富硒发芽糙米调节小鼠血脂和保护肝组织作用的研究

1、富硒发芽糙米调节小鼠血脂和保护肝组织作用的研究篇幅过大，精简内容，尤其是结果分析中的语言收稿日期：基金项目：江苏省产学研前瞻性联合研究项目（BY2012037）；江苏省农业自主创新基金项目（CX（12）3986）作者简介：胡玲玲（1990），女，硕士研究生，研究方向为食品科学工程。E-mail：2013108081*通信作者：李春阳（1966），男，博士，研究员，研究方向为营养与活性物质，农产品精深加工。E-mail：排版时删除根据要求已精简内容补充作者等中英文信息，作者简介等内容请参照修改意见01认真修改首页左下方标注下列信息：基金项目（必须包括项目编号）、收稿日期、作者简介、通讯作者，详见

2、修改意见01胡玲玲1,2，李春阳1,2*，曾晓雄1，吴建苏3已补充作者信息和项目基金号（1. 南京农业大学食品科技学院，江苏省南京市 210095；2. 江苏农业科学院农产品加工所，江苏省南京市 210014；3. 南京远望富硒农产品有限责任公司，江苏省南京市 211500）摘要：精简摘要内容约200300字，并请注意修改英文摘要本文以小鼠为实验对象，研究富硒发芽糙米（含硒0.870mg/kg）对小鼠血脂水平和肝组织的影响。结果表明：与模型组小鼠相比，富硒发芽糙米低剂量组（10%富硒发芽糙米）小鼠的体重增长比、血清甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白（LDL-C）水平显著降低（P0.05)，肝组织谷

3、胱甘肽（GSH）水平显著升高（P0.05)；富硒发芽糙米中、高剂量组（17%、25%富硒发芽糙米）小鼠的血清总胆固醇（TC）、TG、LDL-C水平和肝组织谷草转氨酶（GOT）、谷丙转氨酶GPT、丙二醛（MDA）水平显著降低（P0.05)，血清HDL-C水平、肝组织GSH、SOD水平和肝指数显著升高（P0.05)。与模型组小鼠相比，当给小鼠喂食含富硒发芽糙米25%的高脂饲料时，高剂量组小鼠血清TC、TG、LDL-C水平和体重增长比分别下降56.80%、77.53%、55.84%、3.75%，HDL-C水平升高74.03%；肝组织中GOT、GPT、MDA水平分别降低65.66%、38.60%、50

4、.32%，GSH、SOD水平和肝指数分别升高193.98%、187.33%、31.46%；。此外同时，富硒发芽糙米高剂量组小鼠肝脏组织较紧密，色泽红且被膜光滑。结论表明，本实验中的富硒发芽糙米具有调节小鼠血脂水平，控制小鼠体重增长及保护组织的作用摘要内容已精简。关键词：富硒发芽糙米；发芽糙米；血脂；肝组织；保护作用Effects of selenium-enriched germinated brown rice on blood lipid and liver protection in miceHU Ling-ling1,2，LI Chun-yang1,2*，ZENG Xiao-xiong

5、1，WU Jian-su3Nanjing Agriculture University,Food College,Nanjing 210095,China；2. Institute of Agro-Food Science and Technology,Jiangsu Academy of Agriculture Science,Nanjing 210014,China；3.Jiangsu Yuanwang Selenium-rich Agricultural Products Co,Ltd.Nanjing 211500,China)Abstract: This study investiga

6、ted the selenium-enriched germinated brown rice influence on hypolipidemic and liver protection in mice. The results demonstrated that: compared with the HFD group, the low dose group(10% se-enriched germinated brown rice) mice weight growth rate, the concentration of TG, LDL-C, GSH were significant

7、ly changed（P0.05). Besides, compared with the HFD group, the medium and high dose groups(17% 、25% se-enriched germinated brown rice) TC, TG, LDL-C, GOT, GPT, MDA were significantly decreased（P0.05), HDL-C, GSH, SOD and the liver index were significantly increased（P0.05). Compared to the HFD group, h

