动物实验技术操作训练课件

1、第四次实验第四次实验动物实验的基本操作训练动物实验的基本操作训练Basic Operation in Animal Experiment 动物实验技术操作训练1 实验目的实验目的 1.1.学习捉拿家兔的正确方法和固定。学习捉拿家兔的正确方法和固定。2.2.掌握常用手术器械的正确使用方法。掌握常用手术器械的正确使用方法。3.3.学习动物实验的基本操作技术，包括麻学习动物实验的基本操作技术，包括麻醉、切口与止血、气管插管术、神经分离术、醉、切口与止血、气管插管术、神经分离术、颈动脉插管术、输尿管插管术、膀胱插管术。颈动脉插管术、输尿管插管术、膀胱插管术。动物实验技术操作训练2健康家兔健康家兔, ,

2、雌雄不拘雌雄不拘, ,体重体重2.02.02.5Kg2.5Kg 实验对象实验对象 动物实验技术操作训练3 实验内容实验内容 1.1.家兔的捉拿、麻醉与固定家兔的捉拿、麻醉与固定2.2.颈总动脉、神经分离术颈总动脉、神经分离术3.3.气管插管气管插管4.4.动脉插管动脉插管5.5.膀胱插管膀胱插管6.6.输尿管插管输尿管插管动物实验技术操作训练41.1.器材：器材： 兔手术台、哺乳类手术器械一套、三通、兔手术台、哺乳类手术器械一套、三通、动脉夹、动脉插管、气管插管、输尿管插管、动脉夹、动脉插管、气管插管、输尿管插管、膀胱插管、纱布、棉线、注射器、绑腿带、污膀胱插管、纱布、棉线、注射器、绑腿带、污

3、物杯。物杯。2.2.药品：药品： 25%25%氨基甲酸乙酯溶液氨基甲酸乙酯溶液( (乌拉坦乌拉坦) ) 实验器材和药品实验器材和药品 动物实验技术操作训练5 实验方法实验方法 一、家兔的一、家兔的捉拿捉拿与称重与称重 右手抓住家兔颈背部皮肤，右手抓住家兔颈背部皮肤，轻轻将家兔提起，迅速以左轻轻将家兔提起，迅速以左手托住其臀部，使家兔体重手托住其臀部，使家兔体重主要落左掌心上，以免损伤主要落左掌心上，以免损伤动物颈部。动物颈部。注意点：注意点： 家兔一般不咬人，但脚家兔一般不咬人，但脚爪锐利，在挣扎易抓伤捕捉爪锐利，在挣扎易抓伤捕捉者，所以捕捉时要特别注意者，所以捕捉时要特别注意其四肢。其四肢。

4、1.1.家兔的捉拿家兔的捉拿动物实验技术操作训练6图图2 2 错误捉拿法错误捉拿法可损伤两肾可损伤两肾 可造成皮下出血可造成皮下出血 可损伤两耳可损伤两耳 动物实验技术操作训练7 将家兔放在婴儿秤上，待家兔安静的时候将家兔放在婴儿秤上，待家兔安静的时候观察体重并记录。观察体重并记录。2.2.家兔的称重家兔的称重注意点：注意点： (1)(1)调零调零 (2)(2)切勿使劲按压称面切勿使劲按压称面动物实验技术操作训练8二、家兔的麻醉二、家兔的麻醉1. 1. 药品药品:25%:25%氨基甲酸乙酯氨基甲酸乙酯( (又名又名: :乌拉坦乌拉坦) )2. 2. 参考剂量参考剂量:1g:1gkg kg ，相

5、当于，相当于4ml4mlkg kg 3. 3. 给药途径给药途径: :耳缘静脉耳缘静脉图图3 3 家兔耳缘静脉家兔耳缘静脉( (红色箭头红色箭头) )动物实验技术操作训练94.4.家兔耳缘静脉注射方法家兔耳缘静脉注射方法(1)(1)助手按下图的方式将家兔固定助手按下图的方式将家兔固定图图4 4 家兔耳缘静脉麻醉前固定家兔耳缘静脉麻醉前固定 助手的一侧上肢弯助手的一侧上肢弯曲与同侧的躯干夹住家曲与同侧的躯干夹住家兔的后半部位，同时该兔的后半部位，同时该侧的手托住家兔的腹部，侧的手托住家兔的腹部，另一只向上抓住家兔的另一只向上抓住家兔的颈背部颈背部。动物实验技术操作训练10(2)(2)注射方法注射

