T∕CGSS 013-2020 单克隆丙种球蛋白实验室诊断指南

1、ICS 11.100C 05团体标准T/CGSS 013 2020单克隆丙种球蛋白实验室诊断指南Guides of the diagnosis for monoclonal gammaglobulin in clinical laboratories2020-05-22 发布2020-05-22 实施中国老年医学学会发布T/CGSS 0132020目次前言IV引言V1 范围12 规范性引用文件13 术语和定义14 总则34.1 单克隆丙种球蛋白实验室诊断的基本方法34.2 单克隆丙种球蛋白检测的临床应用指导44.3 单克隆丙种球蛋白检测的实验室要求45 单克隆丙种球蛋白检测方法45.1 血清单

2、克隆丙种球蛋白检测方法45.2 尿液单克隆丙种球蛋白检测方法56 单克隆丙种球蛋白检测和鉴定流程图56.1 单克隆丙种球蛋白检测和鉴定一般情况流程图56.2 单克隆丙种球蛋白检测和鉴定特殊情况流程图77 单克隆丙种球蛋白鉴定87.1 血液单克隆丙种球蛋白鉴定87.2 尿液单克隆丙种球蛋白鉴定108 人员要求118.1 人员保证118.2 人员培训118.3 人员组成119 质量保证119.1 实验室内质控119.2 实验室间比对1110 单克隆丙种球蛋白的报告1110.1 定性实验1110.2 定量实验12附录 A（资料性附录）血清免疫固定电泳一般图谱13附录 B（资料性附录）血清蛋白电泳 M

3、 蛋白划取方式15附录 C（资料性附录）血清免疫固定电泳特殊图谱17附录 D（资料性附录）尿免疫固定电泳一般图谱20III附录 E（资料性附录）尿免疫固定电泳特殊图谱21附录 F（资料性附录）单克隆丙种球蛋白实验室报告示例23参考文献24前言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由中国老年医学学会检验医学分会提出。本标准由中国老年医学学会归口。本标准起草单位：中国医学科学院北京协和医院、北京大学第一医院、上海交通大学医学院附属新华医院、赛比亚医疗诊断器械（上海）有限公司。本标准主要起草人：苏薇、韩建华、邱玲、李鹏昌、嵇巍、邸茜、张俊保、冯珍如、汪萍。T/CGSS 01320

4、20引言血液或尿液中出现单克隆丙种球蛋白即单克隆丙种球蛋白病，是多种浆细胞病的共同特征，其发病机理是：由于染色体易位和骨髓微环境变化等多种原因，造成克隆性B淋巴细胞或浆细胞异常增殖， 产生大量的可在血液或尿液中检测到的单克隆免疫球蛋白或单克隆游离轻链或重链。单克隆丙种球蛋白病与多种浆细胞病相关，如多发性骨髓瘤（MM）、骨硬化性骨髓瘤（POEMS综合征）、华氏巨球蛋白血症（WM）、重链病和免疫球蛋白沉积症（原发性淀粉样变性、轻链沉积病）等。没有相应的临床症状同时M蛋白浓度较低时被定义为意义未明的单克隆丙种球蛋白血症（MGUS）。单克隆丙种球蛋白的检测在浆细胞病的诊断和治疗监测中具有举足轻重的作用

5、。随着我国进入老龄化社会，多发性骨髓瘤作为一种老年人易患的恶性浆细胞病，在血液肿瘤中的发病率已上升到第二位，对老年人的健康造成很大威胁。而实验室对于单克隆丙种球蛋白检测的敏感度和准确度，直接影响了多发性骨髓瘤的诊疗水平。单克隆丙种球蛋白的检测主要依靠蛋白电泳和免疫化学法，而电泳检测不同于普通生化检测，在结果的判断上具有一定的主观性。虽然单克隆丙种球蛋白具有特征性的电泳图谱，但也具有很强的异质性， 且某些患者在疾病的不同时期或经过治疗干预后，蛋白质的组成和其在电泳中的行为表现出多样性、可变性和不确定性，使得实验室工作人员在某些情况下对免疫球蛋白的性质难以做出正确的判断。此外， 这一领域普遍存在着

