植物药用成分的提取和生产工艺

1、植物药用成分的提取和生产工艺第一节 概 述植物的化学成分共有：普遍存在，没什么生物活性，不起医疗作用，称为“无效成分”。某些植物特有：有明显生物活性并有医疗作用，通常称为“有效成分”。但是，有效与无效只是相对的。一、溶剂提取法1. 溶剂提取法的原理 溶剂提取法是根据天然植物中各种成分在溶剂中的溶解性质，选用对活性成分溶解度大，对不需要溶出成分溶解度小的溶剂，而将有效成分从药材组织内溶解出来的方法。 选择溶剂要注意以下问题： 溶剂对有效成分溶解度大，对杂质溶解度小； 溶剂不能与有效成分起化学反应； 溶剂要经济、易得、使用安全等。2. 溶剂的选择（1）水 中草药中亲水性的成分，如：无机盐、糖类、分

2、子不太大的多糖类、鞣质、氨基酸、蛋白质、有机酸盐、生物碱类、苷类都能被水溶出。（2）亲水性有机溶剂 一般是指能与水混溶的有机溶剂，如：乙醇、甲醇、丙酮等。（3）亲脂性有机溶剂 一般不能与水混溶的有机溶剂，如：石油醚、苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、二氯乙烷等。3. 提取方法（1）浸渍法热水浸冷浸热有机溶剂浸（2）渗漉法（3）煎煮法水煎煮（4）回流提取法（5）连续提取法索氏提取器（6）超临界流体萃取 用超临界流体为萃取剂，从液体或固体中萃取出植物天然药用成分，并进行分离的一种技术。CO2因其本身无毒、无腐蚀、临界条件适中等特点，成为超临界流体萃取法中最为常用的超临界流体。（7）酶法提取 用纤维素酶、果

3、胶酶、蛋白酶等，破坏植物细胞壁，以有利于有效成分最大限度的溶出。4. 影响提取效率的因素（1）原料的粒度（2）提取的温度（3）提取的时间（4）料液配比二、其他提取法1.水蒸气蒸馏法2.升华法3. 压榨法第二节 银杏黄酮黄酮类化合物：以黄酮（2-苯基色原酮）为母核而衍生的一类黄色色素。其中包括黄酮的同分异构体及其氢化的还原产物 ，也即以C6-C3-C6为基本碳架的一系列化合物。 黄酮类化合物生理活性多种多样，主要表现在： 对心血管系统的作用； 抗肝脏毒作用； 抗炎作用； 雌性激素样作用； 抗菌及抗病毒作用； 泻下作用； 解痉作用。 一、结构与性质 银杏中黄酮类化合物含量较高，特别是叶中，根据分析

4、测定，银杏叶提取物浸膏中含有160多种成分，主要是黄酮苷及银杏内酯、白果内酯等。其中黄酮类化合物就有44种，到目前为止，已从中分离出20多个黄酮类化合物。R黄酮和黄酮醇是黄酮化合物中的第一类，也是银杏黄酮中的主要表现形式。芹菜素 木犀草素山奈素 槲皮素银杏双黄酮，银杏黄素。 黄色结晶。熔点347349 (分解)。盐酸-镁粉反应呈橙红色，三氯化铁反应呈绿色，浓硫酸中呈黄色(无荧光)，氢氧化钠中呈黄色 。存在于银杏科植物银杏的叶、外种皮中。有扩张血管作用，用于治疗心绞痛。 白果素，黄色针状结晶, 245250软化, 约278 重新固化, 最后在320 熔化(分解)。存在于银杏科植物银杏的叶、罗汉果

5、植物罗汉松的叶中。有降低血清胆固醇的作用, 能使磷脂和胆固醇的比例趋于正常, 用于治疗心绞痛。 白果素银杏叶成品减压回收乙醇真空干燥 洗脱液树脂（二次再用）80%乙醇洗涤至无色洗涤后树脂水洗液（弃去）上柱，水洗至无色 吸附树脂8%树脂吸附中性滤液盐酸调pH为7过滤液过粗砂柱上清液滤渣（弃去）沉淀粗滤液粗滤 活性炭吸附浸提液粉碎、沸水浸提3次pH为10左右，每次3h1. 水提取法二、生产工艺2. 乙醇提取法3. 丙酮提取法银杏叶提取物（总黄酮）回收溶剂至干滤液20%乙醇溶液，过滤提取物回收乙醇，静置，过滤滤液95%乙醇提取3次，过滤提取液三、质量检测1. 含量测定（1）基本原理 银杏叶提取物中的

