DNA复制过程中三种酶的作用及比较(共12张幻灯片)

1、 解旋酶解旋酶 DNADNA聚合酶聚合酶 DNADNA连接酶连接酶解旋酶解旋酶解开母链双螺旋解开母链双螺旋单链单链DNA结合蛋白结合蛋白稳定母链稳定母链DNADNA聚合酶聚合酶指导指导前导链由前导链由5至至3方向方向连续合成连续合成DNA聚合酶聚合酶滞后链的合成是不连续的，滞后链的合成是不连续的，引物酶引物酶合成合成RNA引物，引物，DNA聚合酶在引物后边合成聚合酶在引物后边合成DNA片段，即冈崎片段片段，即冈崎片段RNA引物引物冈崎片段冈崎片段复制方向复制方向RNA引物被移除，引物被移除，DNA连接酶连接酶连接冈崎片段连接冈崎片段DNA复制过程复制过程53 A T C G A A T C G

2、 G T T T A C C T T A G C C A A 解旋酶解旋酶 1、解旋酶 作用实质：作用实质：DNA复制过程中，断开复制过程中，断开氢键氢键，使双，使双螺旋解旋为单链。螺旋解旋为单链。 A T C G A A T C G G T T U A C C T T A G C C A A DNA聚合酶聚合酶母链母链DNA子链子链DNA引物引物3355 2、DNA聚合酶聚合酶 DNA聚合酶的作用特点（1）需要模板：以）需要模板：以DNA母链为模板，母链为模板，按照按照碱基互碱基互补配对原则补配对原则合成子链；合成子链；（2）需要引物：只能）需要引物：只能连接到已连接到已有的核酸片段上；有的

3、核酸片段上；（3）连接方式：形成）连接方式：形成磷酸二酯键磷酸二酯键； （4）作用方向：子链只能从）作用方向：子链只能从5 3方向合成。方向合成。 冈崎片段冈崎片段冈崎片段冈崎片段冈崎片段冈崎片段滞后链的合成滞后链的合成子链子链母链母链3355磷酸二酯键磷酸二酯键DNA链解旋方向链解旋方向 3、DNA连接酶连接酶 3、DNA连接酶连接酶 T4DNA连接酶DNA连接酶的作用特点（1）用途：）用途： a、 DNA复制中连接冈崎片段；复制中连接冈崎片段； b、在基因工程中连接目的基因和载体；、在基因工程中连接目的基因和载体；（2）不需要识别连接的）不需要识别连接的DNA序列；也不需序列；也不需要模板

4、；要模板；（3）作用实质：形成）作用实质：形成磷酸二酯键磷酸二酯键连接连接DNA片段；片段； 3种酶的作用比较种酶的作用比较DNA聚合酶聚合酶DNA连接酶连接酶作用作用作用作用部位部位作用作用特点特点(条件条件)常用常用类型类型拼接拼接DNA片段，形成重片段，形成重组组DNA两脱氧核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键两脱氧核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键(1)将将DNA双链上的双链上的两个缺口两个缺口同时连接同时连接起来，起来，不需要模板不需要模板(2)在在两个两个DNA片段之间片段之间形成形成磷酸二酯键磷酸二酯键EcoliDNA连接酶连接酶T4DNA连接酶连接酶以母链以母链DNA为模板合成子代为模板合成子代DNA(1) 只能将只能将单个核苷酸单个核苷酸连接到已连接到已有的核酸片段上，形成磷酸二有的核酸片段上，形成磷酸二酯键酯键(2)需要引物需要引物