6、概念不清，结果报告方式混乱等问题。本指南旨在规范单克隆丙种球蛋白检测的流程和方法以及报告方式，为相关的实验室工作人员提供正确的电泳图谱读取和判断方法，也帮助临床医生了解克隆性丙种球蛋白实验室检测和结果判读的方法， 从而提高单克隆丙种球蛋白病的诊断水平。IVT/CGSS 0132020单克隆丙种球蛋白实验室诊断指南1 范围本标准规定了单克隆丙种球蛋白实验室诊断的实验组合、检测流程及结果的判断方法和解读以及结果的报告方式等。本标准适用于临床实验室和商业实验室对单克隆丙种球蛋白的检测。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日

7、期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 22576.1 医学实验室 质量和能力的要求 第1部分：通用要求3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件3.1 3.1单克隆丙种球蛋白monoclonal gammaglobulin，M 蛋白B 淋巴细胞或浆细胞克隆性增殖而大量产生的在类别、亚类、型、亚型上相同的均一免疫球蛋白或免疫球蛋白片段（如轻链或重链）。注：这种均一蛋白质的氨基酸顺序、空间构象和电泳特性皆相同且没有正常生理功能。3.2 3.2单克隆丙种球蛋白病 monoclonal gammapathies单一克隆的浆细胞或B淋巴细胞增殖分泌M蛋白引起的一组疾病。3.3

8、 3.3单克隆游离轻链 monoclonal free light chains恶变的浆细胞产生的未与重链结合的分子量较小的免疫球蛋白多肽链。3.4 3.4单克隆游离重链 monoclonal free heavy chains6恶变的浆细胞产生的未与轻链结合或由于结构不完整不能与轻链结合的分子量较大的免疫球蛋白多肽链。3.5 3.5本周蛋白 Bence-Jones protein单克隆游离轻链或，一般出现在尿中。3.6 3.6寡克隆条带 oligoclonal band，OCB某几个克隆的浆细胞异常增殖，其合成的免疫球蛋白增多，在电泳时出现几个狭窄的不连续条带。注：寡克隆条带常见于浆细胞病治

9、疗后、自身免疫病和感染等。3.7 3.7免疫球蛋白聚合体immunoglobulin polymer免疫球蛋白单体通过二硫键连接形成不同聚合度的、相对于免疫球蛋白单体分子量较大的化合物。3.8 3.8轻链聚合体 light chains polymer游离轻链单体通过二硫键连接形成不同聚合度的、相对于轻链单体分子量较大的化合物。3.9 3.9非特异性结合nonspecific binding抗原与非特异性抗体的结合。3.10 3.10浆细胞反应性增殖reactive proliferation of plasmacyte机体对外来抗原产生的正常体液免疫反应，针对该抗原产生抗体的某些浆细胞非克隆

10、性增殖。3.11 3.11治疗性单抗药物 therapeutic monoclonal antibody治疗用人源化单克隆抗体注：通过与相应抗原的结合干预疾病发生、发展过程中的各个通路，如CD20单抗和CD38单抗等。3.12 3.12血清蛋白电泳serum protein electrophoresis, SPE血清蛋白在凝胶或毛细管介质中按照其所带电荷的性质和数量电泳分离成五至六个组分，分别是白蛋白、1球蛋白、2球蛋白、球蛋白（1球蛋白和2球蛋白）和球蛋白，经过光密度扫描后对每一个蛋白组分进行半定量检测即每一个蛋白组分的电泳峰面积占所有蛋白峰面积的百分比。3.13 3.13血清免疫固定电泳