6、黄酮主要为槲皮素(Quercetin)、山奈素(Kaempferol)、异鼠李素(Isorhamnetin)与各种糖基形成的苷，而银杏双黄酮和黄酮苷元在银杏提取物中含量极低，均低于千分之一。因此HPLC分析测定银杏黄酮类化合物含量时一般通过酸水解方法，使许多复杂的黄酮苷转化为简单的槲皮素、山奈素和异鼠李素三种苷元，然后以槲皮素为标准品或槲皮素+山奈素+异鼠李素为标准品，用RI一HPLC法测定这三种苷元的含量。最后通过转化系数求得黄酮类化合物的含量。（2）测定方法色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-0.4%磷酸溶液（50:50）为流动相，检测波长为360nm。对照品

7、样品的制备：分别精密称取五氧化二磷干燥过夜的槲皮素、山奈素、异鼠李素对照品，加甲醇制成1mL分别含、 、 的溶液，作为对照溶液。测定时精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10L，注入液相色谱仪，测定，分别计算三种黄酮苷元的含量。四、药理作用与临床应用银杏黄酮的药理作用（1） GBE有防治高血脂的功效（2） 改善脑循环（3）抗脂质过氧化作用（4）其他2. 银杏黄酮的临床应用（1） 治疗心脑血管疾病（2）银杏黄酮苷治疗原发性肾病综合症（3） 治疗血管性痴呆（4）眼科应用第三节 挥发油 挥发油也称为精油，是一类广泛存在于植物中具有生物活性的成分，是用水蒸气蒸馏所得的与水不混溶的挥发性油状成分的总称。一、

8、结构与性质结构 挥发油所含有的化学成分比较多，是一种混合物，其组成主要包括以下几类：（1）萜类化合物 主要是单萜、倍半萜及其含氧衍生物。其构成挥发油的主要成分。 含氧衍生物有醇、醛、酮、醚、酚、酯等，含量虽少但大多具有优异芳香气，是挥发油中的重要成分。（2）非萜类化合物芳香族化合物主要为萜源衍生物，如麝香草酚、-玉金烯等。有些是苯丙烷类衍生物，多具C6-C3骨架，多为苯类化合物或其酯类，如桂皮醛等；也有C6-C1骨架，如香荚兰醛等。 麝香草酚 桂皮醛 香荚兰醛脂肪族化合物 在挥发油中也存在某些小分子脂肪族化合物，有挥发性，广泛存在于水果中，如正葵烷、辛醛、丁酸乙酯、鱼腥草素等。 其他类化合物

9、在药用植物化学成分中，有些虽然不是以挥发油的形式存在，但经过酶解后，产生了一些具有挥发特性的化合物，往往也被称为挥发油。2. 性质（1）性状 颜色：大多为无色或微带淡黄色，也有少数具有其它颜色。如： 洋甘菊油显蓝色 麝香草油显红色 气味：大多数具有香气或其它特异气味。形态：为透明液体，有的在冷却时其主要成分可能结晶析出。这种析出物习称为“脑”，如薄荷脑、樟脑等。挥发性：指在常温下可自行挥发而不留任何痕迹，这是挥发油与脂肪油的本质区别。（2）溶解性脂溶性，难溶于水易溶石油醚、乙醚、二硫化碳、油脂等（3）稳定性挥发油对空气、光、热均具有敏感性，经常与空气接触会逐渐氧化失去原有香味，甚至变质（树脂化

10、），使挥发油密度变大、黏度增大、颜色变深、因此挥发油应装入棕色瓶内低温保存。二、生产工艺（一） 挥发油的提取1. 水蒸气蒸馏法将药用植物切碎后，加水浸泡，然后采用直接蒸馏或水蒸气蒸馏法将挥发油蒸馏出来。2. CO2超临界流体萃取法特点：防止氧化、热解及提高品质； 所得芳香挥发油气味与原料相同。 工艺技术要求高，设备费用投资大。3.吸收法4. 有机溶剂提取法溶剂石油醚、二硫化碳、四氯化碳、苯等方法回流浸出法、冷浸法等处理提取后，减压蒸去有机溶剂后即得浸膏精制加热乙醇溶解浸膏，放置冷却，滤除杂质，回收醇得净油。（原理：利用乙醇对植物蜡等脂溶性杂质的溶解度随温度下降而降低的特性）5. 压榨法 此法适

