溶血性链球菌讲义

1、溶血性链球菌检验 分布v溶血性链球菌在自然界中分布较广，存在于水、空气、尘埃、粪便及健康人和动物的口腔、鼻腔、咽喉中，可通过直接接触、空气飞沫传播或通过皮肤、粘膜伤口感染，被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也会对人类进行感染。上呼吸道感染患者、人畜化脓性感染部位常成为食品污染的污染源。引起化脓性感染、中毒性感染、超敏反应性疾病生物学性状 1形态结构 2培养特性 3分类 4生化反应 5. 抵抗力 形态与染色v球形或卵圆形，直径0.5 1 m，链状排列，链长短不一，短者48个细胞组成，长者2030个v无芽胞，无鞭毛，培养早期（24h）形成透明质酸的荚膜培养特性v需氧或兼性厌氧v营养要求较高，需补充血

2、液、血清、葡萄糖等v在血清肉汤中易形成长链，管底呈絮状沉淀v在血琼脂平板上，不同菌株溶血不一v最适生长温度为37，最适pH为7.4-7.6 培养特性 -血平板v血平板上菌落为灰白色，半透明或不透明，表面光滑，有乳光，直径约0.50.75 mm，为圆形突起的细小菌落，乙型溶血链球菌周围有24 mm界限分明、无色透明的溶血圈生化反应v分解葡萄糖，产酸不产气。对乳糖、甘露醇、水杨苷、山梨醇、棉子糖、蕈糖、七叶苷的分解能力因不同菌株而异v一般不分解菊糖，不被胆汁溶解v触酶阴性(与葡萄球菌相区别) 毒素及侵袭性酶 v链球菌溶血素 v致热外毒素：曾称红疹毒素或猩红热毒素 v透明质酸酶：又称扩散因子，溶解细

3、胞间质 v链激酶：又称链球菌纤维蛋白溶酶 ，能使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶，具有增强细菌在组织中的扩散作用，该酶耐热，10050分钟仍可保持活性。 v链道酶：又称链球菌DNA酶v杀白细胞素：能使白细胞失去动力 抵抗力 v该菌抵抗力一般不强，6030min即被杀死v对常用消毒剂敏感v在干燥尘埃中生存数月 v乙型链球菌很少有耐药性 微生物学检查25g(ml)样品样品+225ml无菌生理盐水无菌生理盐水葡萄糖肉浸液肉汤葡萄糖肉浸液肉汤或匹克氏肉汤或匹克氏肉汤血平板血平板血平板血平板(分纯培养分纯培养)杆菌肽敏感试验杆菌肽敏感试验链激酶试验链激酶试验观察溶血观察溶血革兰氏染色革兰氏染色报告报告3

4、6+1 24h36+1 24h36+1 24h鉴定步骤v溶血及菌落形态的观察v革兰氏染色v链激酶试验v杆菌肽敏感试验链激酶试验 -原理致病性乙型溶血性链球菌能产生链激酶(即溶纤维蛋白酶)，此酶能激活正常人体血液中的血浆蛋白酶原，使成血浆蛋白酶，而后溶解纤维蛋白 链激酶试验 -方法 吸取草酸钾血浆0.2mL，加0.8mL灭菌生理盐水，混匀，加入链球菌18-24h36肉浸液肉汤培养物0.5mL及0.25%氯化钙0.25mL ，混匀，置于36水浴10min,血浆混合物自行凝固，观察凝块重新完全溶解的时间，完全溶解为阳性，如24h后不溶解即为阴性。同时用肉浸液肉汤做阴性对照，用已知的链激酶阳性的菌株做阳性对照。 杆菌肽敏感试验 v取乙型溶血性菌落的浓菌液涂布于血平板上，用灭菌镊子夹取每片含有0.04单位的杆菌肽纸片置于上述平板上，3