第7章-生物制品

1、疫苗疫苗l疫苗疫苗的现代的现代定义定义为：一切通过注射或黏膜为：一切通过注射或黏膜途径接种，可以诱导机体产生针对特定致途径接种，可以诱导机体产生针对特定致病原的特异性抗体或细胞免疫，从而使机病原的特异性抗体或细胞免疫，从而使机体获得体获得保护或消灭该致病原保护或消灭该致病原能力的生物制能力的生物制品统称为疫苗，包括蛋白质、多糖、核酸、品统称为疫苗，包括蛋白质、多糖、核酸、活载体或感染因子。活载体或感染因子。l疫苗按生物来源一般分疫苗按生物来源一般分细菌及类毒素疫苗、细菌及类毒素疫苗、病毒性疫苗、蛋白疫苗、核酸疫苗病毒性疫苗、蛋白疫苗、核酸疫苗四大类。四大类。1 接种目的及作用l接种目的接种目的

2、 防止病原体进入机体防止病原体进入机体 建立抗感染免疫建立抗感染免疫l口服或注射疫苗口服或注射疫苗 激发宿主产生抗病原体的抗体激发宿主产生抗病原体的抗体 暴露于病原体也不会生病暴露于病原体也不会生病 进入机体的病原体被抗体失活进入机体的病原体被抗体失活2 疫苗的种类l 从疫苗研制技术又可将疫苗分为从疫苗研制技术又可将疫苗分为传统疫苗传统疫苗和和新新型疫苗型疫苗两大类。两大类。l2.1传统疫苗传统疫苗l 1）疫苗）疫苗 （1）活疫苗：减毒活疫苗（卡介苗）活疫苗：减毒活疫苗（卡介苗） （2）死疫苗（百日咳、霍乱等）死疫苗（百日咳、霍乱等）l 2）类毒素）类毒素 破伤风类毒素、白喉类毒素破伤风类毒素

3、、白喉类毒素2.2 新型疫苗新型疫苗l 1）亚单位疫苗）亚单位疫苗 一类保留病原体中有效免疫原成分，而除去无效成一类保留病原体中有效免疫原成分，而除去无效成分和有毒成分的疫苗。分和有毒成分的疫苗。 如：乙肝亚单位疫苗如：乙肝亚单位疫苗l 2）化学疫苗）化学疫苗 用化学方法提取病原体中有效免疫原成分制成的化用化学方法提取病原体中有效免疫原成分制成的化学纯疫苗，比亚单位疫苗更为简单。学纯疫苗，比亚单位疫苗更为简单。 如：肺炎链球菌荚膜多糖如：肺炎链球菌荚膜多糖l 3）多肽疫苗）多肽疫苗 人工合成的高免疫原性多肽片段制成的疫苗。人工合成的高免疫原性多肽片段制成的疫苗。 如：如： 乙型肝炎表面抗原的各

4、种合成肽段乙型肝炎表面抗原的各种合成肽段l 4）基因工程疫苗）基因工程疫苗 利用基因工程构建重组基因序列，表达免疫原性强、利用基因工程构建重组基因序列，表达免疫原性强、无毒性的多肽制成的疫苗。无毒性的多肽制成的疫苗。 如：乙型肝炎基因工程疫苗如：乙型肝炎基因工程疫苗l 5）DNA疫苗疫苗 用编码抗原基因制成的疫苗。用编码抗原基因制成的疫苗。 如流感病毒核蛋白如流感病毒核蛋白DNA疫苗疫苗l 通常也习惯地将通常也习惯地将遗传重组疫苗、合成肽疫苗和抗独特遗传重组疫苗、合成肽疫苗和抗独特型抗体疫苗型抗体疫苗包括在新型疫苗范畴。包括在新型疫苗范畴。 3 疫苗的基本成分、性质和特征l 3.1 疫苗的基本

