第5章环境因子对微生物生长和代谢的影响

1、 第五章第五章 环境因子对环境因子对微生物生长和代谢的影响微生物生长和代谢的影响环境因子对微生物的影响环境因子对微生物的影响 适宜环境适宜环境： 微生物能正常地进行生命活动微生物能正常地进行生命活动 不适宜环境不适宜环境： 微生物的正常生命活动受到抑制或微生物的正常生命活动受到抑制或被迫暂时改变原有的一些特征。被迫暂时改变原有的一些特征。 恶劣环境恶劣环境： 微生物死亡或发生遗传变易微生物死亡或发生遗传变易。第一节第一节 环境因子对微生物生长和生存的影响环境因子对微生物生长和生存的影响一一.理化因素对生长的影响理化因素对生长的影响（一）温度（一）温度 1、温度对微生物的影响、温度对微生物的影响

2、 温度通过影响膜的液晶结构、酶和蛋白温度通过影响膜的液晶结构、酶和蛋白质的合成及活性、质的合成及活性、RNA的结构、转录等的结构、转录等 影响影响微生物的生命活动。微生物的生命活动。2、微生物的生长温度范围、微生物的生长温度范围 最低生长温度最低生长温度 最高生长温度最高生长温度 最适生长温度最适生长温度 致死温度致死温度ACBv T 3、微生物的生长温度类型、微生物的生长温度类型 按照最适生长温度范按照最适生长温度范围的不同分类围的不同分类 嗜冷微生物嗜冷微生物 嗜温微生物嗜温微生物 嗜热微生物嗜热微生物 微生物生长的温度类型微生物生长的温度类型最低最低最适最适最高最高分布的主要场所分布的主

3、要场所专性专性-125-1515-20两极地区两极地区低低温温型型兼性兼性-5-010-2025-30 海水，冷藏食品上海水，冷藏食品上 室温室温10-2020-3540-45 腐腐 生生 菌菌中中温温型型体温体温10-2035-4040-45 寄寄 生生 菌菌高高 温温 型型25-4550-6070-95温泉温泉 堆肥等堆肥等微生物类型微生物类型不同温度下的菌例不同温度下的菌例1、嗜冷微生物、嗜冷微生物（psychrophilespsychrophiles） 能在能在5以下生长的微生物称为嗜冷微生物。以下生长的微生物称为嗜冷微生物。 种类种类 专性：最适温度专性：最适温度15，最高温度，最高

4、温度20 兼性：最适温度兼性：最适温度2530，最高温度，最高温度35左右左右 耐冷微生物耐冷微生物 psychrotolerant 嗜冷微生物在低温下生长的原因嗜冷微生物在低温下生长的原因 细胞膜含有大量的不饱和脂肪酸，使膜在低温细胞膜含有大量的不饱和脂肪酸，使膜在低温下也能保持半流动状态；下也能保持半流动状态； 细胞的酶在低温下能有效地起催化作用，而在细胞的酶在低温下能有效地起催化作用，而在3040的情况下，这些酶很快失活。的情况下，这些酶很快失活。 2 2、嗜温微生物、嗜温微生物 mesophiles 最适生长温度在最适生长温度在2537微生物叫嗜温微生物。微生物叫嗜温微生物。 种类：种

5、类： 寄生型（体温型）：最适寄生型（体温型）：最适3540 腐生型（室温型）：最适腐生型（室温型）：最适2535。3 3、嗜热微生物、嗜热微生物 thermophiles 嗜热微生物嗜热微生物：最适生长温度：最适生长温度5060 嗜高温微生物嗜高温微生物：最适生长温度在：最适生长温度在80以上以上 嗜热微生物在高温下生长的原因嗜热微生物在高温下生长的原因 酶和其他蛋白质中的更具有耐热性；酶和其他蛋白质中的更具有耐热性； 核酸中含有较多的核酸中含有较多的GC对，对热更加稳定；对，对热更加稳定； 细胞膜中饱和脂肪酸含量高，使膜具有热稳定性；细胞膜中饱和脂肪酸含量高，使膜具有热稳定性； 细胞生长速率