8、igh dose se-enriched germinated brown rice group eating high fat forage contained 25% selenium-enriched germinated brown rice mice serum TC, TG, LDL-C and weight growth rate were respectively decreased 56.80%, 77.53%, 55.84%, 3.75%, HDL-C were increased 74.03%; GOT, GPT, MDA in liver tissue were res

9、pectively decreased 65.66%、38.60%、50.32%, GSH，SOD and the liver index were respectively increased 193.98%、187.33%、31.46%. Also the high dose groups liver tissue were more close, red and smooth. The result showed that selenium-enriched germinated brown rice (contain 0.870 mg/kg selenium) possess the

10、efficacy of lipid-lowering, controlling weight and protecting the liver.Key words: selenium-enriched germinated brown rice; germinated brown rice; blood lipid; liver tissue; protection effects随着生活水平的提高，人们的饮食结构发生改变，导致摄入的胆固醇、脂肪等过多，高血脂症、脂肪肝的发病率逐年增高，高血脂症发病率达21.4%1-2，如不及时控制可能会导致中风、肝癌等疾病3-42。现代营养学研究表明5-63

11、-4，富硒发芽糙米具有降低血清胆固醇，增强机体抗氧化功能的功效7-85。谭俊峰等96对GABA超微绿茶粉进行辅助降血压研究，结果显示自发性高血压大鼠高剂量组（5.00 g/kg）血压显著低于模型对照组（P0.05）。Tomohide Hori等107研究GABA对小鼠肝脏移植过程中对抗受激的影响，结果显示，GABA有显著改善器官生存，组织正常的功效。陈利明等118研究发现相对于高脂膳食，富硒灵芝对小鼠动脉粥样硬化有显著缓解作用（P0.05）。肖颜颜等129用不同剂量富硒大麦汁对小鼠灌胃，18 d数值与量单位之间空一格（百分号除外）。例如32 ，1.50%。请全文照此规则修改后数值与量单位之间空

12、一格（百分号除外）已改，富硒大麦苗低、中、高剂量组均能显著抑制CCl4所致急性肝损伤小鼠ALT活性的升高（P0.05），明显改善肝组织损伤程度，并与其剂量呈正相关，并且具有明显提高脾脏指数（P0.05）。本文主以富硒发芽糙米（含硒0.870 mg/kg）为原料，研究了富硒发芽糙米（含硒0.870 mg/kg）对降低小鼠血脂水平和保护肝脏组织的影响，以期为其日后产品的设计提供一些理论依据。材料与方法动物与饲料 72只6周大小、雄性健康昆明小鼠（mus musculus），由南京大学-南京生物医药研究院提供，合格证号：SCXK(苏)2010-0001，饲养于南京大学模式动物研究所动物SPF级实验室

13、内，动物房许可证号为SYXK(苏)2010-0003，动物实验通过南京大学-南京生物医药研究院动物实验伦理委员会审核普通饲料、高脂饲料（基础+1%胆固醇+10%猪油）由南京圣民科研动物养殖场制备。材料与试剂序号已改序号有误，请修改、富硒发芽南粳46糙米（Oryza sativa L）（含硒0.870 mg/kg）： 实验室研制；总胆固醇（T-CHO）试剂盒、甘油三酯（TG）试剂盒、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）试剂盒、蛋白定量测试盒、谷草转氨酶（GOT）试剂盒、谷丙转氨酶（GPT）试剂盒、谷胱甘肽(GSH)试剂盒、丙二醛（MDA）试剂盒、总超氧化物歧化

14、酶（T-SOD）试剂盒： 南京建成生物工程研究所。仪器与设备试剂材料格式已改试验试剂采用“材料名称（需说明事项）：生产单位或公司”的格式材料与仪器要标注厂家，仪器要标注型号，材料和仪器与厂家之间用“：”隔开，不同的材料或仪器之间用“；”隔开。Berthold LB941微孔板式多功能分析仪： 德国BERTHOLD TECHNOLOGIES，；UV5500紫外可见光光度计： 上海元析仪器有限公司，；GTR16-2高速冷冻离心机： 北京时代北利离心机有限公司；，YS-04高速粉碎机 北京燕山正德机械设备有限公司。方法富硒发芽糙米制备方法糙米筛选除杂清洗、消毒、清洗亚硒酸钠浸泡培养灭酶干燥成品。将挑