11、用于新鲜原料，如桔、柑、柠檬果皮含挥发油较多的原料。 捣碎冷压静置分层粗品优点保持原有的新鲜香味缺点可溶出原料中不挥发性物质。如：柠檬油常溶出原料中的叶绿素，而使柠檬油呈绿色。（二）挥发油成分的分离1. 冷冻处理 将挥发油置于0以下使析出结晶，如无结晶析出可将温度降至-20，继续放置。取出结晶再经重结晶可得纯品。例：薄荷油制备薄荷脑薄荷油析出粗脑油析出粗脑较纯薄荷油-10放置12小时（第一批）（第二批）-20冷冻24小时加热熔融0冷冻2. 分馏法利用成分沸点不同，气化先后次序不同进行分离的。沸点规律： 1.碳原子数：碳多沸点 2.双键数：多沸点 3.官能团：极性大沸点 酸 醇 酮醛 醚 4.反

12、式的沸点 顺式例：薄荷醇的提取分离薄 荷薄荷油 20150150200200230230300水蒸气蒸馏分 馏单萜烃类薄荷醇或酮倍半萜含氧物薄荷醇和酮0以下放置、析脑、过滤乙醇重结晶薄荷醇结晶油纯薄荷醇含大量薄荷酮和少量薄荷醇2002303. 化学方法根据挥发油中各组分的结构或官能团的不同，用化学方法处理，使各组分得到分离的方法。第四节 强心苷强心苷是存在于植物中具有强心作用的甾体苷类化合物，由强心苷元和糖缩合而产生的一类苷。 强心苷是治疗室率过快心房颤动的首选药和慢性心功能不全的主要药物。常见的含强心苷的天然药物铃兰、紫花洋地黄R为鼠李糖铃兰毒苷洋地黄毒苷黄花夹竹桃黄夹苷甲黄夹苷乙羊角拗R为

13、L夹竹桃糖羊角拗苷蟾 蜍蟾毒灵一、结构与性质（一）结构强心苷的基本结构是由甾醇母核和连在C17位上的不饱和内酯环构成苷元部分，然后通过甾醇母核C3位上的羟基和糖缩合而成。根据苷元部分C17上连接的不饱和内酯环的类型分为甲型（蟾蜍甾烯型）和乙型（强心甾烯型）两类。强心苷元是由甾体母核与C17取代的不饱和内酯环组成OOHHHORaObdrOOHHOaObdr甲型海葱苷元20212223243，14-二羟基海葱甾4,20,22-三烯-OOOHHHORaOOOHHO3514b乙型型毛地黄毒苷元H202223213，14-二羟基-5-强心甾-20（22）-烯（二）性质1. 通性强心苷多为无色结晶或无定形

14、粉末，味苦，对粘膜有刺激性。强心苷的溶解性与所连糖的种类和数目有关，一般可溶于水、甲醇、乙醇、丙酮等极性溶剂；略溶于乙酸乙酯、含醇三氯甲烷；难溶于乙醚、苯、石油醚等非极性溶剂。2. 脱水反应强心苷混合强酸（3%5%HCl）加热水解时，苷元往往发生脱水反应。（1）C14-OH最易发生脱水反应生成缩水苷元。（2）同时存在C14-OH和C16-OH，也易脱水，得到二缩水苷元。3. 水解反应 水解反应是研究强心苷组成的常用方法，分化学方法和生物方法两大类，化学方法主要有酸水解、碱水解和乙酰解；生物方法主要有酶水解。糖部分不同，其水解产物难易及产物均不同。（1）酸水解法温和酸水解用稀酸（0.02 0.0