11、serum immunofixation electrophoresis, sIFE血清蛋白在凝胶介质中分六个泳道进行电泳分离，然后每个泳道加入不同的抗体或固定液与血清中的相应蛋白质结合并发生沉淀（其顺序为蛋白固定液、重链抗体、重链抗体、重链抗体、轻链抗体、轻链抗体），清洗掉未结合蛋白后进行蛋白染色。3.14 3.14尿免疫固定电泳 urine immunofixation electrophoresis, uIFE尿蛋白在凝胶介质中分六个泳道进行电泳分离，然后每个泳道加入不同的抗体或固定液与尿液中的相应蛋白质结合并发生沉淀（其顺序为蛋白固定液、重链混合抗体、轻链抗体、轻链抗体、游离轻链抗体、

12、游离轻链抗体），清洗掉未结合蛋白后进行蛋白染色。3.15 3.15尿蛋白电泳 urine protein electrophoresis, uPE尿蛋白在凝胶介质中电泳，按照其所带电荷的性质和数量进行分离。3.16 3.16血清游离轻链（比）测定 serum free light chains (ratio) test，sFLC（r）采用免疫比浊法测定血清中的游离轻链和，并计算二者的比值。4 总则4.1 单克隆丙种球蛋白实验室诊断的基本方法采用定性和定量相结合的方法，对血清和尿液进行相关检查：a) 血清和尿免疫固定电泳（定性）；b) 血清和尿蛋白电泳（定量）；c) 血清游离轻链比测定（定性和定

13、量）。根据实验结果判断血液和尿液中是否含有M蛋白并测定M蛋白含量。4.2 单克隆丙种球蛋白检测的临床应用指导按照确定的检测程序（参见第6章）对血液和尿液中的单克隆丙种球蛋白进行定性和定量检测，为相关浆细胞病的诊断、疾病分期、疗效评估等提供依据。4.3 单克隆丙种球蛋白检测的实验室要求按照GB/T 22576.1规定的要求设置实验室。5 单克隆丙种球蛋白检测方法5.1 血清单克隆丙种球蛋白检测方法5.1.1 概述血清单克隆丙种球蛋白检测通常包括定性法和定量法。5.1.2 定性法5.1.2.1 电泳法一般情况下，血清免疫固定电泳免疫球蛋白泳道出现致密条带为M蛋白阳性结果，免疫球蛋白呈均匀弥散分布则

14、为阴性结果，同时在两个轻链泳道和不同的重链泳道出现两条以上的致密条带为寡克隆蛋白。血清免疫固定电泳一般图谱如图A.1所示。注：特殊情况参见7.1.6。5.1.2.1.1 电泳法检出限免疫固定电泳法的检出限不高于0.1 g/L。5.1.3 定量法5.1.3.1 电泳法M蛋白定量首选电泳法。在血清蛋白电泳扫描图谱区域出现高而窄的峰型，可以判断为M蛋白。2、区域若出现高而窄的峰型，必须经免疫固定电泳确定后，才可判断为M蛋白。手动选取M蛋白电泳 峰，其峰面积占所有蛋白峰面积的百分比为半定量结果，也可通过总蛋白浓度计算得到单克隆免疫球蛋白 浓度。其计算公式为：单克隆免疫球蛋白浓度（g/L）=单克隆免疫球

15、蛋白百分比(%)×总蛋白浓度（g/L）(公式1)5.1.3.1.1 电泳法定量限受M蛋白电泳迁移位置和多克隆本底的影响，如采用垂直划取的方式选择 M 蛋白电泳峰，电泳法的定量限范围为0.5 g/L1 g /L；如采用切线划取的方式选择 M 蛋白电泳峰，电泳法的定量限应不高于0.5 g/L。血清蛋白电泳M蛋白划取方式如图 B.1 所示。5.1.3.1.2 电泳法批间变异M蛋白浓度低于10 g/L时，电泳的定量方法批间变异不高于15%。5.1.3.2 免疫球蛋白定量当M蛋白与非免疫球蛋白电泳迁移率相同且含量较低时，采用免疫化学法对相应类型的免疫球蛋白定量优于电泳法定量。5.2 尿液单克隆