15、选过后的糙米用1%的次氯酸钠浸泡5 min，清洗，再在27 下用质量浓度为68 mg/L亚硒酸钠溶液恒温浸泡20 h。糙米浸泡后连营养液转入发芽皿中，置于湿度为85%，温度为30 的恒温恒湿培养箱中培养31 h。糙米发芽结束后，在80 水浴锅中灭酶10 min，然后在50 烘箱中干燥5 h，取出备用1310。 动物饲养实验72只昆明种健康小鼠6周龄大，在232 饲养，喂养基础饲料一周。然后随机分为六组（每组12只），分别为基础组、高脂模型组、富硒发芽糙米高、中、低剂量组、发芽糙米组。基础组喂食普通饲料，高脂饲料组喂食高脂饲料，低剂量组喂食含10%富硒发芽糙米的高脂饲料，中剂量组喂食含17%富硒

16、发芽糙米的高脂饲料，高剂量组喂食含25%富硒发芽糙米的高脂饲料，发芽糙米组喂食含17%发芽糙米的高脂饲料14-1611-12。实验期间，动物自由摄水，采食，每隔一天换一次水，每隔两天定量加一次饲料并换垫料，实验周期8周。1.4.3指标检测小鼠每隔一周称量体重，记录体重变化。连续喂养8周后，禁食不禁水12 h后，摘眼球取血，将血液以3000 r/min条件离心10 min，分离血清，保存于-20 冰箱中，按照总胆固醇试剂盒、甘油三酯试剂盒、低密度脂蛋白试剂盒、高密度脂蛋白试剂盒的方法分别测定血清的总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白水平。解剖取出肝脏称重，计算肝脏指数。取一小部分新鲜肝

17、脏用多聚甲醛固定，然后乙醇洗脱，脱水后浸蜡包埋，之后切片HE染色，然后切片脱水封片在显微镜下观察。多余的肝脏于-80 冰箱中保存。取1 g解冻肝脏用生理盐水磨成浆，配制成1%和10%的肝脏匀浆液，按照蛋白测定试剂盒、谷草转氨酶试剂盒、谷丙转氨酶试剂盒、谷胱甘肽试剂盒、丙二醛试剂盒和总超氧化物歧化酶试剂盒的方法分别测定小鼠肝脏的抗氧化指标水平。数据统计及分析采用SPSS20.0统计软件进行数据统计分析。数据表示为平均值标准差。用GraphPad prism5.0作图。结果与分析富硒发芽糙米对高脂膳食小鼠体重的影响由表1可知，实验开始时各组小鼠体重无显著差异，喂养期间生长发育良好，无死亡现象。饲料

18、喂养8周后，小鼠体重明显增长，模型组小鼠的体重高于其它各组小鼠体重，且除了富硒发芽糙米中剂量组外均具有统计学显著差异（P0.05）。富硒发芽高、中、低剂量组和发芽糙米组小鼠体重增长比均低于模型组小鼠，其中低剂量组小鼠体重增长比较模型组差异显著（P0.05）。这是由于富硒发芽糙米中含有丰富的膳食纤维和矿物质，遇水溶胀性能强，可使小鼠产生饱腹感，适度控制小鼠的进食。此外，富硒发芽糙米中的硒和GABA对小鼠体重增长也有一定的控制作用，因此长期食用富硒发芽糙米具有一定的减肥功效17-1813。表1 富硒发芽糙米对小鼠体重的影响Table1 Selenium-enriched germinated br

19、own rice on the influence of mice weight初始体重（g）8周后体重（g）体重增长比（%）基础组24.0380.391a43.5381.538a80.9845.024ab模型组24.6260.431a48.3631.361b96.7306.331b低剂量组24.7000.645a43.0982.289a74.2757.726a中剂量组24.5560.677a45.6501.842ab85.9275.683ab高剂量组24.2800.870a42.9632.189a77.94510.229ab发芽糙米组24.7831.095a44.0632.504a77.56