15、5mol/L) 的盐酸或硫酸在含水醇中经短时间（半小时至数小时）加热回流，可使型强心苷水解成苷元和糖。（2）碱水解法NaHCO3、KHCO3主要使-脱氧核糖的酰基水解，而 -羟基糖及苷元上的酰基往往不水解。Ca（OH）2、Ba（OH）2可以使-脱氧核糖的、 -羟基上的、苷元上的酰基水解。（3）乙酰解法 在研究强心苷时，乙酰解常用来研究糖与糖之间的连接位置，如葡萄糖之间的1,6-糖苷键很容易乙酰解，而1,4-糖苷键较难乙酰解。（4）酶水解法 含强心苷的植物中，有水解葡萄糖的酶，在适宜条件下，能水解糖链末端的葡萄糖。但无水解-脱氧糖的酶，所以能水解除去分子中的葡萄糖而保留-去氧糖。蜗牛酶（一种混合

16、酶，蜗牛肠管消化液经处理而得）几乎能水解所有的苷键，能将强心苷分子的糖逐步水解，直至获得苷元，常用来研究强心苷的结构。二、生产工艺强心苷提起困难的原因：强心苷含量很低，且同一种植物中常含许多结构相近、性质相似的强心苷，每一种苷元又有原生苷和次生苷之分。多与糖类、皂苷、色素、鞣质等共存，这些成分的存在可影响强心苷在溶剂中的溶解度。在分离纯化过程中强心苷易受酸、碱或共存酶的作用，发生水解、脱水和异构化等反应，使生理活性降低，故提取分离时应注意控制酸碱性和抑制酶的活性。 一般提取溶剂常用70%80%的甲醇或乙醇，油脂或叶绿素多者要先脱脂；再用铅盐沉淀法或聚酰胺吸附法去除与其共存的杂质；最后再用CHC

17、l3和CHCl3：MeOH不同比例混合液依次萃取，将强心苷按极性大小分成几个部分，以备进一步分离。（二）分离1. 溶剂萃取法氯仿甲醇水毛花洋地黄苷A毛花洋地黄苷B毛花洋地黄苷C1:2251:550 1:2000均1:20几乎不溶 2. 逆流分配法也是利用强心苷在两相溶剂间分配系数不同而达到分离。3. 色谱分离法吸附色谱法一般用于分离亲脂性强心苷（单糖苷或次生苷），常用中性氧化铝（或硅胶）做吸附剂，苯、苯-氯仿、氯仿-甲醇做洗脱剂。4. 液滴逆流色谱法是分离弱亲脂性强心苷的一种有效方法，它是利用混合物中各组分在两液相间的分配系数差别，由流动相形成液滴，通过作为固相的液柱而达到分离纯化的目的。毛花

18、洋地黄粗粉粗总苷加入适量的乙醚-丙酮（2:1），搅拌成浆状，静置过夜，抽滤，结晶以适量乙醚：丙酮（1:1）洗涤，挥散溶剂后，100 烘干析出晶体的浓缩液加入抽松物质量倍蒸馏水，再加入少量晶种，摇匀，静置48h以上，待结晶浓缩液加适量甲醇，加热回流至全融。常压回收甲醇至剩余量为抽松量的0.3 倍抽松物回收氯仿，抽松水液氯仿液残渣（树脂、色素）回收氯仿 加乙醇至含醇量22%，用水液量倍的氯仿提取2次氯仿液水液（糖类等水溶性杂质）冷后，用倍量氯仿提取1次浓缩液减压回收乙醇至无醇味胶状物（叶绿素、树脂等）上清液加碳酸钠调pH至中性，在60 下减压回收乙醇至含醇量为10% 20%，于15下静置析胶，过夜

19、，次日吸取上清液醇液药渣用5倍量的热乙醇（60% 70%）浸渍渗漉，渗漉近完时再加2倍量的冷乙醇（70%）渗漉制备实例粗总苷结晶（主含苷丙） 母液减压浓缩，析晶氯仿层（主要含苷乙）稀甲醇层按上述分配比例进行第二次分离粗结晶（苷丙及部分苷乙）加压浓缩至小体积，冷却稀甲醇层氯仿层（主要含苷甲、苷乙）先将总苷溶于甲醇，滤过，再向滤液加氯仿和水，按总苷-甲醇-氯仿-水（1:100:500:500）的比例进行第一次分离第五节 香豆素又称香豆精，为顺势邻羟基桂皮酸的内酯，具特异香气。香豆素是具有苯骈-吡喃酮母核的一类 化合物的总称，属于苯丙素类衍生物，又称邻羟桂皮酸内酯，具芳香气味。其结构母核为 ：123