6、快，能迅速合成生物大分子，以弥细胞生长速率快，能迅速合成生物大分子，以弥补由于高温造成的破坏补由于高温造成的破坏。嗜高温微生物嗜高温微生物 hyperthermophiles 已发现的嗜高温微生物全都是已发现的嗜高温微生物全都是古生细菌古生细菌，它们，它们所处的环境与普通细菌有很大区别。所处的环境与普通细菌有很大区别。 在高温下生长的原因：在高温下生长的原因： 一般认为它们蛋白质热稳定性与蛋白质上存在一般认为它们蛋白质热稳定性与蛋白质上存在的盐桥数目增加（氨基酸带上的盐桥数目增加（氨基酸带上Na+或其它阳离子生或其它阳离子生成电荷桥）及蛋白质高度密集的疏水内部区域有关；成电荷桥）及蛋白质高度密

7、集的疏水内部区域有关； 它们细胞膜中不含脂肪酸，而是由植烷（不同它们细胞膜中不含脂肪酸，而是由植烷（不同长度碳氢组成的五碳重复单位化合物）组成，这和长度碳氢组成的五碳重复单位化合物）组成，这和膜的热稳定性有关。膜的热稳定性有关。 4、最适发酵温度、最适发酵温度发酵速率和代谢产物积累速率最大时的温度发酵速率和代谢产物积累速率最大时的温度。5、极端温度对微生物的影响、极端温度对微生物的影响 极端温度极端温度 extreme temperature 低于最低生长温度和高于最高生长温低于最低生长温度和高于最高生长温度范围的温度。度范围的温度。 低温：低温： 0以上停止生长以上停止生长 冷冻：造成微生物

8、细胞脱水及冰晶的冷冻：造成微生物细胞脱水及冰晶的机械损伤而引起微生物死亡。机械损伤而引起微生物死亡。 高温：菌体蛋白变性，杀死细胞高温：菌体蛋白变性，杀死细胞 应用：应用：6、微生物对热的忍受、微生物对热的忍受微生物 温度 时间(分)营养细胞：细 菌 55-60 30 酵 母 50-60 10孢 子 ： 70-80 10细菌芽孢： 枯草芽孢杆菌 100 60 嗜热脂肪芽孢杆菌 121 12 肉毒梭菌 100 360（二）水活度（二）水活度 water activity 定义定义 在相同的温度和压力下，体系中溶液的在相同的温度和压力下，体系中溶液的水蒸汽压与纯水的蒸汽压之比：水蒸汽压与纯水的蒸汽

9、压之比： aw=p/p0 水活度的决定因素：水活度的决定因素：固体基质：水被吸附的牢固程度固体基质：水被吸附的牢固程度液体：溶质的含量和溶质的水合程度液体：溶质的含量和溶质的水合程度一些溶质不同浓度的水活度一些溶质不同浓度的水活度不同微生物生长的最低不同微生物生长的最低a aw w1、基质水活度对微生物的影响、基质水活度对微生物的影响 高水活度环境高水活度环境 低水活度环境低水活度环境2、干燥对微生物的影响、干燥对微生物的影响 干燥使代谢停止，使微生物处于休眠干燥使代谢停止，使微生物处于休眠 状态，严重时细胞脱水，蛋白质变性，进状态，严重时细胞脱水，蛋白质变性，进 而导致死亡。而导致死亡。 应