20、62.900ab注：表中一纵栏上标不同表示组间差异有统计学意义（P0.05）。富硒发芽糙米对高脂膳食小鼠血脂的影响已精简内容分出层次。精简内容由表2和图1可知，与基础对照组相比，高脂模型组小鼠血清TC、TG和LDL-C水平显著升高（P0.05）；HDL-C显著降低（P0.05），说明长期高脂膳食可导致小鼠血脂TC、TG、LDL-C、HDL-C水平发生显著变化。由表2和图1A、B、C可知，富硒发芽糙米低、中、高剂量组和发芽糙米组小鼠血清的TC、TG和LDL-C水平均较模型组小鼠显著下降（P0.05）。由表2和图1B可知，富硒发芽糙米低、中、高剂量组和发芽糙米组小鼠血清的TG水平较模型组均显著下降

21、（P0.05），且富硒发芽糙米中剂量组小鼠血清的TG水平显著低于发芽糙米小鼠的TG水平（P0.05），这是由于富硒发芽糙米相对于发芽糙米多了硒元素，硒对高血脂症有减缓作用，因此对小鼠血清TG水平有降低作用。由表2和图1C可知，富硒发芽糙米低、中、高剂量组和发芽糙米组小鼠血清的LDL-C水平较模型组均显著下降（P0.05）。由表2和图1D可知，富硒发芽糙米中、高剂量组小鼠血清的HDL-C水平较模型组相比显著升高（P0.05）。与模型组小鼠相比，富硒发芽糙米高剂量组小鼠血清TC、TG、LDL-C水平分别下降56.80%、77.53%、55.84%、3.75%，HDL-C水平升高74.03%。综上可

22、知，当给小鼠喂养25%富硒发芽糙米+75%高脂饲料时，小鼠血清TC、TG和LDL-C水平较模型组显著降低（P0.05），HDL-C水平较模型组显著升高（P0.05），这主要是由于富硒发芽糙米胚芽和糠皮中含有丰富的GABA，本实验中GABA含量为88.453 mg/100g，含量丰富，能够有效降低小鼠血脂；且与发芽糙米相比富硒发芽糙米中富集了大量有机硒，本实验中富硒发芽糙米硒含量为0.870 mg/kg，对降血脂、降血压，防止动脉粥样硬化，减少血栓形成等都有一定的效果19-2014。，因此富硒发芽糙米组相对于糙米组来说降血脂效果更强。表2 富硒发芽糙米对小鼠血脂的影响Table2 Seleniu

23、m-enriched germinated brown rice on the influence of the level of blood lipid in mice总胆固醇TC（mmol/ L）甘油三酯TG（mmol/L）低密度脂蛋白LDL-C（mmol/L）高密度脂蛋白HDL-C（mmol/L）基础组3.3110.529a3.4550.347a0.9480.241a2.1730.252a模型组4.8750.350b6.1100.714b2.3440.282b1.6520.134b低剂量组3.7360.447ab3.0630.833ac1.4590.437a1.9460.151ab中剂量

24、组2.9880.421ac1.6530.465c1.1850.276a2.2260.129a高剂量组2.1060.245c1.3730.157d1.0350.312a2.8750.205c发芽糙米组3.0680.304ac2.3710.222a1.1130.109a1.9820.169ab注：表中一纵栏上标不同表示组间差异有统计学意义（P0.05）。A B C D图1 富硒发芽糙米对小鼠血脂水平的影响Fig1 Selenium-enriched germinated brown rice on the influence of the level of blood lipid in mice富

25、硒发芽糙米对小鼠肝组织匀浆指标和肝指数的影响由表3可知，较基础组相比，模型组小鼠肝脏GOT、GPT水平显著升高（P0.05），GSH水平显著降低（P0.05），表明高脂膳食可导致小鼠肝脏组织中GOT、GPT、GSH水平的异常。由表3和图2可知，模型组小鼠肝脏GOT、GPT水平高于其它组，GSH水平低于其它组。由表3和图2A、B可以看出，富硒发芽糙米中、高剂量组和发芽糙米组小鼠肝脏的GOT、GPT水平较模型组小鼠显著下降（P0.05），且富硒发芽糙米中剂量组小鼠较发芽糙米组小鼠肝脏GOT、GPT水平显著下降（P0.05）；由表3和图2B可知，富硒发芽糙米中、高剂量组小鼠肝脏的GPT水平较模型组显