6、方法( (视频视频) )图图5 5 家兔耳缘静脉注射方法家兔耳缘静脉注射方法静脉穿刺意外静脉穿刺意外( (视频视频) )动物实验技术操作训练11(3)(3)耳缘静脉注射要点：耳缘静脉注射要点： 充分暴露耳背外缘耳缘静脉。充分暴露耳背外缘耳缘静脉。 左食指、中指轻夹耳根部使静脉充盈。左食指、中指轻夹耳根部使静脉充盈。 注射点的选择。注射点的选择。 从远心端以从远心端以3030角度进针刺入静脉后顺血管平行方向角度进针刺入静脉后顺血管平行方向深入深入1cm1cm。 左手拇指、食指在刺入部位将针头与兔耳固定。左手拇指、食指在刺入部位将针头与兔耳固定。 注意注入速度和密切观察家兔的反应。注意注入速度和密

7、切观察家兔的反应。 注射完后注意止血。注射完后注意止血。动物实验技术操作训练12(4)(4)麻醉效果麻醉效果动物呼吸平稳深慢动物呼吸平稳深慢角膜反射迟钝或消失角膜反射迟钝或消失肢体肌肉松弛肢体肌肉松弛皮肤夹捏反射消失皮肤夹捏反射消失动物实验技术操作训练13 (5) (5) 麻醉意外麻醉意外 麻醉过量麻醉过量 实验动物会出现两种情况，一是呼吸、心实验动物会出现两种情况，一是呼吸、心搏骤停或间断等情况：二是动物全身皮肤色表紫，呼吸运动搏骤停或间断等情况：二是动物全身皮肤色表紫，呼吸运动浅而慢。要密切观察动物生命体征的变化，做好实施各项抢浅而慢。要密切观察动物生命体征的变化，做好实施各项抢救工作的准

8、备。救工作的准备。 麻醉过浅麻醉过浅 动物可能出现挣扎、尖叫等表现，需要及动物可能出现挣扎、尖叫等表现，需要及时地追加麻醉药物，但一次追加不宜超过总量时地追加麻醉药物，但一次追加不宜超过总量1 13 3，并密切，并密切观察动物是否已达到麻醉的基本状态。观察动物是否已达到麻醉的基本状态。动物实验技术操作训练141.1.仰卧固定仰卧固定图图6 6 家兔仰卧固定法家兔仰卧固定法 头部用一根粗棉线拉住头部用一根粗棉线拉住兔的两只门齿后栓在兔板的兔的两只门齿后栓在兔板的铁柱或固定于钩上。两前肢铁柱或固定于钩上。两前肢平直放在胸腰部两侧平直放在胸腰部两侧, ,用粗棉用粗棉绳的一端缚扎腕关节以上部绳的一端缚

9、扎腕关节以上部位位, ,缚绳从背后左右交叉穿过缚绳从背后左右交叉穿过, ,压在对侧前肢的前臂上压在对侧前肢的前臂上, ,再紧再紧扎于兔板两侧的木钩上扎于兔板两侧的木钩上, ,两后两后肢左右分开肢左右分开, , 缚绳扎踝关节缚绳扎踝关节以上部位以上部位, ,另一端分别固定于另一端分别固定于兔板后两侧的木钩上兔板后两侧的木钩上, , 三、固定方法三、固定方法动物实验技术操作训练15(1)(1)活结的打法；活结的打法； (2)(2)颈部必须放正拉直，且不要超过铁杆；颈部必须放正拉直，且不要超过铁杆；(3)(3)缚绳要紧扎于兔板两侧的木钩上，防止家缚绳要紧扎于兔板两侧的木钩上，防止家兔挣扎时挣脱缚绳；