16、丙种球蛋白检测方法5.2.1 概述尿液单克隆丙种球蛋白检测通常包括定性方法和定量方法。定性和M蛋白类型鉴定采用晨尿，定量采用24h尿。5.2.2 定性法5.2.2.1 电泳法尿免疫固定免疫球蛋白泳道出现致密条带为M蛋白阳性结果，免疫球蛋白呈均匀弥散分布则为阴性结果。5.2.2.1.1 电泳法检出限尿免疫固定电泳M蛋白检出限不高于5 mg/L。5.2.3 定量法5.2.3.1 电泳法尿蛋白电泳分离尿蛋白，如2区出现致密条带，则通过尿免疫固定电泳进一步确定其是否具有M蛋白的性质，如确定此致密条带为M蛋白，则手动选取 M 蛋白电泳峰，其峰面积占所有蛋白峰面积的百分比为半定量结果，也可通过确定的 24

17、h 尿总蛋白浓度计算得到M 蛋白浓度。其计算公式为：M 蛋白浓度（mg/L）= M 蛋白占总蛋白百分比(%)×24h 尿总蛋白浓度（mg/L） （公式 2）24h 尿M 蛋白总量（mg/24h）=M 蛋白浓度（mg/L）×24h 尿量(L) （公式3）5.2.3.1.1 电泳法定量限非浓缩尿蛋白电泳M蛋白定量限不高于20 mg/L。5.2.3.1.2 电泳法批间变异非浓缩尿蛋白电泳M蛋白定量批间变异不高于15%。6 单克隆丙种球蛋白检测和鉴定流程图6.1 单克隆丙种球蛋白检测和鉴定一般情况流程图单克隆丙种球蛋白检测和鉴定一般情况流程图如图1所示。7.1.3血清IgG/IgA

18、/IgM 免疫固定电泳阴性血液尿液 和区无密集条带 和 区有密集条带7.1.2血清蛋白电泳检测M 蛋白定量只在轻链泳道出现致密条带重链和轻链泳道相应位置出现致密条带阳性7.1.4血清 IgD/IgE 免疫固定电泳阴性阳性IgG/IgA/IgM 型IgD/IgE 型7.1.5血清游离轻链(比)检测正常异常轻链型7.2.2尿免疫固定电泳阴性阳性尿蛋白电泳定量M 蛋白阴性T/CGSS 013202077.1.6.17单克隆游离重链的确定7.1.6.13单个轻链泳道淡染条带的处理7.1.6.11凝胶孔堵塞的处理图 1.单克隆丙种球蛋白检测和鉴定一般情况流程图6.2 单克隆丙种球蛋白检测和鉴定特殊情况流

19、程图血液7.1.6.18某些克隆反应性增殖7.1.6.16出现单克隆游离重链7.1.6.14高球蛋白7.1.6.12单个轻链泳道出现淡染条带7.1.6.10凝胶孔堵塞7.1.6.8出现非特异结合条带7.1.6.6条带中间未着色7.1.6.4轻链条带缺失7.1.6.3轻链比例严重失衡但血清免疫固定电泳无致密条带7.1.6.2免疫球蛋白聚合体形成多个条带7.1.6.1完整 M 蛋白同时含单克隆游离轻链单克隆丙种球蛋白检测和鉴定特殊情况流程图如图2所示。7.1.6.5轻链条带缺失的处理7.1.6.7条带中间未着色的处理7.1.6.9非特异结合条带的处理7.1.6.15高球蛋白的处理7.1.6.19某

