NCCLS抗菌药物敏感性试验执行标准第14版信息增刊更新内...

1、NCCLS抗菌药物敏感性试验执行标准第14版信息增刊更新内容介绍孙长贵成军（中国人民解放军第117医院检验科，杭州310013）美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）J-2004年1月推出了需氧菌抗菌药物敏感试验执行标准第14版信息增刊（M100-S14）,以取代M100-S13。卜面简要介绍第14版信息增刊主要更新内容，供临床微生物学实验室工作人员参考。1在表格的介绍中M7“警告”表中增加“鼠疫耶尔森菌与内醸胺类抗生素组合”2在抗菌药物推荐分组中M7中增加“表1B可能的生物恐怖病原菌在试验和报告时应考虑的抗菌药物推荐分组”炭疽芽胞杆菌鼠疫耶尔森菌鼻疽伯克霍尔德菌假鼻疽伯克霍尔德菌A纽一级试

2、验并常规报告的药物青霉素多西环素或四环素环丙沙星庆大霉素链霉素多西环素或四环素环丙沙星氯霉素复方新诺明头孔!他喘多西环素或四坏素亚胺培南阿莫西林-克拉维酸头抱他碇多西环素或四环素亚胺培南复方新诺明3肠杆菌科3.1在M7表2A和表2K总注释中增加“警告：虽然E-内酰胺类抗生素对鼠疫耶尔森菌在体外有抗菌活性，但在感染动物模型中缺乏疗效，这些抗生素不能报告敏感”。3.2在M2表2A注释15和M7表2A注释13中补充了测定肠道外分离的沙门菌对荼唳酸耐药性的解释。内容为“肠道外分离的沙门菌应测试对荼喘酸的耐药性。対蔡唳酸耐药U对氟嗪诺酮类敏感的菌株，应告知临床医师用氟哇诺酮治疗可能无效”。3.3在M2和

3、M7表2A中増加Gemifloxacin药物的解释标准，Genufloxacin纸片含药贾5g,抑菌圈直径事20mm敏感，1619mm中介,W15mm耐药。最低抑菌浓度（MIC）WO.25Pg/ml敏感，0.5Ug/ml中介，$1Pg/ml耐药。4铜绿假单胞菌和不动杆菌属菌4.1在M2和17表1、表2B中将“左氧氟沙星”从“试验/报告U组”划归“试验/报告B组”。4.2在M2表2B中増加对嗜麦芽窄仅单胞菌和洋葱伯克霍尔德菌的解释标准和介绍。在试验条件一栏孵育条件中增加“嗜麦芽窄食单胞菌和洋葱伯克霍尔德菌（孵育时间）2024h”。在总评论中增加第5条注释，内容为“嗜麦芽窄食单胞菌仅报告刈米诺四环

4、素、左氧氟沙星和复方新诺明敏感性。洋葱伯克霍尔德菌仅报告对头抱他噪、美罗培南和米诺坏素的敏感性”。嗜麦芽窄食单胞菌和洋葱伯克霍尔德菌的抑菌圈直径解释标准抗菌药物纸片含药量（pg）抑菌圈直径（mm）注释RIS头抱他噪30W171820$21用于洋葱伯克霍尔德菌美罗培南101619N20用丁洋葱伯克霍尔德菌米诺坏素30W1415-1819用r洋葱伯克霍尔德菌和嗜麦芽窄負单胞菌左氧氟沙星5W1314-1617用j:嗜麦芽窄食单胞菌甲氧卡|定/磺1.25/23.75W1011-15$16用r嗜麦芽窄負单胞菌胺甲噁卩坐5葡萄球菌5.1在M2和M7表2C中増加Ketolide类Telitluomycm药物

5、解释标准。纸片含药吊15|ig,抑菌圈直径$22mm敏感，1921mm中介，W18mm耐药。MIClPg/ml敏感,2Mg.nil中介，$4g/ml耐药。5.2在M7表2C注释10中补充了凝固酶阴性葡萄球菌mecA和苯陞西林MIC结果报告的解释。在原“不携带mecA和产生PBP2a的分离菌将被报告对苯卩坐西林敏感”内容后增加了“假如苯卩坐曲林MIC2U0ml”。5.3在M2和M7表2C克林毎素一栏中增加对检测诱导克林毎素耐药的注释。内容为“対人环内酯耐药的金黄色葡萄球菌和凝固酚阴性葡萄球茵分离株対克林霍素具有组成的（constitutive）或可诱导的耐药通过刃加基因编码的23S1RNA甲基化

6、也称为MLSb（人环内酯、林可和E型链阳孫素）耐药或可能仅对人环内酯类耐药（由A基因编码的外排机制）。诱导的克林孫素耐药性可通过在纸片扩散法药敏试验时，距15Pg红孫素纸片边缘1526mm处放置含2ug克林霍素纸片來进行检测。孵育后，克林霉素抑菌圈不出现截平”现彖，应报告分离株对克林毎素敏感。邻近红寄素纸片侧克林霍素抑菌圈出现“截平”现彖，提示存在可诱导的克林霍素耐药，应报告分离株对克林每素耐药，同时在报告中应注明通过诱导克林密素耐药试验，推测此菌株对克林霉素耐药，在某些病人中克林密素可能仍有效”。5.4在M2和M7表2C的最低质駅控制（QC）推荐栏内増加“用测试可诱导的克林密素耐药的质控菌株