5、成分疫苗的基本成分 疫苗的基本成分疫苗的基本成分包括包括抗原、佐剂、防腐剂、抗原、佐剂、防腐剂、稳定剂、灭活剂稳定剂、灭活剂及其他活性成分。及其他活性成分。 抗原抗原，是疫苗最主要的有效活性成分，它，是疫苗最主要的有效活性成分，它决定了疫苗的特异免疫原性。构成抗原的三个决定了疫苗的特异免疫原性。构成抗原的三个基本条件：基本条件：异物性异物性、特异性特异性和一定的和一定的理化特性理化特性。l 可用作抗原的生物活性物质可用作抗原的生物活性物质有：有：灭活病毒或细菌、灭活病毒或细菌、活病毒活病毒或细菌通过实验室多次传代得到的或细菌通过实验室多次传代得到的减毒株、减毒株、病毒或菌体提纯物、有效蛋白成分

6、、类毒素、细病毒或菌体提纯物、有效蛋白成分、类毒素、细菌多糖、合成多肽菌多糖、合成多肽以及近年来发展以及近年来发展DNA疫苗所用疫苗所用的的核酸核酸等。等。l 佐剂佐剂，能，能增强增强抗原的抗原的特异性免疫应答特异性免疫应答。目前常用。目前常用的有的有铝佐剂铝佐剂和和油制佐剂油制佐剂。l 3.2 疫苗的基本性质疫苗的基本性质 包括包括免疫原性、安全性、稳定性免疫原性、安全性、稳定性。l 免疫原性免疫原性：指疫苗接种进入机体后引起机体产生：指疫苗接种进入机体后引起机体产生免疫应答的强度和持续时间。免疫应答的强度和持续时间。l 影响的因素影响的因素包括机体的因素和疫苗的因素。从疫包括机体的因素和疫

7、苗的因素。从疫苗的角度看是由疫苗的抗原决定的。包括苗的角度看是由疫苗的抗原决定的。包括抗原的抗原的强弱、大小和稳定性以及抗原的理化性质强弱、大小和稳定性以及抗原的理化性质。4 疫苗制备的基本过程l 疫苗因种类不同，其制备方法也不相同，但总的来疫苗因种类不同，其制备方法也不相同，但总的来说，说，经典疫苗制备经典疫苗制备的基本过程包括：的基本过程包括：选择适宜的培选择适宜的培养基或细胞，进行菌、毒株大量繁殖，收集培养物，养基或细胞，进行菌、毒株大量繁殖，收集培养物，提纯，半成品检定，稀释，分装，成品检定提纯，半成品检定，稀释，分装，成品检定。l 基因工程技术使疫苗研制方法发生了革命性的变化。疫苗制

8、备工艺流程疫苗制备工艺流程l4.1 病毒类疫苗制造方法病毒类疫苗制造方法4.1.1毒种的选择和减毒毒种的选择和减毒l 毒株必须满足的条件毒株必须满足的条件l 抗原性抗原性l 典型形态，感染特定组织典型形态，感染特定组织l 人工繁殖，不产生毒素人工繁殖，不产生毒素l 无毒力回复无毒力回复 不被病毒感染不被病毒感染4.1.2 病毒繁殖病毒繁殖l （1）活体动物培养：牛痘）活体动物培养：牛痘 牛皮下，乙脑牛皮下，乙脑 鼠脑等。鼠脑等。l （2）鸡胚培养，较动物管理方便，易受支原体，）鸡胚培养，较动物管理方便，易受支原体，沙门菌污染。沙门菌污染。l （3）组织培养，广泛用于病毒培养。）组织培养，广泛用

9、于病毒培养。l （4）细胞培养。）细胞培养。培养细胞的生长方式及类型培养细胞的生长方式及类型l 贴附生长型细胞贴附生长型细胞l 为能附着于底物（支持物）表面生长的细胞。包括非淋巴为能附着于底物（支持物）表面生长的细胞。包括非淋巴组织的细胞和许多异倍体体系的细胞都属于这一类型。当组织的细胞和许多异倍体体系的细胞都属于这一类型。当这类细胞从活体体内转移到体外培养时，必须贴附于底物这类细胞从活体体内转移到体外培养时，必须贴附于底物才能生长。从形态上大体分为上皮细胞型和成纤维细胞型。才能生长。从形态上大体分为上皮细胞型和成纤维细胞型。VEGF929兔肾原代细胞l 悬浮生长型细胞悬浮生长型细胞l 少数细