20、些克隆反应性增殖的确定7.1.6.21寡克隆条带的确认7.1.6.20出现寡克隆条带T/CGSS 0132020图 2a)单克隆丙种球蛋白血液检测和鉴定特殊情况流程图尿液7.2.3.2轻链的聚合7.2.3.1只在总轻链泳道出现条带7.2.3.3聚合轻链的处理图 2b)单克隆丙种球蛋白尿液检测和鉴定特殊情况流程图7 单克隆丙种球蛋白鉴定7.1 血液单克隆丙种球蛋白鉴定7.1.1 概述通过血清蛋白电泳、血清免疫固定电泳、血清游离轻链（比）对血清中的 M 蛋白进行鉴定。7.1.2 血清蛋白电泳检测和区出现致密条带或出现打乱正常蛋白分布的蛋白质峰，可初步鉴定为M蛋白。7.1.3 血清 IgG/IgA/

21、IgM 免疫固定电泳检测通过是否存在致密条带及致密条带所在的电泳泳道确定M 蛋白是否存在及M 蛋白的类型（IgG/IgA/IgM）。7.1.4 血清 IgD/IgE 免疫固定电泳检测通过是否存在致密条带及致密条带所在的电泳泳道确定M蛋白是否存在及M蛋白的类型（IgD/IgE）, 该项测定需要在IgG/IgA/IgM免疫固定电泳仅在轻链泳道出现致密条带时实施。若IgD/IgE的重链泳道没有条带则可确定为轻链型M蛋白。7.1.5 血清游离轻链（比）检测一般情况下，血清游离轻链（比）异常时M蛋白阳性。当血清免疫固定电泳阴性时，该项测定可以更灵敏地检测到单克隆游离轻链。注：当两种游离轻链同时升高，而血

22、清游离轻链（比）轻度异常时，结合其他实验判断M蛋白是否为阳性。7.1.6 特殊情况的判断和处理7.1.6.1 完整 M 蛋白同时含单克隆游离轻链轻链泳道出现两个条带，一个与某个重链泳道相对应，另一个不与任何重链泳道相对应，则 M 蛋白为完整的免疫球蛋白和单克隆游离轻链，一般情况下该单克隆游离轻链是同一克隆的浆细胞产生的。血清免疫固定电泳图谱如图 C.1a)所示。257.1.6.2 免疫球蛋白聚合体形成多个条带一个重链泳道和一个轻链泳道同时出现二到三条相对应的条带，此为形成了不同聚合度的M蛋白聚合体，常见于IgA类型的M蛋白，此M蛋白是一个克隆的浆细胞产生的。血清免疫固定电泳图谱如图C.1b)

23、所示。7.1.6.3 轻链比例严重失衡但血清免疫固定电泳无致密条带血清免疫固定电泳一个轻链泳道深染，而另一个轻链泳道几乎不被染色，但无致密条带，此为不同聚合度的M蛋白没有分离或M蛋白浓度过高，常见于IgA类型的M蛋白。7.1.6.4 轻链条带缺失重链泳道出现明显的致密条带，对应位置不出现轻链条带。此为M蛋白空间构型的改变造成轻链的结合位点被遮盖或部分遮盖，难以与轻链抗体结合形成单克隆条带，常见于IgA和IgD类的M蛋白。血清免疫固定电泳图谱如图C.1c)所示。7.1.6.5 轻链条带缺失的处理采用更敏感的尿免疫固定电泳的方式进行测定，血清标本需要进行10倍稀释。7.1.6.6 条带中间未着色抗

24、原浓度过高。血清免疫固定电泳图谱如图C.1d)所示。7.1.6.7 条带中间未着色的处理血清高倍稀释后，再进行血清免疫固定电泳。7.1.6.8 出现非特异结合条带特异结合的泳道条带染色很深而非特异性结合的泳道条带较浅，但条带的电泳位置都相同。血清免疫固定电泳图谱如图C.1e)所示。7.1.6.9 非特异结合条带的处理血清用生理盐水进行1:1稀释后，再进行血清免疫固定电泳。7.1.6.10 凝胶孔堵塞在每个泳道靠近点样孔的位置都出现染色程度相同的条带，此为大分子免疫球蛋白IgM或其他大分子蛋白堵塞凝胶孔。血清免疫固定电泳图谱如图C.1f)所示。7.1.6.11 凝胶孔堵塞的处理用终浓度为2%3%