10、用：应用： 保存物品，保藏菌种保存物品，保藏菌种水对一些贮藏霉菌的影响水对一些贮藏霉菌的影响3、渗透压对微生物的影响、渗透压对微生物的影响 等渗溶液：等渗溶液： 微生物正常生长微生物正常生长 低渗溶液：低渗溶液： 细胞吸水膨胀，甚至胀破。细胞吸水膨胀，甚至胀破。 高渗溶液：高渗溶液： 细胞脱水，影响代谢活动，引起质壁细胞脱水，影响代谢活动，引起质壁分离，甚至死亡。分离，甚至死亡。耐高渗与嗜高渗微生物耐高渗与嗜高渗微生物生长速度水活度1、正常微生物2、耐高渗微生物3、嗜高渗微生物（三）表面张力（三）表面张力1、表面张力：液体表面相邻两个部分间、表面张力：液体表面相邻两个部分间单位长度内的相互牵引

11、力。单位长度内的相互牵引力。 单位：单位：1N/m=1000dyn/cm 水在常温下的表面张力为水在常温下的表面张力为72 dyn/cm。 一般液体培养基的表面张力为一般液体培养基的表面张力为4565dyn/cm 2、表面张力对微生物的影响、表面张力对微生物的影响 低表面张力低表面张力, 微生物在液体中均匀生长。微生物在液体中均匀生长。 高表面张力高表面张力, 微生物在液体表面形成菌膜。微生物在液体表面形成菌膜。3、改变表面张力的方法、改变表面张力的方法 升高表面张力：添加无机盐升高表面张力：添加无机盐 降低表面张力：添加表面活性剂降低表面张力：添加表面活性剂（四）辐射（四）辐射 辐射是能量通

12、过空间传播或传递的一种辐射是能量通过空间传播或传递的一种物理现象。物理现象。 辐射的种类：电磁辐射和微粒辐射辐射的种类：电磁辐射和微粒辐射 电磁辐射的种类电磁辐射的种类 非电离辐射：非电离辐射：红外线、可见光、紫外红外线、可见光、紫外线等线等 电离辐射：电离辐射：x-射线、射线、-射线等。射线等。辐射光辐射光 可见光可见光 波长波长400-800nm的电磁辐射。的电磁辐射。 光能型微生物的能源光能型微生物的能源 长时间照射有杀菌作用长时间照射有杀菌作用红外线红外线 波长大于波长大于800nm的电磁辐射。的电磁辐射。 红外线可以发热，产生的高温具有杀菌作用。红外线可以发热，产生的高温具有杀菌作用

13、。紫外线紫外线 UV 波长为波长为150390nm的电磁辐射。的电磁辐射。 最佳作用波长为最佳作用波长为265266nm。1.作用机理作用机理诱发诱发DNA形成形成T=T、阻碍、阻碍DNA复制而使微生物发生复制而使微生物发生变易或死亡。变易或死亡。 使空气中的使空气中的O2变为变为O3，后者分解放出的，后者分解放出的O具有杀具有杀菌作用。菌作用。 应用：消毒和诱变应用：消毒和诱变紫外线照射后形成T-T二聚体2. 细胞对紫外损伤的修复作用细胞对紫外损伤的修复作用光复活作用光复活作用 细胞中的光复活细胞中的光复活酶吸收可见光的能酶吸收可见光的能量而被激活后，将量而被激活后，将T=T中的共价键解中的

14、共价键解开，使开，使DNA分子恢分子恢复正常状态。复正常状态。光复活过程暗修复作用暗修复作用 细胞中的一些细胞中的一些修复酶在无光的情修复酶在无光的情况下，也能进行有况下，也能进行有效的效的DNA修复作用。修复作用。 作用的酶：作用的酶：DNA内内切酶、切酶、DNA外切酶、外切酶、DNA聚合酶和聚合酶和DNA连接酶。连接酶。电离辐射电离辐射 x射线射线 1-10nm， 射线射线0.1-1nm 作用机理：作用机理： 引起环境中或细胞中引起环境中或细胞中水的电离而产水的电离而产 生的生的自由自由基基作用于细胞中的敏感作用于细胞中的敏感大分子，使之电离而失大分子，使之电离而失活。活。H2O H2O+