10、胞类型在体外培养是不需要附着于底物而于悬浮状少数细胞类型在体外培养是不需要附着于底物而于悬浮状态下即可生长，来源于血液、淋巴组织的细胞，许多肿瘤态下即可生长，来源于血液、淋巴组织的细胞，许多肿瘤细胞（包括杂交瘤细胞）和某些转化细胞均属于这一类型。细胞（包括杂交瘤细胞）和某些转化细胞均属于这一类型。这些细胞在悬浮培养中生长良好，可以是单个细胞或细小这些细胞在悬浮培养中生长良好，可以是单个细胞或细小的细胞团，细胞呈圆形。细胞悬浮生长于培养基中，细胞的细胞团，细胞呈圆形。细胞悬浮生长于培养基中，细胞生长空间大，具有能够提供增殖生长空间大，具有能够提供增殖大量细胞、传代方便、易大量细胞、传代方便、易于

11、收获于收获的优点。的优点。SP20l 维持细胞培养所需的维持细胞培养所需的最佳条件最佳条件 在大规模培养动物细胞的过程中，最在大规模培养动物细胞的过程中，最根本的是使细胞的培养条件达到最优化，根本的是使细胞的培养条件达到最优化，尽可能消除或减轻环境对细胞的影响，维尽可能消除或减轻环境对细胞的影响，维持细胞持细胞高存活力高存活力和和高效表达高效表达，同时又要充，同时又要充分考虑细胞表达产物的后续纯化。分考虑细胞表达产物的后续纯化。l 配制细胞生长最适合的培养基配制细胞生长最适合的培养基 常用维持液和生长液常用维持液和生长液 Eagle、RPM1640,DEME等作为维持液，加入牛血清为等作为维持

12、液，加入牛血清为生长液。生长液。l 细胞培养环境细胞培养环境 影响细胞培养的主要因素有影响细胞培养的主要因素有:CO2、溶氧、溶氧(DO)、温度、温度、pH值、葡萄糖、氨、乳酸、甲基乙二醛值、葡萄糖、氨、乳酸、甲基乙二醛(MG)、培养基、培养基成分等。成分等。l细胞培养环境细胞培养环境l最适最适CO2水平为水平为4%10%，l溶氧维持在溶氧维持在20%50%，l温度大多数在温度大多数在37，lpH值在值在7.07.4之间。之间。l控制细菌污染，加入青霉素、链霉素控制细菌污染，加入青霉素、链霉素l培养时间培养时间24天。天。l葡萄糖是细胞培养过程中主要的能量来源，必须葡萄糖是细胞培养过程中主要的

13、能量来源，必须维持在一定水平。维持在一定水平。l4.1.3 疫苗的灭活疫苗的灭活l 原则：充分破坏疫苗的毒力，尽量减少疫苗免疫力损失。原则：充分破坏疫苗的毒力，尽量减少疫苗免疫力损失。l 含有大量动物组织的疫苗，含有大量动物组织的疫苗，0.20.4的甲醛或酚溶液；的甲醛或酚溶液；细胞培养的疫苗，细胞培养的疫苗，0.02-0.05甲醛甲醛l 灭活的温度和时间：生物学性质和热稳定性灭活的温度和时间：生物学性质和热稳定性l4.1.4 疫苗的纯化疫苗的纯化l 去除存在的动物组织，降低接种不良反应。去除存在的动物组织，降低接种不良反应。l4.1.5 冻干冻干l 升华，不使疫苗融解。疫苗稳定性提高升华，不

14、使疫苗融解。疫苗稳定性提高1倍以上。倍以上。乙型肝炎疫苗的制备l 乙型肝炎病毒（乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）属嗜肝属嗜肝DNA病病毒科（毒科（hepadnaviridae）。）。 l HBV的发现源于表面抗原的研究。的发现源于表面抗原的研究。 1963年年Blumberg首先在澳大利亚土著人血清中发现一种新抗原，称为澳大首先在澳大利亚土著人血清中发现一种新抗原，称为澳大利亚抗原（利亚抗原（Australia antigen）；直至）；直至1968年确定这种年确定这种抗原与血清型肝炎密切相关，称为肝炎相关抗原抗原与血清型肝炎密切相关，称为肝炎相关抗原（hepatit

