植物组织培养之具体植物学习教案

1、会计学1植物植物(zhw)组织培养之具体植物组织培养之具体植物(zhw)第一页，共67页。株无性系。株无性系。近近400种植物离体繁殖已获成功。兰花、无子种植物离体繁殖已获成功。兰花、无子西瓜、马铃薯、杨树西瓜、马铃薯、杨树(yn sh)等已在种苗等已在种苗生产上广泛应用。生产上广泛应用。第1页/共67页第二页，共67页。繁殖速度繁殖速度(sd)快，经济快，经济效益高效益高占用占用(zhn yn)空间小，不受季节限制，空间小，不受季节限制，便于工厂化育苗便于工厂化育苗繁殖各种珍稀、涉危苗木和突繁殖各种珍稀、涉危苗木和突变体，为育种服务变体，为育种服务离体繁殖周期：离体繁殖周期：13个月个月繁殖

2、系数：几十繁殖系数：几十几百倍几百倍又称快繁又称快繁离体繁殖是建立在体离体繁殖是建立在体细胞系的基础上，细胞系的基础上，是在人工控制的环是在人工控制的环境条件下，不会造境条件下，不会造成性状分离，也不成性状分离，也不会退化，同时还可会退化，同时还可避免病虫害的侵染避免病虫害的侵染。第2页/共67页第三页，共67页。手指手指(shuzh)玫瑰玫瑰 第3页/共67页第四页，共67页。第4页/共67页第五页，共67页。芦荟芦荟(l hu)、烟草、油菜、烟草、油菜等等 第5页/共67页第六页，共67页。无菌母株无菌母株(m zh)制备制备增殖增殖(zngzh)、分化、分化植株植株(zhzh)再生及鉴定

3、再生及鉴定炼苗和移植炼苗和移植基本程序与技术基本程序与技术培养基中激素配比培养基中激素配比激素种类及浓度激素种类及浓度基本培养基组成基本培养基组成渗透压渗透压逐步过渡逐步过渡培养基筛选培养基筛选材料灭菌材料灭菌第6页/共67页第七页，共67页。第7页/共67页第八页，共67页。伤）伤）第8页/共67页第九页，共67页。n培养时间培养时间 3050d （出芽，（出芽，叶）叶）第9页/共67页第十页，共67页。n移栽移栽n移入驯化苗圃（蛭石组成）移入驯化苗圃（蛭石组成）1520d n移入苗圃移入苗圃第10页/共67页第十一页，共67页。甘蔗甘蔗(gn zhe)、胡萝卜、石、胡萝卜、石刁柏等刁柏等

4、第11页/共67页第十二页，共67页。FLash第12页/共67页第十三页，共67页。三倍体无籽西瓜、甘蔗三倍体无籽西瓜、甘蔗(gn zhe)、香蕉、香、香蕉、香石竹、丝石竹等石竹、丝石竹等 第13页/共67页第十四页，共67页。第14页/共67页第十五页，共67页。球茎芽型叶柄表面产生圆球形小突起球茎芽，一端出芽一端出根遗传性较稳定，球茎芽可直接放入土中种植观叶海棠球茎芽型叶柄表面产生圆球形小突起球茎芽，一端出芽一端出根遗传性较稳定，球茎芽可直接放入土中种植观叶海棠球茎芽型叶柄表面产生圆球形小突起球茎芽，一端出芽一端出根遗传性较稳定，球茎芽可直接放入土中种植观叶海棠球茎芽型叶柄表面产生圆球形

5、小突起球茎芽，一端出芽一端出根遗传性较稳定，球茎芽可直接放入土中种植观叶海棠球茎芽型叶柄表面产生圆球形小突起球茎芽，一端出芽一端出根遗传性较稳定，球茎芽可直接放入土中种植观叶海棠球茎芽型叶柄表面产生圆球形小突起球茎芽，一端出芽一端出根遗传性较稳定，球茎芽可直接放入土中种植观叶海棠球茎芽型叶柄表面产生圆球形小突起球茎芽，一端出芽一端出根遗传性较稳定，球茎芽可直接放入土中种植观叶海棠球茎球茎(qijng)(qijng)芽型芽型 叶柄表面产生圆球形小突起叶柄表面产生圆球形小突起球茎球茎(qijng)芽，一端出芽一端出根芽，一端出芽一端出根 遗传性较稳定遗传性较稳定(wndng)，球茎芽可直接，球茎芽