10、兔挣扎时挣脱缚绳；(4)(4)拉出舌头，拉出舌头，以免阻塞呼吸道以免阻塞呼吸道。2.2.注意事项注意事项动物实验技术操作训练16四、止血四、止血 1.1.压迫止血法压迫止血法 用温热盐水纱布或棉球压迫止血。用温热盐水纱布或棉球压迫止血。 2.2.钳夹止血法钳夹止血法 对准出血点迅速、准确钳对准出血点迅速、准确钳夹夹，一般，一般细小血管用此法。细小血管用此法。 3.3.结扎止结扎止血法血法 较大的血管出血，用血管钳夹住出较大的血管出血，用血管钳夹住出血点，结扎止血血点，结扎止血。动物实验技术操作训练17五、颈部手术五、颈部手术1.1.气管插管术气管插管术( (视频视频) ) 用手术刀时，先用手或

11、器械使两侧组织牵拉紧张用手术刀时，先用手或器械使两侧组织牵拉紧张情况下，以刀刃作垂直的轻巧的切开，不要作刮削的情况下，以刀刃作垂直的轻巧的切开，不要作刮削的动作。动作。图图7 7 切皮运刀方法切皮运刀方法动物实验技术操作训练18图图8 8 气管插管示意图气管插管示意图甲状软骨甲状软骨倒倒“T”T”形切口形切口 “Y”“Y”形气管插管形气管插管结扎线结扎线结扎线头结扎线头动物实验技术操作训练19(2)(2)气管插管术操作要点：气管插管术操作要点： 颈部正中切开皮肤，钝性分离暴露气管、穿线备用。颈部正中切开皮肤，钝性分离暴露气管、穿线备用。 于气管中段第三或第四软骨环上向头端作一纵向倒于气管中段第

12、三或第四软骨环上向头端作一纵向倒“T”T”形切口。形切口。 将气管导管由切口向胸部方向插入气管腔内。将气管导管由切口向胸部方向插入气管腔内。 在气管软骨环之间进行结扎，并将棉线固定于插管分在气管软骨环之间进行结扎，并将棉线固定于插管分叉处。叉处。动物实验技术操作训练20(3)(3)注意事项注意事项 颈部皮肤切口，皮下组织和颈前肌肉群的分离均在一颈部皮肤切口，皮下组织和颈前肌肉群的分离均在一定要沿正中线进行。定要沿正中线进行。 分离肌肉时，要顺着肌肉的走向钝性分离，而且动作分离肌肉时，要顺着肌肉的走向钝性分离，而且动作须轻柔，止血钳插入不宜过深，以防损伤深层的食管和血须轻柔，止血钳插入不宜过深，

13、以防损伤深层的食管和血管。管。 插管之前先用蘸有生理盐水的棉球，挤尽水分后进行插管之前先用蘸有生理盐水的棉球，挤尽水分后进行清理气管内的血液和分泌物，以保证气道通畅。清理气管内的血液和分泌物，以保证气道通畅。 插管时动作轻柔，若见插管内有血，应取出插管擦净插管时动作轻柔，若见插管内有血，应取出插管擦净血液，再进行插管。血液，再进行插管。动物实验技术操作训练212.2.颈部神经分离术颈部神经分离术( (视频视频) )（最粗、明亮）（最粗、明亮）（较细）（较细）（最细、常与（最细、常与交感神经贴在交感神经贴在一起）一起）图图7 7 血管神经鞘示意图血管神经鞘示意图迷走神经迷走神经减压神经减压神经交

14、感神经交感神经颈总动脉颈总动脉动物实验技术操作训练22(2)(2)神经分离术操作要点：神经分离术操作要点： 暴露神经的手法。暴露神经的手法。 仔细辨认神经，用玻璃分针轻轻分离神经。仔细辨认神经，用玻璃分针轻轻分离神经。 分离神经的先后顺序分离神经的先后顺序。动物实验技术操作训练233.3.颈总动脉插管术颈总动脉插管术( (视频视频) ) (1)(1)颈总动脉插管术操作要点：颈总动脉插管术操作要点： 于气管一侧小心分离颈总动脉约于气管一侧小心分离颈总动脉约3cm3cm穿两线备用。穿两线备用。 远心端结扎、近心端用动脉夹夹紧。远心端结扎、近心端用动脉夹夹紧。 用眼科剪与血管呈用眼科剪与血管呈454

