max 和（或） min规定供试药物和其对照品在相同条件下测得的UV光谱应一致 USP法: 氯贝丁酯、洛伐他汀原料的鉴别特殊杂质检查41 布洛芬中有关物质的检查 萘普生中有关物质的检查 卡托普利中卡托普利二硫化物的检查 辛伐他汀中洛伐他汀等有关物质的检查 氯贝丁酯中特殊杂质的检查特殊杂质检查42布洛芬中有关物质的检查绿色合成路线：有10 余种，主要包括合成中间体及其副产物。1-（4- 异丁基苯基）乙醇、4- 异丁基苯乙酮具有成纤维细胞和红细胞毒性。有

13、关物质种类：1-（4- 异丁基苯基）乙醇4- 异丁基苯乙酮特殊杂质检查43检查方法：ChP 和 JP : TLC 法USP : HPLC 法BP: HPLC，GC法 ChP方法： 供试品溶液自身稀释对照法 特殊杂质检查44萘普生中有关物质的检查有关物质：6-甲氧基-2萘乙酮其它未知杂质ChP 检查法：固定相：ODS流动相：甲醇-0.01 mol/L 磷酸二氢钾溶液（7525），磷酸调节pH 至3.0HPLC 外标法 不加校正因子的主成分自身对照法 特殊杂质检查45卡托普利中卡托普利二硫化物的检查ChP 检查法：固定相：ODSHPLC (外标法) 流动相：0.01 mol/L 磷酸二氢钠溶液-甲

14、醇- 乙腈（70255） （用磷酸调节pH 至3.0）辛伐他汀中洛伐他汀等有关物质的检查ChP 检查法： HPLC （不加校正因子的主成分自身对照法)特殊杂质检查46氯贝丁酯中特殊杂质的检查 合成路线：特殊杂质：对氯酚、挥发性杂质、酸度（氯苯氧异丁酸、盐酸、硫酸等）特殊杂质检查47 对氯酚的检查：GC法 （外标一点法）样品处理：氯贝丁酯供试品NaOH试液对氯酚对氯酚钠 （上层）氯贝丁酯（下层） 水洗 挥发性杂质检查对氯酚钠 （上层）CHCl3洗涤 进一步除去脂溶性杂质（包括氯贝丁酯）稀HCl酸化对氯酚钠对氯酚CHCl3提取对氯酚的CHCl3溶液GC分析含量测定48 酸碱滴定法 氧化还原滴定法

15、UV法 HPLC法直接滴定法两步滴定法非水溶液滴定法含量测定49 两步滴定法水解后剩余滴定法测定含量时，合成过程中引入的酸性杂质会使测定结果偏高。氯贝丁酯的含量测定：（1）中和：供试品中共存的酸性杂质（2）水解后剩余滴定：含量测定50 卡托普利的含量测定：氧化还原滴定法碘酸钾法，ChP 和 USP法 淀粉指示液显蓝色 含量测定51 HPLC 法 定量方式：外标一点法 脂肪酸类药物及制剂： 多采用离子抑制分离模式（流动相为酸性，抑制药物电离） 辛伐他汀的含量测定：流动相：A 为乙腈-0.1% 磷酸溶液（5050） B 为0.1% 磷酸的乙腈溶液 梯度洗脱固定相：ODS练习题1. 含酚羟基或潜在酚羟基的水杨酸类药物可采用下列哪种方法进行鉴别？ A. 强酸性条件下与三氯化铁试液反应 B. 稀盐酸溶液中与亚硝酸钠试液反应C. 中性或弱酸性条件下与三氯化铁试液反应 D. 中性或弱酸性条件下与铁氰化钾试液反应E. 强碱性条件下与三氯化铁试液反应2. 阿司匹林加入碳酸钠试液加热后，再加稀硫酸酸化，此时产生的白色沉淀应是 。A. 苯酚 B. 乙酰水杨酸 C. 水杨酸 D. 醋酸钠 E. 醋酸苯酯52练习题3. 在药物的酸碱滴定中，有时要求采用中性乙醇做溶剂，所谓“中性”是指 。A. pH = 7 .