15、is associated antigen，HAA）；）；1970年年D.S. Dane在肝炎患者血清中发现具有传染性的颗粒，即在肝炎患者血清中发现具有传染性的颗粒，即Dane颗粒（颗粒（Danes particle）。从而）。从而HBV被确认。被确认。l HBV是是乙型肝炎乙型肝炎病原体，主要经输血、注射、性行为病原体，主要经输血、注射、性行为和母婴传播。起病徐缓，部分患者可转为慢性，少数还可和母婴传播。起病徐缓，部分患者可转为慢性，少数还可导致肝硬化和肝癌。导致肝硬化和肝癌。乙肝病毒发病区域乙型肝炎病毒形态与结构形态与结构 完整的完整的HBV颗粒亦称颗粒亦称Dane颗粒，直径为颗粒，直径为

16、42nm，具有双层核壳结构：具有双层核壳结构：核心颗粒核心颗粒：直径为：直径为28nm。 颗粒内部：颗粒内部：DNA和和DNA多聚酶多聚酶。 颗粒表面（内衣壳）：含颗粒表面（内衣壳）：含有有HBcAg 和和HBeAg 。外壳（包膜）外壳（包膜）：厚：厚7nm。 脂质双层：含有脂质双层：含有HBsAg、PHSAr 和和PreSAg蛋白质蛋白质乙肝病毒传染途径乙肝病毒检测HBV感染血清标志及其临床意义感染血清标志及其临床意义HBsAgHBeAg抗抗HBc 抗抗HBe抗抗HBs结结 果果 解解 释释IgMIgG-+感染过感染过HBV或接种过乙肝疫苗或接种过乙肝疫苗,有免疫力有免疫力+-/+-肝功正常

17、为无症状携带者肝功正常为无症状携带者;肝功肝功异常为正患乙肝异常为正患乙肝;+-+-（小三阳）正患乙肝（小三阳）正患乙肝,肝炎趋向肝炎趋向好转，有传染性好转，有传染性+/-+-正患肝炎正患肝炎,或趋于恢复，有传染或趋于恢复，有传染性性+/-（大三阳）正患乙肝（大三阳）正患乙肝,病毒复制病毒复制,传染性强传染性强-+/-+乙型肝炎恢复期乙型肝炎恢复期乙肝疫苗的制备血源疫苗乙肝疫苗的制备血源疫苗 特点特点: (1)血源取得困难血源取得困难; (2)疫苗需经安全试验疫苗需经安全试验,故费用大故费用大,生产周期达生产周期达65周周. (3)现已淘汰。现已淘汰。乙肝疫苗的制备人工合成多肽疫苗乙肝疫苗的制

18、备人工合成多肽疫苗l 工艺过程工艺过程:人工合成人工合成HBsAg的的P25多肽多肽,并在并在124与与137位半胱氨酸残基之间引入位半胱氨酸残基之间引入-S-S-,使成环状多肽使成环状多肽,用其免疫动物后用其免疫动物后,50%出现抗体应答。出现抗体应答。l 特点特点:纯净纯净,不会污染其他病毒不会污染其他病毒,无传染性无传染性,原材料来原材料来源方便源方便,但目前生产成本高但目前生产成本高,难以大量生产。难以大量生产。乙肝疫苗的制备基因工程疫苗乙肝疫苗的制备基因工程疫苗工艺路线工艺路线:l(1) 将将HBV的的DNA片段插入到质粒并引入片段插入到质粒并引入到到E.coli中中,使其复制表达抗

19、原物质。使其复制表达抗原物质。l(2) 将将HBV的的DNA片段插入到牛痘病毒片段插入到牛痘病毒,再再由此病毒重组体感染细胞由此病毒重组体感染细胞,可分泌可分泌HBsAg。l(3)用一含用一含HbsAg的质粒转化中国仓鼠卵巢的质粒转化中国仓鼠卵巢细胞细胞(CHO),在该细胞中表达在该细胞中表达HbsAg蛋白蛋白,释释放于培养液中放于培养液中,从培养液中提纯抗原蛋白。从培养液中提纯抗原蛋白。 目前大规模生产的表达系统有酿酒酵母、目前大规模生产的表达系统有酿酒酵母、毕赤酵母和汉逊酵母等基因工程疫苗，其毕赤酵母和汉逊酵母等基因工程疫苗，其次为次为CHO细胞基因工程疫苗，还有细胞基因工程疫苗，还有HB