15、5的角度从远心端开始在向心的角度从远心端开始在向心一侧剪开管壁的一侧剪开管壁的1/31/3。 插管前导管和压力换能器的肝素化插管前导管和压力换能器的肝素化。 插管后结扎固定。插管后结扎固定。动物实验技术操作训练24(2)(2)注意事项注意事项 分离动脉时不要损伤动脉的小分支，以免造成出血。分离动脉时不要损伤动脉的小分支，以免造成出血。 颈总动脉剪口不宜过大或过小，过大易于使颈总动颈总动脉剪口不宜过大或过小，过大易于使颈总动脉插断，过小导管不易插入。脉插断，过小导管不易插入。 动脉导管的插入端要光滑，不能过尖，以防刺破动动脉导管的插入端要光滑，不能过尖，以防刺破动脉壁，引起大出血。脉壁，引起大出

16、血。 未扎紧动脉插管前不要松动动脉夹。未扎紧动脉插管前不要松动动脉夹。 动物实验技术操作训练25六、腹部手术六、腹部手术1.1.膀胱插管术膀胱插管术( (视频视频) ) (1)(1)膀胱插管操作要点：膀胱插管操作要点： 在耻骨联合上方备皮，做一在耻骨联合上方备皮，做一3 35cm5cm的切口，沿腹白线的切口，沿腹白线打开腹腔，暴露膀胱，将膀胱向下方翻开，可见白色输尿打开腹腔，暴露膀胱，将膀胱向下方翻开，可见白色输尿管。管。 结扎尿道口。结扎尿道口。 膀胱底部剪一小口，插入导管，与切口处的膀胱壁膀胱底部剪一小口，插入导管，与切口处的膀胱壁结扎固定。结扎固定。动物实验技术操作训练26(2)(2)注

17、意事项注意事项 因腹壁与腹腔内脏紧贴，作腹壁切口时一定因腹壁与腹腔内脏紧贴，作腹壁切口时一定提起腹壁，以免伤及腹腔内脏。提起腹壁，以免伤及腹腔内脏。 动作轻柔，以免引起损伤性尿闭。动作轻柔，以免引起损伤性尿闭。 注意膀胱插管不要插入过深。注意膀胱插管不要插入过深。动物实验技术操作训练272.2.输尿管插管术输尿管插管术( (视频视频) ) (1)(1)输尿管插管操作要点：输尿管插管操作要点： 在耻骨联合上方备皮，做一在耻骨联合上方备皮，做一3 35cm5cm的切口，沿腹白线的切口，沿腹白线打开腹腔，暴露膀胱，将膀胱向下方翻开，可见白色输尿打开腹腔，暴露膀胱，将膀胱向下方翻开，可见白色输尿管。管

18、。 游离输尿管，下方穿游离输尿管，下方穿2 2根线，在入膀胱处用一细线结根线，在入膀胱处用一细线结扎输尿管，另一细线打松结备用。扎输尿管，另一细线打松结备用。 待输尿管充盈后，在结扎处前方的管壁上剪一楔形待输尿管充盈后，在结扎处前方的管壁上剪一楔形小口（小于管径小口（小于管径1/21/2），从此孔向肾脏方向插管，固定。），从此孔向肾脏方向插管，固定。 动物实验技术操作训练28(2)(2)输尿管插管应注意：输尿管插管应注意： 因腹壁与腹腔内脏紧贴，作腹壁切口时一定提起腹壁，因腹壁与腹腔内脏紧贴，作腹壁切口时一定提起腹壁，以免伤及腹腔内脏。以免伤及腹腔内脏。 分离输尿管时，注意分清输精管，输精管为围绕输尿分离输尿管时