6、可直接放入土中种植放入土中种植 唐唐菖菖蒲蒲观观叶叶海海棠棠第15页/共67页第十六页，共67页。第16页/共67页第十七页，共67页。第17页/共67页第十八页，共67页。狼尾蕨狼尾蕨第18页/共67页第十九页，共67页。第19页/共67页第二十页，共67页。微枝扦插微枝扦插(qinch)(qinch)型型 带芽的小插条在试管内进行无菌扦插带芽的小插条在试管内进行无菌扦插 为木本植物进行快速繁殖为木本植物进行快速繁殖(fnzh)的主要方式的主要方式 葡萄、杨树葡萄、杨树 第20页/共67页第二十一页，共67页。第21页/共67页第二十二页，共67页。植物种类植物种类染病毒种类染病毒种类植物种

7、类植物种类染病毒种类染病毒种类菊花菊花康乃馨康乃馨水仙水仙月季月季葡萄葡萄无花果无花果1911410265矮牵牛矮牵牛马铃薯马铃薯大蒜大蒜苹果苹果草莓草莓桃桃51724362423第22页/共67页第二十三页，共67页。苹果锈果病苹果锈果病薄荷病毒病薄荷病毒病病病第23页/共67页第二十四页，共67页。郁金香杂色郁金香杂色(z s)花花郁金香正常郁金香正常(zhngchng)花花第24页/共67页第二十五页，共67页。细胞内繁殖速度相对较慢；另细胞内繁殖速度相对较慢；另外，病毒是通过筛管组织或胞外，病毒是通过筛管组织或胞间联丝传播至其他组织细胞的，间联丝传播至其他组织细胞的，而茎尖分生组织无分

8、化，没有而茎尖分生组织无分化，没有维管组织。）维管组织。）第25页/共67页第二十六页，共67页。第26页/共67页第二十七页，共67页。(5) (5) 抑制因子抑制因子 1976 1976年，年，Martin-TanguyMartin-Tanguy等提出了抑制等提出了抑制因子假说，认为在分生组织因子假说，认为在分生组织中存在有某种抑制因子。中存在有某种抑制因子。第27页/共67页第二十八页，共67页。第28页/共67页第二十九页，共67页。第29页/共67页第三十页，共67页。第30页/共67页第三十一页，共67页。第31页/共67页第三十二页，共67页。热空气处理脱毒法热空气处理脱毒法将试

9、验母株在高温生长室中生长一个将试验母株在高温生长室中生长一个(y )阶段，使其顶端分生组织和次阶段，使其顶端分生组织和次生分生组织迅速生长，然后切取其生分生组织迅速生长，然后切取其茎尖分生组织进行离体培养。茎尖分生组织进行离体培养。生长室温度（生长室温度（35 40）光照强度（光照强度（300010000Lx)第32页/共67页第三十三页，共67页。继代继代 无烟草花叶病毒无烟草花叶病毒(TMV) 无黄瓜花叶病毒无黄瓜花叶病毒(CMV) 次数次数 25 30 37 25 30 37 0 0/20 8/21 - - 1 0/20 0/20 0/20 5/18 4/19 10/21 2 0/20

10、0/20 0/20 8/20 10/20 11/20 3 0/20 0/20 8/20 10/20 8/20 11/20 4 0/20 0/20 5/20 5 4/20 1/20 5/20结论结论: 病毒种类不同病毒种类不同,愈伤组织反复继代愈伤组织反复继代(j di)兼热处理的效果不兼热处理的效果不同；同；TMV、CMV均经均经37热处理，脱毒效果最好。热处理，脱毒效果最好。第33页/共67页第三十四页，共67页。 其它效果其它效果 香石竹（康乃馨）在香石竹（康乃馨）在3840下经两下经两个月处理个月处理(chl)可除去全部病毒。可除去全部病毒。第34页/共67页第三十五页，共67页。马铃薯

11、在马铃薯在37下处理下处理1020天能除去天能除去(ch q)卷叶病毒。卷叶病毒。第35页/共67页第三十六页，共67页。第36页/共67页第三十七页，共67页。第37页/共67页第三十八页，共67页。茎尖茎尖大小大小(mm)培培养养数数荆芥鉴定之病斑荆芥鉴定之病斑总病斑总病斑 接种叶数接种叶数 平均病斑数平均病斑数/叶叶无病毒茎尖无病毒茎尖 数目数目 % 0.1 0.25 0.5 0.75 1.01.0 3 20 30 9 4 5 3 13 0.2 137 61 2.2 1198 70 17.1 429 12 35.3 432 11 39.2 1972 20 98.6 2 66 8 40 4