15、 +e- OH +H+H2O+ e- H2O- H +OH+ 作用于氧气分子，产生的作用于氧气分子，产生的强氧化性基强氧化性基 团团，氧化细胞中的蛋白质和酶分子的，氧化细胞中的蛋白质和酶分子的巯基，巯基， 而使细胞受到损伤或死亡。而使细胞受到损伤或死亡。O2 + eO2-O2 + 2eO2=（五）（五）pH pH= -lgH+一些溶液一些溶液 的的pH值值1、环境、环境pH对微生物的作用对微生物的作用 改变细胞膜所带电荷状态，从而影响细改变细胞膜所带电荷状态，从而影响细胞对营养物质的吸收；胞对营养物质的吸收； 影响代谢过程中酶的活性；影响代谢过程中酶的活性； 改变环境中营养物质的可给性；改变环

16、境中营养物质的可给性； 改变环境中有害物质的毒性。改变环境中有害物质的毒性。 2、 微生物的生长微生物的生长pH范围范围不同微生物的生长不同微生物的生长pH范围范围 微生物名称微生物名称最低最低最适最适最高最高氧化硫硫杆菌氧化硫硫杆菌0.52.03.56.0大豆根瘤菌大豆根瘤菌4.26.87.011.0枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌4.56.07.58.5大肠埃希氏菌大肠埃希氏菌4.36.08.09.5金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌4.27.07.59.3一般放线菌一般放线菌5.07.08.010.0一般酵母菌一般酵母菌2.54.05.88.0一般霉菌一般霉菌1.53.86.07.011.03、微生物

17、的类型（、微生物的类型（按最适生长按最适生长pH范围来分）范围来分） 嗜酸微生物嗜酸微生物 acidophile 专性嗜酸菌：专性嗜酸菌： 最适最适pH6；pH7时生长极差或死亡。时生长极差或死亡。 兼性嗜酸菌：在低兼性嗜酸菌：在低pH下生长，在中性下生长，在中性pH也长。也长。 嗜碱微生物嗜碱微生物 alkalinophile： 专性嗜碱菌：最适专性嗜碱菌：最适pH811，pH 7时生长极慢或不生长时生长极慢或不生长 嗜中性微生物嗜中性微生物 neutrophile： 能在能在pH49范围内生长，最适生长在范围内生长，最适生长在pH68，大多数微，大多数微生物属于这一类。生物属于这一类。4、

18、微生物的代谢对环境、微生物的代谢对环境pH影响影响5、环境、环境pH的控制的控制直接加酸或碱进行调节；直接加酸或碱进行调节； 加入酸性或碱性营养物质进行调节和补充营养加入酸性或碱性营养物质进行调节和补充营养 加入缓冲性物质加入缓冲性物质6、微生物细胞内的、微生物细胞内的pH 细胞内部的细胞内部的pH值一般都接近中性值一般都接近中性胞内酶的最适胞内酶的最适pH多接近中性多接近中性细胞内的细胞内的DNA、ATP等对低等对低pH敏感敏感RNA和磷脂类等对高和磷脂类等对高pH敏感。敏感。 细胞膜上酶及胞外酶最适细胞膜上酶及胞外酶最适pH多接近微生多接近微生物最适生长物最适生长pH 7 7、微生物最适生

19、长和最适发酵、微生物最适生长和最适发酵pHpH(六六) 氧化还原电位氧化还原电位 Eh Eh 值的测定方法值的测定方法：用一个铂电极与一个标：用一个铂电极与一个标准电极同时插入体系中，从敏感的伏特计上准电极同时插入体系中，从敏感的伏特计上读出电位差值。读出电位差值。1、影响、影响 Eh的主要因素的主要因素： 氧分压、环境的氧分压、环境的pH值值2、标准氧化还原电位、标准氧化还原电位 Eh： pH=7时测得的时测得的Eh值值 Eh值的变化范围：值的变化范围：+0.82v -0.42v3、Eh的改变方法的改变方法 降低降低Eh 除氧及向培养基中添加还原性物质：除氧及向培养基中添加还原性物质：H2S