7、尚未获得”内容。5.5在M2和M7表2C中増加了“在葡萄球菌中用纸片扩散法筛选试验预示mecA介导的耐药性”表格。抗菌药物（纸片含药量）微生物群抑菌圈直径（mm）注释头抱西丁（30g）金黄色葡萄球菌W19mm$20mm头砲西对金黄色葡萄球菌纸片扩散法抑菌圈直径W19mm应报告对苯卩坐曲林耐药，20mm应报告对苯陞曲林敏感。凝固酶阴性葡萄球菌W24mm$25mm头范西J对凝固酶阴性葡萄球菌抑菌圈直径W24mm应报告对苯卩坐西林耐药，25mm应报告对苯醴西林敏感。注：应用标准的纸片扩散法试验条件，孵育24h：但如耐药则在孵育18h后可报告结果5.6在M2和M7表2C头抱西丁或苯卩坐西林一栏中增加用

8、30Ug头抱西丁纸片进行纸片扩散试验，其结果预示mecA介导的耐药性的注释。内容为“使用含30ug头孑包西纸片进行纸片扩散试验所得结果和替代临界值（见本表后面介绍）能用于葡萄球菌中预示mecA介导的耐药性”。5.7在M2表2C注释11和M7表2C注释10中补允了苯卩坐西林敏感的凝固陌阴性葡萄球菌对针剂和II服头也菌素、卩-内酰胺/卩-内酰胺酶抑制剂复合制剂及碳青孫烯类报告结果的解释。内容为“对J：苯卩坐西林敏感菌株，如测定针剂和II服头孑包菌素、0-内酰胺/B-内酰胺酗抑制剂复合制剂和碳青霍烯类等药物敏感性，应按常规解释标准对结果进行解释和报告。不具有meek基因或不产生PBP2a的分离株,但

9、MICM4Ug/ml,应报告对苯膛曲林耐药。6肠球菌属菌在M2表2D注释5和M7表2D注释4中增加“氨节西林敏感性可用J：预示粪肠球菌对亚胺培南的敏感性”内容。7嗜血杆菌属菌7.1在M2和M7表2E中最低QC推荐一栏中增加E.coliATCC35218作为测试阿莫西林/克拉维酸时的QC株。7.2在M2和M7表2E中增加IKetolide类Telitluomvcin药物的解释标准。Telitluomycm纸片含药量15Pg,抑菌圈直径15mm敏感,1214mm中介,Wllmm耐药MICW4pg/m1敏感，8Ug/ml4*介，$16g/ml耐药。7.3在M2和M7表1A中增加Gemifloxaci

10、n药物；在表2E中增加了Gemifloxacin解释标准。Gem辻loxacin纸片含药量5Pg,抑菌圈直径N18mm敏感，无耐药和中介解释标准oMICO.12Ug/m1敏感，无耐药和中介解释标准。8肺炎链球菌&1在M2和M7表2G中:増力IIKetolide类Telitluomyciii药物的解释标准。Telitluomycm纸片含药n：15Pg,抑菌圈直径M19mm敏感，1618mm中介,W15mm耐药。MICWlPg/ml敏感，2Ug/m1中介,$4g/ml耐药。8.2在M2和M7表1A“E组”中增加Gemifloxacin药物；在表2G中增加对该药的解释标准。Gemifloxacin纸

11、片含药量5Pg,抑菌圈直径M23mm敏感，2022mm中介，W19mm耐药。MICCO.12Ug/ml敏感，0.25Pg/ml4*介，0.5Pg/m1耐药。9可能的生物恐怖病原菌在卜17表2K+增加对鼠疫耶尔森菌、鼻疽伯克霍尔德菌和假鼻疽伯克霍尔德菌的介绍与药敏解释标准。9.1在试验条件一栏接种物制备中增加“在阳离子调整的MH肉汤（CAMHE）中生长法或直接菌落悬液法制备”。孵育条件中增加“鼠疫耶尔森菌孵育24h,若对照孔生长不良，则延长孵育24h”9.2在最低QC推荐一栏中增加“EscherichiacoATCC，35218（用J：阿莫西林/克拉维酸和假鼻疽伯克霍尔德菌）”和“Pse“do3