12、 13 1 11 0 0 0 0第38页/共67页第三十九页，共67页。茎尖培养法脱除植物病毒的技术茎尖培养法脱除植物病毒的技术(jsh)关键关键 茎尖越小对培茎尖越小对培养基的要求越养基的要求越高，成功率越高，成功率越低。低。第39页/共67页第四十页，共67页。n用很小的茎尖来培养，去除病用很小的茎尖来培养，去除病毒几率大，获得无病毒苗的可毒几率大，获得无病毒苗的可能性大。能性大。第40页/共67页第四十一页，共67页。第41页/共67页第四十二页，共67页。关系（苹果关系（苹果46月取材嫁月取材嫁接成活率较接成活率较高。）高。）第42页/共67页第四十三页，共67页。n该方法的缺点该方法

13、的缺点(qudin)：n存在存在20%30%左右的变异左右的变异率，无病毒苗苗期较长。柑橘率，无病毒苗苗期较长。柑橘要要68年才能结果。年才能结果。第43页/共67页第四十四页，共67页。胚珠胚珠(pi zh)第44页/共67页第四十五页，共67页。第45页/共67页第四十六页，共67页。n（c c）继代培养的愈伤组织抗性变）继代培养的愈伤组织抗性变异。异。第46页/共67页第四十七页，共67页。第47页/共67页第四十八页，共67页。第48页/共67页第四十九页，共67页。n或在提纯过程中丧失了必备的抗或在提纯过程中丧失了必备的抗原结构；原结构；n植物体内的单宁物质使植物体内的单宁物质使病毒

14、丧失了抗原性质。病毒丧失了抗原性质。第49页/共67页第五十页，共67页。病毒感染病毒感染人工注射人工注射(zhsh)异体蛋白异体蛋白动物动物动物动物植物植物带该种病毒带该种病毒血清反应血清反应+免疫球蛋白免疫球蛋白（抗原）（抗原）（抗体）（抗体）（抗原）（抗原）第50页/共67页第五十一页，共67页。第51页/共67页第五十二页，共67页。 马铃薯马铃薯X病毒侵染千日红（病毒侵染千日红（叶片叶片(ypin)呈枯斑）呈枯斑） 马铃薯马铃薯M病毒侵染千日红（病毒侵染千日红（叶片叶片(ypin)呈突起枯斑）呈突起枯斑）第52页/共67页第五十三页，共67页。嫁接法嫁接法 一些木本多年生果树或草莓等

15、无一些木本多年生果树或草莓等无性繁殖草本植物，其病毒不是通过性繁殖草本植物，其病毒不是通过汁液而是其他介体传播汁液而是其他介体传播如草莓黄如草莓黄化病毒是由蚜虫（化病毒是由蚜虫（Mtzus fragaefolii）传播的，这种病毒鉴）传播的，这种病毒鉴定定(jindng)可采用嫁接法，即用可采用嫁接法，即用鉴定鉴定(jindng)植株芽作接穗，指植株芽作接穗，指示植物作砧木。根据指示植物的表示植物作砧木。根据指示植物的表现判断是否脱除了病毒。现判断是否脱除了病毒。第53页/共67页第五十四页，共67页。第54页/共67页第五十五页，共67页。第55页/共67页第五十六页，共67页。第56页/共

16、67页第五十七页，共67页。脱毒苗保存(bocn)第57页/共67页第五十八页，共67页。花药花药(huyo)及花粉培养及花粉培养概念概念(ginin)及意义及意义花药培养花药培养(piyng)属属于于器官培养器官培养(piyng)范范畴畴花粉培养属于花粉培养属于细胞培养范畴细胞培养范畴也称小孢子培养也称小孢子培养第58页/共67页第五十九页，共67页。育种年限育种年限n获得育种中间材料获得育种中间材料n与诱变育种相结合可以提高与诱变育种相结合可以提高诱变频率诱变频率n与细胞融合相结合，使这一与细胞融合相结合，使这一育种途径更具有实际应用意育种途径更具有实际应用意义义n作为遗传工程受体更为有效作为遗传工程受体更为有效n用作基础遗传研究的各个领用作基础遗传研究的各个领域域第59页/共67页第六十页，共67页。第60页/共67页第六十一页，