20、、抗坏血酸、含巯基化合物（半胱氨酸、抗坏血酸、含巯基化合物（半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫苏糖醇等）谷胱甘肽、二硫苏糖醇等） 升高升高Eh 通空气或氧及向培养基中添加氧化性物通空气或氧及向培养基中添加氧化性物质：质：Fe(OH)3等等 4、微生物与氧的关系、微生物与氧的关系好氧微生物好氧微生物aerobes 专性好氧菌专性好氧菌 兼性厌氧菌兼性厌氧菌 微好氧菌微好氧菌 厌氧微生物厌氧微生物 anaerobes 耐氧厌氧菌耐氧厌氧菌 专性厌氧菌专性厌氧菌（1）专性好氧菌）专性好氧菌 strict aerobes 必须在高浓度分子氧必须在高浓度分子氧(0.2巴）的条件下才能巴）的条件下才能生长的微生物生

21、长的微生物 Eh+0.1v 可生长，最适在可生长，最适在+0.3+0.4v 霉菌、大部分放线菌及部分细菌霉菌、大部分放线菌及部分细菌 有完整的呼吸链，分子氧作为最终电子受体，有完整的呼吸链，分子氧作为最终电子受体，氧参与合成固醇及不饱和脂肪酸；氧参与合成固醇及不饱和脂肪酸； 细胞含有超氧化物歧化酶和过氧化氢酶细胞含有超氧化物歧化酶和过氧化氢酶超氧化物歧化酶超氧化物歧化酶: superoxide dismutase SOD过氧化氢酶过氧化氢酶: catalase(2) 兼性厌氧菌：兼性厌氧菌：facultative anaerobes 以在有氧的条件下生长为主，也可兼在厌氧以在有氧的条件下生长为

22、主，也可兼在厌氧条件下生长的微生物条件下生长的微生物 Eh+0.1v 通过好氧呼吸获取能量通过好氧呼吸获取能量 Eh+0.1v 通过发酵或无氧呼吸获取能量通过发酵或无氧呼吸获取能量 酵母和部分细菌酵母和部分细菌 细胞含有细胞含有SOD和过氧化氢酶和过氧化氢酶 （3）微好）微好(嗜嗜)氧菌氧菌microaerophilic bacteria 只能在较低的氧分压（只能在较低的氧分压（0.010.03巴）下才巴）下才能正常生长；也通过有氧呼吸获取能量。能正常生长；也通过有氧呼吸获取能量。 如：霍乱弧菌、氢单胞菌属等如：霍乱弧菌、氢单胞菌属等（4）耐氧厌氧菌：）耐氧厌氧菌： aerotolerant

23、anaerobe 可在分子氧存在条件下进行厌氧生活的厌氧菌。可在分子氧存在条件下进行厌氧生活的厌氧菌。 生长不需要氧，但分子氧对他们也无害生长不需要氧，但分子氧对他们也无害 仅依靠发酵或底物水平磷酸化获得能量仅依靠发酵或底物水平磷酸化获得能量 细胞内有细胞内有SOD和过氧化物酶，但无过氧化氢酶。和过氧化物酶，但无过氧化氢酶。 如：乳链球菌、乳酸乳杆菌、膜明串珠菌如：乳链球菌、乳酸乳杆菌、膜明串珠菌（5）厌氧菌：）厌氧菌：anaerobe 只能在无氧或低只能在无氧或低Eh(Eh+0.1V)值时值时, 才能生长。才能生长。 分子氧对细胞有毒分子氧对细胞有毒 通过发酵或无氧呼吸等获取能量通过发酵或无