12、MsaemgjosdATCC27853（仅用鼻疽伯克霍尔德菌/假鼻疽伯克霍尔德菌）”。9.3在M7表2K注释（1）第一行炭疽芽胞杆菌后增加“鼠疫耶尔森菌、鼻疽伯克霍尔德菌或假鼻疽伯克霍尔德菌”。增加注释（3）和注释（4）2条注释，注释（3）内容“炭疽芽胞杆菌标准不适用J：其他芽胞杆菌”。注释（4）内容“警告：虽然内酰胺类抗生素対鼠疫耶尔森菌在体外有抗菌活性，但在感染动物模型中缺乏疗效，这些抗生素不能报告敏感”。9.4鼠疫耶尔森菌、鼻疽伯克霍尔德菌和假鼻疽伯克霍尔德13MIC（Pg/ml）解释标准微生物群抗菌药物MIC(Ug/ml)解释标准SIR假鼻疽伯克霍尔德菌阿莫西林/克拉维酸W8/416/

13、8$32/16鼻疽伯克霍尔德菌头抱他喘W816232假鼻疽伯克霍德菌鼻疽伯克霍尔德菌亚胺培南W4816假鼻疽伯克霍德菌鼠疫耶尔森菌庆人霍素.链毎素W4816鼻疽伯克霍尔德菌四坏素、多西环素W48$16假鼻疽伯克霍德菌鼠疫耶尔森菌鼠疫耶尔森菌环丙沙星W12$4鼠疫耶尔森菌氯孫素W816$32鼠疫耶尔森菌甲氧倾儆胺甲噁哇W2/38-$4/76假鼻疽伯克霍德茵QC（非苛养菌）10.1在M7表3脚注中增加“当使用嗜血杆菌培养基（HTM）测试阿莫西林/克拉维酸时E.coliATCC35218质控范围是16/2-64/2Ug/mlo10.2在M7表3中增力IIStaphylococcusaureusATC

14、C*29213和EnterococcusfaecalisATCC29212XjOritavancin药物的质控范围,分别是0.52Ug/ml和0.121ug/mloQC（苛养菌）11.1在M7表3A脚注中增加邛可莫西林/克拉维酸和阿莫西林対E.coliATCC35218在HTM上检测时质控范围分别是4/2-16/8Mg/ml和$256Ug/ml；测试阿莫西林有助J：检测该株菌是否仍然保持产B-内酰胺酶的能力”。11.2在M2表3A脚注中增加“在HTM上试验嗜血杆菌时，阿莫西林/克拉维酸对QC菌株E.coliATCC35218抑菌圈直径可接受范围：1722mm”。11.3在M7表3A中増加Str

15、eptococcuspneumoniaeATCC49619对Oritavancin药物的质控范I札0.008-0.06卩g/mlo12QC试验频度参考指南在M2和M7表3A后增加1个新表（表3E）,概述性提出了QC试验频度的建议。12.1M2表3E质起控制试验频度参考指南试验修改需连续QC试验犬数注释1520或30纸片使用新购产品或新批号X使用新的制造商产品X培养基（制备琼脂平板）使用新购产品或新批号X使用新的制造商产品X接种物制备变更接种物制备方法/X例如：从肉眼观察调浊度的方法改为用使用仪器设备光度计测量调浊度。变更接种物制备方法/X例如：从肉眼观察调浊度的方法改为不依赖使用者技术依赖光度

16、计测量的另外方法。测量抑菌圈直径更换抑菌圈直径测彊方法X例如：从手工测最改为用自动的抑茵圈阅读仪测最。另外，进行内部批准的研究。仪器/软件（如，自动化抑菌圈阅读仪）软件更新影响AST结果X监测所有药物，而不仅仅是与软件修改有牵涉的那些。仪器修理影响AST结果X取决j:修理的程度（如，关键部件，例如摄影用的设备），追加试验或许是适合的（如,5天）。注1：使用木指南询增加任何新抗菌药物需连续20或30天试验并収得令人满意结果（见M2-AS.10.5节）。注2：在试验摘人分离菌同时或之前进行QC。当天质控结果在可接受范刖，可发出病人结果。注3：商业制造商或内部进行的试验应遵守相应的内部程序或应用规则

17、。注4：结果出控的处理，参见M2-AS,10.6节。注5：制备接种物使用的肉汤、盐水等不需进行常规质控。12.2M7表3E质量控制试验频度参考指南试验修改需连续QC试验天数Si1520或30MIC试验使用新购产品或新批号X扩人稀释范围X减少稀释范围X使用新的方法（相同公司）使用新厂商MIC产&接种物制备变更接种物制备方法/X使用仪器设备变更接种物制备方法/依赖使用者技术仪器/软件软件更新影响AST结果X仪器修理影响AST结呆X例如：从临界值测定改成扩人了范围的MIC板。例如：从扩人了稀释范围的MIC板改成临界值测定板。X例如：从肉眼读板改成仪器读板。从过役改成快速MIC试验。另外，进行内部批准的研究。X进行内部批准的研究。例如：从肉眼观察调浊度的方法改为用光度计测量调浊度。X例如：从肉眼观察调浊度的方法改为不依赖光度计测鼠的另外方法。监测所有药物，而不仅仅是与软件修改有牵涉的那些。取决j:修理的程度（如，关键部件，例如摄影用的设备），追加试验或许是适合的（如，5天）。注1：使用木指南询增加任何新抗菌药物需连续20或30天试验并収得令人满意结果（见M7-A6