20、78465苯骈-吡喃酮 香豆素类在动植物及微生物中均有分布，如致癌成分黄曲霉素类及发光真菌中的亮菌素类均属于香豆素类。这类成分分布得最广的还是高等植物中，其中芸香科和伞形科中分布最多。它们在植物体内以游离状态或与糖结合成苷的形式存在，苷酶解可环合成游离的内酯状态。一、结构与性质（一）结构1. 羟基香豆素类绝大部分在苯核上有取代基，几乎所有的C7位都带有含氧基团。783242.呋喃香豆素香豆素核上异戊烯基常与邻位酚羟基环合成呋喃环 6 、7-呋喃骈香豆素和7、8-呋喃骈香豆素。（1）线型（6 、7呋喃骈香豆素型），补骨脂内酯型补骨脂内酯 （2）角形（7、8呋喃骈香豆素型），白芷内酯型白芷内酯(异

21、补骨内酯)3. 吡喃香豆素类香豆素母核上C6位或C8位的异戊烯基与邻羟基环合而成2，2-二甲基-吡喃环结构的香豆素类。（1）线型（6，7吡喃骈香豆素）： （2）角型（7，8吡喃骈香豆素）：黄曲霉素4.其他香豆素：指-吡喃酮环上有取代基的香豆素类。C3、C4位常有苯基、羟基、异戊烯基等的取代。黄檀内酯蟛蜞菊内酯344（二）性质1. 性状游离的香豆素多有完好的结晶形状，熔点71，沸点301.7 ，具有新割干草的特有气味。分子量小的有挥发性，能随水蒸汽蒸出，具升华性。而多数香豆素苷无香气，也不能升华。游离香豆素不溶于冷水，溶于沸水，易溶于甲醇、乙醇、氯仿、乙醚等有机溶剂。香豆素苷溶于水、甲醇、乙醇，

22、难溶于氯仿、乙醚。 某些香豆素及其衍生物具有荧光，在碱性溶液中荧光更显著。荧光的有无与强弱，与分子中取代基的种类和取代位置有关，如7-羟基香豆素有强烈的蓝色荧光，而7，8-二羟基香豆素无荧光。2. 与碱作用香豆素的-吡喃酮环具有，-不饱和内酯性质，在稀碱液中会逐渐水解生成顺邻羟基桂皮酸的盐，而顺邻羟桂皮酸不易游离存在，其盐的水溶液经酸化即闭环恢复成内酯基。这个闭合过程极易发生，即使在很弱的酸溶液中，如通入CO2也能促使其内酯化而闭环。HCoumaric HCoumaric OH-H+O-OO-OH-H+OH-长时间加热+OO-H+OH-长时间加热+3. 化学反应（1）环合反应香豆素分子中若酚羟

23、基的邻位有不饱和侧链时，常能相互作用环合成含氧的杂环结构，生成呋喃香豆素或吡喃香豆素类。OHOOOCH3OCH3OHCOOHOO（2）加成反应C3、C4双键、吡喃环或呋喃环上的双键及侧链双键等不同的存在形式。控制条件下氢化顺序：侧链不饱和键吡喃环或呋喃环上的双键C3、C4双键34二、生产工艺由香豆素的理化性质可知游离香豆素大多是低极性和亲脂性的，与糖结合的香豆素苷则极性较高，故我们常采用系统溶剂法将其分为几个部分。香豆素内酯遇碱皂化、加酸还原的性质及其小分子香豆素 的挥发性和升华性的性质也常用于其分离纯化中。只是由于其性质的不稳定性，在酸、碱、热的作用中要注意条件的控制，以免引起结构的破坏，得

24、到次生产物。1. 香豆素的提取分离方法（1）水蒸气蒸馏法： 小分子的游离香豆素因具有挥发性，可用水蒸气蒸馏法进行提取。（2）碱溶酸沉法 由于香豆素类可溶于热碱溶液中，加酸又析出，故用0.5%氢氧化钠水溶液加热提取，提取液冷却后再用乙醚除去杂质，然后加酸调节pH值至中性，适当浓缩，再酸化，则香豆素类及其苷即可析出。（3）系统溶剂法 从中药中提取香豆素类化合物时，可采用系统溶剂法。常用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、丙酮和甲醇顺次提取。石油醚对香豆素的溶解度不大，其萃取液浓缩后即可得结晶。乙醚是多数香豆素的良好溶剂，但也能溶出其他能溶性成分，如：叶绿素、蜡质等；其他极性较大的香豆素和香豆素苷，则溶于甲醇或