24、氧呼吸等获取能量 细胞内缺乏细胞内缺乏SOD、细胞色素氧化酶、大多数还、细胞色素氧化酶、大多数还缺乏过氧化氢酶缺乏过氧化氢酶 梭状芽孢杆菌属、双歧杆菌属、梭状芽孢杆菌属、双歧杆菌属、 产甲烷菌产甲烷菌 微生物与氧的关系微生物与氧的关系 类型最适生长的O2体积分数代谢类型好 氧专性好氧菌等于或大于20%有氧呼吸兼性厌氧菌有氧或无氧有氧呼吸；无氧呼吸、发酵微好氧菌210%有氧呼吸厌氧耐氧厌氧菌不需要氧，但有O2存在无害发酵专性厌氧菌不需要氧，有氧时死亡发酵、无氧呼吸厌氧菌的氧毒害机制：厌氧菌的氧毒害机制：2O2 +2H+SOD(一切好氧微生一切好氧微生物及耐氧菌物及耐氧菌)H2O2 +O2H2O+

25、1/2O22H2O-过氧化氢酶过氧化氢酶(一切好氧微生物一切好氧微生物)过氧化物酶过氧化物酶(耐氧菌耐氧菌)NADH2 NAD第二节第二节 微生物营生环境条件的优化微生物营生环境条件的优化 营养物质及其浓度营养物质及其浓度 环境条件环境条件pH值值温度温度溶解氧溶解氧离子强度离子强度二氧化碳分压二氧化碳分压第三节第三节 污染微生物的控制污染微生物的控制一、灭菌与消毒一、灭菌与消毒 灭菌灭菌 sterilization 采用强烈的理化因素使物体内外部的一切采用强烈的理化因素使物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。 消毒消毒 disinfectio

26、n 采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体或动、植物有害的病原或内部一部分对人体或动、植物有害的病原菌，而对被消毒的对象基本无害的措施菌，而对被消毒的对象基本无害的措施。（一）灭菌和消毒方法（一）灭菌和消毒方法1、高温灭菌和消毒方法、高温灭菌和消毒方法（1）干热灭菌法）干热灭菌法 dry heat sterilization 灼烧灭菌法灼烧灭菌法 适用：适用：接种工具，接种工具， 污染物品，污染物品， 实验动物尸体等实验动物尸体等。干热灭菌法干热灭菌法 适用：玻璃、陶瓷器皿，适用：玻璃、陶瓷器皿，金属用具等耐高温的物金属用具等耐高温的物品。品

27、。处理：处理：150170 12小时小时电热恒温干燥箱（2）湿热灭菌法）湿热灭菌法 moist heat sterilization 同样温度和相同作用时间下，湿热灭菌比同样温度和相同作用时间下，湿热灭菌比干热灭菌效果好的原因干热灭菌效果好的原因 热蒸汽穿透力强；热蒸汽穿透力强； 细胞物质在含水量高时容易变性凝固；细胞物质在含水量高时容易变性凝固； 蒸汽凝固时释放的大量蒸汽潜热可迅速蒸汽凝固时释放的大量蒸汽潜热可迅速提高灭菌物品的温度。提高灭菌物品的温度。 A. 常压法常压法巴氏消毒法巴氏消毒法 pasteurization 是一种专用于牛奶、啤酒、果酒或酱油等不宜进是一种专用于牛奶、啤酒、果

28、酒或酱油等不宜进行高温灭菌的液态风味食品或调料的低温消毒方行高温灭菌的液态风味食品或调料的低温消毒方法。法。 低温维持法低温维持法low temperature holding method，LTH，牛奶：，牛奶：63，30分分 高温瞬时法高温瞬时法 high temperature shot time，HTST，牛奶：牛奶：72，15秒秒 巴氏消毒单位：在巴氏消毒单位：在60经历经历1分钟所引起的消毒分钟所引起的消毒效应称一个巴氏消毒单位。效应称一个巴氏消毒单位。Pu=Z1.393(t-60)煮沸消毒法煮沸消毒法：在在100下煮沸数分钟的方法，常用于下煮沸数分钟的方法，常用于饮用水的消毒饮用