26、著降低（P0.05），而且富硒发芽糙米中剂量组小鼠较发芽糙米组小鼠肝脏的GPT水平显著降低（P0.05）；由表3和图2C可知，富硒发芽糙米低、中、高剂量组小鼠和发芽糙米组小鼠肝脏的GSH水平较模型组显著升高（P0.05）。较模型组小鼠相比，富硒发芽糙米高剂量组小鼠肝脏GOT、GPT水平分别下降降低65.66%、38.60%，GSH水平升高193.98%。由表4可知，较基础组相比，模型组小鼠肝脏SOD水平和肝指数显著降低（P0.05），MDA水平显著升高（P0.05），说明高脂膳食会引起小鼠肝组织中SOD和MDA水平的异常。由表4和图3D、F可知，富硒发芽糙米中、高剂量组和发芽糙米组小鼠肝脏的S

27、OD水平和肝指数较模型组小鼠显著升高（P0.05），且富硒发芽糙米中剂量组小鼠较发芽糙米组小鼠肝脏SOD水平显著升高（P0.05）；由表4和图3E可知，富硒发芽糙米中、高剂量组小鼠肝脏的MDA水平较模型组显著降低（P0.05），且富硒发芽糙米中剂量组小鼠较发芽糙米组小鼠肝脏的MDA水平显著下降（P0.05）；由表4和图3F可知，富硒发芽糙米中、高剂量组小鼠的肝指数较模型组显著升高（P0.05）,而富硒发芽糙米中剂量组小鼠较发芽糙米组小鼠的肝指数无显著变化（P0.05）。较模型组小鼠相比，富硒发芽糙米高剂量组小鼠肝脏MDA水平下降50.32%，SOD水平和肝指数分别升高187.33%、31.46

28、%。综上可知，当给小鼠喂养25%富硒发芽糙米+75%高脂饲料时，小鼠肝脏GOT、GPT、SOD水平和肝指数较模型组显著降低（P0.05），GSH和MDA水平较模型组显著升高（P0.05），这主要是由于富硒发芽糙米胚芽和糠皮中含有丰富的抗氧化成分，且相对于发芽糙米相比，富硒发芽糙米含有丰富的GABA和大量有机硒，能够在不同程度上对小鼠肝组织起到保护作用21-221。此外免疫器官的重量能初步衡量机体免疫功能，富硒发芽糙米能显著升高肝脏指数，证实了富硒发芽糙米对机体免疫调节功能12、23-2415-16。表3 富硒发芽糙米对小鼠肝脏组织GOT、GPT、GSH的影响Table3 Selenium-en

29、riched germinated brown rice on the influence of the level of GOT、GPT、GSH in miceGOT(U/gprot)GPT(U/gprot)GSH(mgGSH/gprot)基础组78.6508.383ab10312.756ab2.9100.351ac模型组148.17414.315c135.0006.838c1.3120.173b低剂量组142.64113.681c130.48612.125ac2.4470.241a中剂量组53.3725.472b86.3718.183b3.2420.319cd高剂量组50.8903.393

30、b82.8866.112b3.8570.253d发芽糙米组95.23112.619a128.59011.813ac2.8920.300ac注：表中一纵栏上标不同表示组间差异有统计学意义（p0.05）。表4 富硒发芽糙米对小鼠肝脏组织SOD、MDA和肝指数的影响Table4 Selenium-enriched germinated brown riceon the influence of the level of SOD、MDA and liver index in miceSOD(U/mgprot)MDA(nmol/mgprot)肝指数(%)基础组88.16310.294ae4.0460.4