20、sAg+PreS2或或HBsAg+PreS1+ PreS2（CHO细胞和酵母表达系统）。细胞和酵母表达系统）。4.2 细菌类疫苗和类毒素的一般制造方法细菌类疫苗和类毒素的一般制造方法l细菌类疫苗和类毒素均由细菌培养开始，细菌类疫苗和类毒素均由细菌培养开始， 制备的主要程序相似。制备的主要程序相似。 细菌类疫苗对菌体进一步加工细菌类疫苗对菌体进一步加工 类毒素对细菌分泌的外毒素加工类毒素对细菌分泌的外毒素加工疫苗和类毒素制备工艺流程4.2.1 菌种的选择菌种的选择l 抗原性抗原性l 典型形态，培养特性和理化特性典型形态，培养特性和理化特性l 易于在人工培养基上培养易于在人工培养基上培养l 培养过

21、程中毒性小或无毒力回复培养过程中毒性小或无毒力回复l 制备类毒素时，在培养过程中产生大量的制备类毒素时，在培养过程中产生大量的典型毒素典型毒素l 4.2.2培养基的营养要求培养基的营养要求l碳、氮源和无机盐等必需外，有时需添加生长因子。碳、氮源和无机盐等必需外，有时需添加生长因子。l结核杆菌以甘油为碳源，百日咳杆菌需要谷氨酸，胱氨结核杆菌以甘油为碳源，百日咳杆菌需要谷氨酸，胱氨酸为氮源。酸为氮源。l 4.2.3 培养条件控制培养条件控制 氧分压、温度、氧分压、温度、pH、避光、渗透压、避光、渗透压l 4.2.4 杀菌杀菌l彻底杀死细菌不影响防病效力彻底杀死细菌不影响防病效力l 4.2.5 稀释

22、、分装和冻干稀释、分装和冻干l含防腐剂的含防腐剂的NS稀释，无菌分装。稀释，无菌分装。卡介苗疫苗生产工艺卡介苗疫苗生产工艺l1.简介：简介：l牛型结核杆菌牛型结核杆菌l卡默德和介兰经历卡默德和介兰经历13年获得减毒株年获得减毒株l2.制备工艺制备工艺l表面培养表面培养l培养温度培养温度37-39，时间，时间10-12d,生产的卡生产的卡介苗活力高，用培养介苗活力高，用培养6-8d的幼龄苗，有利的幼龄苗，有利于制备冻干品。于制备冻干品。白喉疫苗的生产工艺白喉疫苗的生产工艺l1.简介简介l1923年年Roman制得白喉毒素的类毒素制得白喉毒素的类毒素l2.生产工艺生产工艺l菌种：高效价毒素，菌种：

23、高效价毒素，1896年分离的年分离的Pw8l培养产毒培养产毒l产毒培养基：胰酶牛肉消化液培养基产毒培养基：胰酶牛肉消化液培养基l培养：深层培养法，温度，培养：深层培养法，温度，pH，碳源，碳源l脱毒脱毒 l毒素经甲醛加温处理后，去除毒性而保留毒素经甲醛加温处理后，去除毒性而保留其抗原性，形成其抗原性，形成类毒素类毒素l温度、温度、pH、甲醛浓度及毒素自身的影响、甲醛浓度及毒素自身的影响l脱毒后精制和精制后脱毒脱毒后精制和精制后脱毒la.原制毒素脱毒原制毒素脱毒l质量稳定，毒素逆转现象少；但含有大量质量稳定，毒素逆转现象少；但含有大量培养基残留物质，进一步提纯有困难，脱培养基残留物质，进一步提纯

24、有困难，脱毒体积大，不利于操作。毒体积大，不利于操作。lb.精制毒素脱毒精制毒素脱毒l脱毒体积小，工艺紧凑利于操作，且可获脱毒体积小，工艺紧凑利于操作，且可获得高纯度制品。但易发生毒性逆转现象。得高纯度制品。但易发生毒性逆转现象。l白喉类毒素的精制白喉类毒素的精制l去除细菌代谢的产物及培养基中残留的有去除细菌代谢的产物及培养基中残留的有机物、无机盐等非特异性杂质，提高白喉机物、无机盐等非特异性杂质，提高白喉类毒素的纯度，降低接种副反应。类毒素的纯度，降低接种副反应。l活性炭、硫酸铵分段沉淀法活性炭、硫酸铵分段沉淀法5核酸疫苗核酸疫苗l概念概念l 它是利用基因重组技术直接将编码某种抗原蛋白它是利