29、水的消毒间歇灭菌法间歇灭菌法fractional sterilization：适用于不耐热培：适用于不耐热培养基的灭菌养基的灭菌 设备：蒸笼，高压灭菌锅设备：蒸笼，高压灭菌锅 原理：常压蒸汽（原理：常压蒸汽（100）处理杀死营养细胞，残留的芽）处理杀死营养细胞，残留的芽孢等耐热的孢子体经过夜培养即可萌发，再加热处理杀孢等耐热的孢子体经过夜培养即可萌发，再加热处理杀死之，如此反复处理三次，可达到无菌状态。死之，如此反复处理三次，可达到无菌状态。 对象：含有不耐高温的营养物质的培养基或无高压蒸汽对象：含有不耐高温的营养物质的培养基或无高压蒸汽灭菌锅时处理一般培养基。灭菌锅时处理一般培养基。 方法：

30、方法：80100蒸煮蒸煮1560分钟分钟37培养过夜，连续重培养过夜，连续重复三天复三天 控制：芽孢杆菌芽孢制剂控制：芽孢杆菌芽孢制剂 注意：不含营养物质的物品不宜适用此法。注意：不含营养物质的物品不宜适用此法。 B. 加压法加压法 高 压 蒸 汽 灭 菌 法高 压 蒸 汽 灭 菌 法 （ 常 规 加 压 蒸 汽 灭 菌 法 ）（ 常 规 加 压 蒸 汽 灭 菌 法 ）autoclaving ：是一种利用高温进行湿热灭菌的方法。：是一种利用高温进行湿热灭菌的方法。 设备：高压蒸汽灭菌锅设备：高压蒸汽灭菌锅 原理：在加压条件下，原理：在加压条件下， 水的沸点超过水的沸点超过100，由此，由此可提

31、供高于可提供高于100的水蒸气。的水蒸气。 对象：耐高温物品，一般培养基，生理盐水，缓冲对象：耐高温物品，一般培养基，生理盐水，缓冲溶液，玻璃、陶瓷器皿等溶液，玻璃、陶瓷器皿等 控制：嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢制剂，热变色纸带控制：嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢制剂，热变色纸带连续加压蒸汽灭菌法连续加压蒸汽灭菌法continuous autoclaving 适用于大型发酵厂的大批培养基灭菌适用于大型发酵厂的大批培养基灭菌 135140下维持下维持515秒秒 手提式高压蒸汽灭菌器手提式高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器 2、 过滤除菌法：过滤除菌法： 用具：过滤器，如硝化纤维素滤膜用具：过滤器，如硝化纤

32、维素滤膜 原理：将微生物过滤去除原理：将微生物过滤去除 对象：空气，热敏物质，蛋白质，酶，血清，纤维对象：空气，热敏物质，蛋白质，酶，血清，纤维素，氨基酸等素，氨基酸等 注意：病毒等小于注意：病毒等小于0.2m mm的非细胞微生物无法去除的非细胞微生物无法去除膜滤装置膜滤装置3、辐射灭菌（放射线灭菌法）、辐射灭菌（放射线灭菌法） 原理：原理：微波、紫外线、微波、紫外线、g g-射线、射线、X-射线的杀菌作用。射线的杀菌作用。g g-射线的穿透力非常强，可对密封包装后的物射线的穿透力非常强，可对密封包装后的物品进行灭菌。品进行灭菌。 对象：不耐热或受热易变质、变味的物品。对象：不耐热或受热易变质、变味的物品。 （二）常用的化学消毒剂（二）常用的化学消毒剂 消毒剂消毒剂：能杀死微生物的化学制剂能杀死微生物的化学制剂