五味保肝丸定性定量实验研究

1、五味保肝丸定性定量实验研究         11-05-18 11:22:00     编辑：studa20                 作者：张伟，张云丽，谢旭善，于爽，孙晶  【摘要】  目的 建立五味保肝丸定性定量质量标准。方法 薄层色谱法定性鉴别五味子和丹参的存在, 高效液相色

2、谱法确定降酶丸中五味子甲素含量。结果 定性鉴别五味子和丹参, 方法简便，图谱清晰;高效液相色谱法测定含量，结果准确,阴性无干扰。结论 该实验方法可作为降酶丸的定性定量质量标准指标。 【关键词】  五味保肝丸;薄层色谱;高效液相色谱;五味子甲素五味保肝丸由五味子、丹参等中药组成, 是我院传统中药自制制剂(鲁卫药制字Z02080175)，具有敛阴、活血、降酶功效, 用于乙型肝炎、转氨酶升高等病症, 临床应用近30年，疗效确切。为控制该制剂质量, 除常规检测项目外,实验研究五味子、丹参两味药的薄层色谱法鉴别方法，以及该制剂主要药效成分五味子甲素含量范围，为该制剂质量控制指标提供定性定量实验

3、依据。1 主要仪器、试剂与药材1.1 主要仪器Agilent 1100型高效液相色谱仪 (美国)， JA2003型电子分析天平(上海)，KQ100型超声波清洗器(昆山)。1.2 主要试剂五味子甲素对照品(中国药品生物制品检定所)，甲醇为色谱纯(美国),水为重蒸馏水,其余试剂均为分析纯。1.3 主要药材五味保肝丸由本院制剂室提供，其他实验用药材取自本院中药库，经鉴定五味子为木兰科植物五味子Schisandchinensis(Turcz.)Bail的干燥成熟果实，丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.干燥根及根茎。阴性对照品实验时现制。2 薄层色谱定性鉴别2.1 五味

4、子定性鉴别取五味保肝丸2g，研碎，加氯仿30ml，超声提取30min，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液;另取缺五味子的处方比例量的其他药材细粉2g，按上述方法,制成五味子阴性对照液。再取五味子甲素对照品，加氯仿制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液;吸取上述三种溶液各10l，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(3060)-甲酸乙酯-甲酸(15：5：1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干。置紫外灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，五味子阴性对照液无此斑点。2.2 丹参定性鉴别取五味保肝丸3g，研碎，加乙醚20m

5、l，超声处理10min，过滤，滤液挥干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液;另取缺丹参的处方比例量的其他药材细粉2g，按上述方法,制成丹参阴性对照液;再取丹参酮A对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述3种溶液各10l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯(19：1)为展开剂，展开、取出、晾干。日光下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，丹参阴性对照液无此斑点。3 五味子甲素含量测定3.1 色谱条件色谱柱：Agilent ODS柱(4.6mm×150mm,5m)。柱温：30,流动相：甲醇-水(80：20),流速：1.5

6、ml/min，检测波长：250nm。理论板数按五味子甲素计应不低于3000,五味子甲素峰与相邻峰分离度符合要求。3.2 对照品溶液制备精密称取减压干燥至恒重的五味子甲素对照品6.32mg,加甲醇使溶解,并定容至25 ml;制成浓度为0.2528mg/ml的对照品溶液。3.3 样品液制备取五味保肝丸适量，粉碎过四号筛, 置硅胶于干燥器中干燥24h后备用。取样品粉末约2g，精密称定,置150ml 具塞三角烧瓶中,准确加入氯仿50ml,称重，超声提取40min, 水浴温度45。提取液放至室温, 再称定重量，用氯仿补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液10ml，置水浴上蒸干,残渣加甲醇分次溶解定溶于10ml 容量瓶中, 得样品液。3.4 阴性对照溶液制备取不含五味子的处方比例量的其他药材细粉，照“2.3”项方法制成阴性对照溶液。3.5 系统适应性试验按“2.1”项下条件，将对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液分别进样10l进行测定,