25、的-巯基乙醇处理血清标本20min，再进行血清免疫固定电泳。7.1.6.12 单个轻链泳道出现淡染条带只在某一个轻链泳道出现不确定的淡染条带，而重链泳道看不到条带。7.1.6.13 单个轻链泳道出现淡染条带的处理通过尿免疫固定电泳实验或血清游离轻链（比）判断是否存在本周蛋白或单克隆游离轻链，如本周蛋白阴性或没有单克隆游离轻链，则可能存在低水平的 IgG 类M 蛋白，可通过等电聚焦电泳进一步证实。7.1.6.14 高球蛋白免疫球蛋白大幅度升高，且免疫固定电泳不能确定是否存在致密条带。7.1.6.15 高球蛋白的处理血清高倍稀释后再进行免疫固定电泳，如两个轻链泳道都深染，则可判断为多克隆免疫球蛋白

26、升高。7.1.6.16 出现单克隆游离重链血清免疫固定电泳在重链泳道出现较宽的致密条带，而在轻链泳道相应位置不出现条带。血清免疫固定电泳图谱如图C1.g)所示。7.1.6.17 单克隆游离重链的确定通过尿免疫固定电泳确定尿液中含有单克隆重链，而无完整的M蛋白和单克隆轻链，进而确定血清中含有单克隆游离重链。7.1.6.18 某些克隆反应性增殖血清免疫固定电泳轻链和泳道均出现弱的条带，且不出现某一种免疫球蛋白明显升高，而其他免疫球蛋白明显降低的情况。或免疫球蛋白IgG多克隆显著升高，同时IgM出现弱的致密条带。血清免疫固定电泳图谱如图C.1h)和图C.1i)所示。7.1.6.19 某些克隆反应性增

27、殖的确定结合临床资料和其他实验结果或与临床医生沟通后综合判断。7.1.6.20 出现寡克隆条带在多个泳道出现两条以上不互相对应的致密条带，特别是当两个轻链泳道均出现条带时。7.1.6.21 寡克隆条带的确认采用高分辨率的等电聚焦电泳进行分析，单克隆和寡克隆丙种球蛋白具有不同的电泳图谱。7.2 尿液单克隆丙种球蛋白鉴定7.2.1 概述通过尿免疫固定电泳对尿液中的M蛋白进行鉴定。7.2.2 尿免疫固定电泳检测通过致密条带所在的泳道判断是否存在本周蛋白或完整的单克隆丙种球蛋白，并可得到本周蛋白的型别。尿免疫固定电泳图谱如图D.1所示。7.2.3 特殊情况的判断和处理7.2.3.1 只在总轻链泳道出现

28、条带因免疫球蛋白重链、轻链、游离轻链抗体与抗原结合能力递减，故此为本周蛋白阳性，无完整M蛋白。尿免疫固定电泳图谱如图E.1a)所示。7.2.3.2 轻链的聚合轻链聚合后电泳条带呈现弥散状，但两型的轻链比例严重不平衡，如全部为轻链，而缺如。或对照泳道出现致密条带，而其他泳道的相应位置全部呈弥散状。尿免疫固定电泳图谱如图E1.b)和图E1.c)所示。7.2.3.3 聚合轻链的处理用终浓度为2%3%的-巯基乙醇处理尿液标本20min，然后再进行电泳。8 人员要求8.1 人员保证符合GB/T 22576.1规定的人员培训、评估和授权等要求。8.2 人员培训技术人员上岗之前宜进行至少 1 个月的培训。8