25、水中。 （3）系统溶剂法石油醚回流提取石油醚液回收至小体积浓缩液放置、析晶粗晶冷石油醚洗结晶（可能是混和物）进一步分离单体（亲脂性香豆素）残渣乙醚液乙醚回流提取回收分离单体（亲脂性较弱香豆素）残渣乙醇提取香豆素苷类药材粗粉回收分离乙醇液蛇床子素的提取蛇床子素的提取抗心律失常作用抗菌、抗病毒作用抗变态反应 蛇床子素对须发藓菌有较强抑制作用，花椒毒酚则具有显著的抗霉菌作用。 蛇床子总香豆素能直接扩张豚鼠器官平滑肌，对豚鼠吸入致痉剂所致的药物性哮喘有明显的保护作用，在体外能拮抗组织胺、慢反应物质引起的肠肌收缩，对小鼠被动性皮肤过敏反应有抑制作用，同时有一定的祛痰作用。抗炎作用 蛇床子素具有钙拮抗剂的

26、作用。 蛇床子总香豆素对角叉菜胶和鸡蛋清引起的大鼠足趾肿胀均有明显的抑制作用。 生物活性 蛇床子膏的制备工艺流程 蛇床子粗粉用70%乙醇浸提3次，合并提取液，减压回收乙醇，得稠膏。然后加稠膏3倍量的氯仿回流提取，过滤，减压回收氯仿，得含蛇床子素的干膏。工艺流程如下：第十一章 生物技术制药一、现代生物技术 以现代生命科学为基础, 把生物体系与工程学技术有机结合在一起，按照预先的设计，定向地在不同水平上改造生物遗传性状或加工生物原料, 产生对人类有用的新产品(或达到某种目的)之综合性科学技术。 二、生物技术制药 生物药物泛指包括生物制品在内的生物体的初级和次级代谢产物及生物体的某一组成部分，甚至整

27、个生物体用作诊断和治疗疾病的医药品。 生物技术药物是将一些难以规模化提取生产的微量生命活动物质，经分离纯化研究确证其结构、功效后，利用DNA重组技术和单克隆抗体技术等方法进行规模化生产而获得的蛋白质、多肽、酶、激素、疫苗、单克隆抗体和细胞生长因子等药物。包括基因工程药物、酶工程药物、动植物细胞工程药物等。三、生物技术制药的特点可以大量生产过去难以获得的生理活性蛋白和多肽，为临床应用提供有力的保障。可以提供足够数量的生理活性物质，以便对其生理和生化结构进行深入研究，从而扩大这些物质的应用范围。应用基因工程技术可发现、挖掘更多的内源性生理活性物质。内源性生理活性物质在作为药物使用时存在的不足之处，

28、可以通过基因工程和蛋白质工程进行改造和去除。利用基因工程技术可获得新化合物、扩大药物筛选来源。四、生物技术药物的种类1.细胞因子类（1）干扰素类，如： -干扰素（2）白细胞介素，已发现23种，IL-1、 IL-2 IL-23（3）集落刺激因子（CSF）类，如：粒细胞CSF（4）生长因子类，如：EGF、HGF（5）趋化因子类（6）肿瘤坏死因子（TNF），如：TNF-、TNF-2. 激素类有胰岛素、生长激素、心钠素、人促肾上腺皮质激素等。3. 治疗心血管及血液疾病的活性蛋白类（1）溶解血栓类，如：人组织纤溶酶原激活剂（tPA）（2）凝血因子类，如：凝血因子、凝血因子等。（3）生长因子类，如：促红细胞生成素（EPO）、血小板生成素（TPO）等。（4）血液制品，如：血红蛋白、白蛋白等。5. 可溶性细胞因子受体类，如：IL-1受体、TNF受体等。6.导向毒素类（1）细胞因子导向毒素，如：IL-1导向毒素、EGF导向毒素（2）单克隆抗体导向毒素，如：抗-B4-封闭的蓖麻毒蛋白7. 基因工程疫苗（1）基因工程亚单位疫苗，如：乙肝疫苗（2）基因工程载体疫苗，如：麻疹疫苗（3）核酸疫苗，如：流感疫苗、