31、07ad4.0670.191a模型组43.2891.651b5.6920.397b3.4770.106b低剂量组53.4433.533bc4.8140.398ab3.9160.107ab中剂量组105.81310.827de3.0710.288cd4.2820.193ac高剂量组124.38413.666d2.8280.268d4.5710.257c发芽糙米组70.4956.089ac4.8130.576ab3.7230.160ab注：表中一纵栏上标不同表示组间差异有统计学意义（p0.05）。A B C图2 富硒发芽糙米对小鼠肝脏组织GOT、GPT和GSH的影响Fig2 Selenium-en

32、riched germinated brown rice on the influence of the level of GOT、GPT、GSH in miceD E F图3 富硒发芽糙米对小鼠SOD、MDA和肝指数的影响Fig3 Selenium-enriched germinated brown riceon the influence of the level of SOD、MDA、liver index in mice2.2 富硒发芽糙米对小鼠肝脏表观及肝脏切片的影响由图4可以看出，基础组小鼠肝脏外形正常，呈暗红色，被膜光滑；模型组、富硒发芽糙米低剂量组和发芽糙米组小鼠肝脏外形正常，

33、但是颜色上有不同程度的偏白，模型组小鼠肝脏被膜粗糙，富硒发芽糙米低剂量组小鼠和发芽糙米组小鼠肝脏被膜光滑；富硒发芽中剂量组和高剂量组小鼠肝脏正常，呈暗红色，被膜光滑。富硒发芽糙米中、高剂量对小鼠肝脏起到一定保护作用。这是因为富硒发芽糙米中含有丰富的GABA和有机硒，可以在不同程度上起到对小鼠肝脏的保护作用25-2717-18。小鼠肝脏切片显微镜观察图5表明，基础组小鼠肝小叶中央有一条中央静脉，肝细胞以中央静脉为中心向周围呈放射状排列，形成肝索，细胞排列紧密；模型组、发芽糙米组小鼠肝索排列杂乱，肝细胞排列松散，脂肪细胞增多；低剂量组、中剂量组和高剂量组小鼠肝小叶中央静脉周围肝索排列成放射状，细胞

34、排列紧密程度依次递增，脂肪细胞较模型组小鼠肝脏切片减少。由上可以看出，用富硒发芽糙米干预高脂膳食，可以改善小鼠肝脏组织由高脂膳食引起的脂肪含量增加现象。 基础组 模型组 低剂量组 中剂量组 高剂量组 发芽糙米组图4 富硒发芽糙米对小鼠肝脏表观影响Fig4 Selenium-enriched germinated brown rice on the influence of mice liver apparent 基础组 模型组 低剂量组 中剂量组 高剂量组 发芽糙米组图5 富硒发芽糙米对小鼠肝脏切片HE染色的影响Fig5 Selenium-enriched germinated brown r

35、iceon the influence of mice liver biopsy HE dyeing结论本实验研究结果表明，富硒发芽糙米可以降低小鼠血清总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白胆固醇水平，升高高密度脂蛋白胆固醇水平，并且中剂量的富硒发芽糙米在降低甘油三酯水平上效果比发芽糙米组更好；富硒发芽糙米还具有控制体重增长的作用；同时，高剂量组富硒发芽糙米可以降低小鼠肝脏组织中谷草转氨酶、谷丙转氨酶和丙二醛的含量，升高谷胱甘肽和超氧化物歧化酶的含量，对小鼠肝脏有一定的保护作用。肝脏光镜结果表明，高脂膳食组小鼠肝索排列杂乱，肝细胞排列松散，脂肪细胞增多，富硒发芽糙米高剂量组细胞排列紧密，脂肪细胞较少

36、。综上所述，用富硒发芽糙米（含硒0.870 mg/kg）喂食小鼠干预高脂膳食，可起到降血脂、改善肝组织代谢、保护肝脏的作用，这为本产品日后生产开发提供了一定的理论基础 参考文献参考文献已改文献略多，尽量删减。1 Prasanna G S, Purnima A. Protective Effect of Leaf Extract of Trichilia connaroides on Hypercholesterolemia Induced Oxidative StressJ. International Journal of Pharmacology, 2011, 7(1):106-112.

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