29、.3 人员组成单克隆丙种球蛋白实验室诊断人员由技术负责人和普通技术人员组成，技术负责人应熟悉所有相关 实验，并具有三年以上相关工作经验。遇有特殊标本，如各相关实验结果不符合或出现出乎意料的不合理变化， 普通技术人员应告知技术负责人，由技术负责人负责判断或联系临床进行解决。9 质量保证9.1 实验室内质控符合GB/T 22576.1规定的内部质量控制的要求。9.2 实验室间比对符合GB/T 22576.1规定的实验室间比对的要求。如无实验室比对计划可利用时，实验室采用的替代方案宜符合GB/T 22576.1的要求。10 单克隆丙种球蛋白的报告10.1 定性实验10.1.1 概述明确报告M蛋白是否

30、为阳性，阳性结果报告M蛋白类型。10.1.2 寡克隆条带的报告结果报告M蛋白阴性或同时加备注说明“可见寡克隆条带”。10.1.3 某些克隆反应性增生的报告结果报告M蛋白阴性。10.1.4 结果不确定的报告结果报告M蛋白可疑阳性。10.1.5 治疗性单抗药物干扰的报告若出现与原始条带不同的条带，宜提示临床鉴别有无药物干扰。10.2 定量实验10.2.1 概述以占总蛋白百分比（%）和/或浓度（g/L，血清；mg/L，尿液）报告定量结果，患者的M蛋白峰选取方式宜前后一致。10.2.2 M 蛋白与其他非免疫球蛋白无法完全分离时的定量结果报告报告注明M蛋白为近似定量结果。10.2.3 M 蛋白与其他非免

31、疫球蛋白完全无法分离时的定量结果报告报告注明M蛋白无法定量。10.2.4 检测结果低于定量限的报告报告注明M蛋白低于定量限，如<0.5g/L。10.2.5 单克隆丙种球蛋白实验室检测报告示例单克隆丙种球蛋白实验室检测报告示例如附录F所示。附录A（资料性附录）血清免疫固定电泳一般图谱血清免疫固定电泳一般图谱如图A.1所示。a) 血清免疫固定电泳M蛋白阳性图谱b)血清免疫固定电泳M蛋白阴性图谱c) 血清免疫固定电泳寡克隆免疫球蛋白图谱注：ELP:加入蛋白固定液；G：加入免疫球蛋白重链抗体； A：加入免疫球蛋白重链抗体； M：加入免疫球蛋白重链抗体； K：加入免疫球蛋白轻链抗体；L：加入免疫球

32、蛋白轻链抗体。图A.1 血清免疫固定电泳一般图谱附录B（资料性附录）血清蛋白电泳 M 蛋白划取方式血清蛋白电泳M蛋白划取方式如图B.1所示a) 切线划取b) 垂直划取图B.1 血清蛋白电泳M蛋白划取方式附录C（资料性附录）血清免疫固定电泳特殊图谱血清免疫固定电泳特殊图谱如图C.1所示。a) 完整M蛋白同时含单克隆游离轻链b)免疫球蛋白聚合体c)轻链缺失d)条带中间未着色e)非特异性结合f)大分子蛋白堵塞凝胶孔g) 某些克隆反应性增殖h)某些克隆反应性增殖i) 单克隆游离重链注：ELP:加入蛋白固定液；G： 加入免疫球蛋白重链抗体； A： 加入免疫球蛋白重链抗体； M：加入免疫球蛋白重链抗体；