25、用基因重组技术直接将编码某种抗原蛋白的的外源基因外源基因（DNA）与）与质粒重组质粒重组后，直接导入后，直接导入动动物细胞物细胞内，并通过宿主细胞的内，并通过宿主细胞的转录系统转录系统合成抗原合成抗原蛋白，诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答，蛋白，诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。以达到预防和治疗疾病的目的。发展历史l 1990年年Wolff等偶然发现给小鼠肌肉注射外源性重组质粒等偶然发现给小鼠肌肉注射外源性重组质粒后，质粒被摄取并能在体内至少两个月稳定地表达所编码后，质粒被摄取并能在体内至少两个月稳定地表达所编码蛋白。蛋白。l 1991年年Willams等发现外

26、源基因输入体内的表达产物可诱等发现外源基因输入体内的表达产物可诱导产生免疫应答。导产生免疫应答。l 1992年年Tang等将表达人生长激素基因的质粒等将表达人生长激素基因的质粒DNA导入小导入小鼠皮内，小鼠产生特异性抗体，从而提出了基因免疫的概鼠皮内，小鼠产生特异性抗体，从而提出了基因免疫的概念。念。l 1993年年Ulmer等证实小鼠肌肉注射含有编码甲型流感病毒等证实小鼠肌肉注射含有编码甲型流感病毒核蛋白（核蛋白（NP）的重组质粒后，可有效地保护小鼠抗不同）的重组质粒后，可有效地保护小鼠抗不同亚型、分离时间相隔亚型、分离时间相隔34年的流感病毒的攻击。随后的大量年的流感病毒的攻击。随后的大量

27、动物实验都说明在合适的条件下，动物实验都说明在合适的条件下，DNA接种后既能产生细接种后既能产生细胞免疫又能引起体液免疫。胞免疫又能引起体液免疫。l 1994年在年在日内瓦日内瓦召开的专题会议上将这种疫苗定名为核召开的专题会议上将这种疫苗定名为核酸疫苗。核酸疫苗的出现与发展是疫苗发展史上的酸疫苗。核酸疫苗的出现与发展是疫苗发展史上的第三次第三次革命革命。核酸疫苗的制备核酸疫苗的制备l核酸疫苗的构建核酸疫苗的构建l工程菌的发酵：深层液体培养工程菌的发酵：深层液体培养l菌体细胞的收集和细菌裂解菌体细胞的收集和细菌裂解l菌体收集：离心菌体收集：离心l细菌裂解：煮沸法、细菌裂解：煮沸法、SDS裂解法等

28、裂解法等l质粒的初步抽提质粒的初步抽提l变性后成为单链环状变性后成为单链环状DNA,将溶液的将溶液的pH调回调回中性时，容易复性并溶于液相中性时，容易复性并溶于液相l质粒质粒DNA的纯化的纯化l去除细胞碎片、蛋白质、脂类物质和去除细胞碎片、蛋白质、脂类物质和RNAl质粒的浓缩：乙醇沉淀质粒的浓缩：乙醇沉淀l核酸疫苗的质量监控核酸疫苗的质量监控l浓度测定浓度测定l纯度测定纯度测定l限制性内切酶图谱分析限制性内切酶图谱分析l影响核酸疫苗效果的主要因素影响核酸疫苗效果的主要因素l质粒载体的骨架结构质粒载体的骨架结构l给药剂量和导入细胞的效率给药剂量和导入细胞的效率l抗原蛋白在宿主细胞的表达效率抗原蛋白在宿主细胞的表达效率l免疫次数、注射方式和给药途径免疫次数、注射方式和给药途径l核酸疫苗的接种方法核酸疫苗的接种方法l直接注射法直接注射法l基因枪轰击法基因枪轰击法l细菌或病毒携带法细菌或病毒携带法l口服、滴鼻或喷鼻法口服、滴鼻或喷鼻法muscleDNA疫苗表达抗原VIII III IV12gene(DNA)RNAantigen(protein)u基因指导其编码抗原的产生u抗原激活免疫反应%产生抗体%细胞免疫DNA疫苗特性u表达病毒抗原的抗原性与观察的自然感染相类似u有效激发CD8+ ，CTLs