33、K：加入免疫球蛋白轻链抗体； L：加入免疫球蛋白轻链抗体。图C.1 血清免疫固定电泳特殊图谱附录D（资料性附录）尿免疫固定电泳一般图谱尿免疫固定电泳一般图谱如图D.1所示。a) 本周蛋白阳性b)本周蛋白和完整M蛋白阳性注：ELP：加入蛋白固定液；GAM：加入免疫球蛋白重链、混合抗体； K：加入轻链抗体；L：加入轻链抗体； Kf：加入游离轻链抗体； Lf：加入游离轻链抗体。图D.1 尿免疫固定电泳一般图谱附录E（资料性附录）尿免疫固定电泳特殊图谱尿免疫固定电泳特殊图谱如图E.1所示。a)只在总轻链泳道出现致密条带b)轻链的聚合c)轻链的聚合d)单克隆游离重链注：ELP：加入蛋白固定液；GAM：加

34、入免疫球蛋白重链、混合抗体； K：加入轻链抗体；L：加入轻链抗体；Kf：加入游离轻链抗体； Lf：加入游离轻链抗体。图E.1 尿免疫固定电泳特殊图谱附录F（资料性附录）单克隆丙种球蛋白实验室报告示例示例：单克隆丙种球蛋白实验室报告患者一般资料信息，可包括但不限于：姓名、性别、年龄、就诊号、送检科室、诊断、标本类型等医院名称检测项目：血清 IgG/IgA/IgM 免疫固定电泳英文中文名称结果参考范围1IgA IgA 型 M 蛋白阴性/阳性/可疑阳性阴性2IgA IgA 型M 蛋白阴性/阳性/可疑阳性阴性3IgG IgG 型 M 蛋白阴性/阳性/可疑阳性阴性4IgG IgG 型M 蛋白阴性/阳性/

35、可疑阳性阴性5IgM IgM 型 M 蛋白阴性/阳性/可疑阳性阴性6IgM IgM 型 M 蛋白阴性/阳性/可疑阳性阴性7轻链 型 M 蛋白阴性/阳性/可疑阳性阴性8轻链 型 M 蛋白阴性/阳性/可疑阳性阴性9H Chain重链型 M 蛋白阴性/阳性/可疑阳性阴性备注：特殊结果的报告，如：可见寡克隆条带。检测项目：血清蛋白电泳1英文Alb中文名称白蛋白结果单位%参考范围211球蛋白%322球蛋白%411球蛋白%522球蛋白%6球蛋白%7A/G白蛋白/球蛋白8Mprotein%M蛋白%9MproteinM蛋白g/L备注：特殊结果的报告或建议，如：建议做血清免疫固定电泳。图F.1 单克隆丙种球蛋白

36、实验室报告示例参考文献1. D.F.Keren. Protein Electrophoresis in Clinical Diagnosis, ASCP press: Chicago, 2012.2. A.Charmbach, M.J.Dunn, B.J.Radola. Advances in Electrophoresis Volume 7, VCH Publishers Inc: New York,1994.3. 沈立松 路瑾主编.现代蛋白电泳筛查和诊断的临床应用, 上海科学技术出版社:上海，2019年5 月.4. 苏薇，高学慧，韩建华等 四种分析技术检测血清单克隆免疫球蛋白的比较 中华检

37、验医学杂志 2012;35（3）:261-64.5. 武淑兰 孙士斌主编. 浆细胞病-基础与临床, 北京大学医学出版社: 北京，2003年12月.6. Katzmann JA, Kyle RA, Benson J. Screening panels for detection of monoclonal gammopathies. Clin Chem 2009;55(8):1517-22.7. D.F. Keren, R. Alexanian, J.A. Goeken et al. Guidelines for clinical and laboratory evaluation patien

38、ts with monoclonal gammopathies, Arch. Pathol. Lab. Med. 1999;123:106107.8. J. Tate, G. Caldwell, J. Daly, D. Gillis, M. Jenkins, S. Jovanovich, et al., Recommendations for standardized reporting of protein electrophoresis in Australia and New Zealand, Ann. Clin. Biochem. 2012;49:242256.9. S. Vasikaran, K. Sikaris, E. Kilpatrick, J. French, T. Badrick, J. Osypiw, et al., Assuring the quality of interpretative comments in clinical chemistry, Clin.