油菜育种 杂优利用

1、油菜杂种优势利用油菜杂种优势利用油菜杂种优势表现油菜杂种优势表现 甘蓝型油菜和芥菜型油菜的杂种一代在种子产甘蓝型油菜和芥菜型油菜的杂种一代在种子产量上一般比亲本高量上一般比亲本高20%20%30%30%，高的增产一倍以，高的增产一倍以上，白菜型油菜增产上，白菜型油菜增产20%20%左右，高的增产一倍以左右，高的增产一倍以上。某些组合含油量也超过亲本。上。某些组合含油量也超过亲本。 油菜杂种一代生活力强，长势旺盛，叶片数多，油菜杂种一代生活力强，长势旺盛，叶片数多，叶功能期长，叶面积大，叶肉组织厚，叶色浓叶功能期长，叶面积大，叶肉组织厚，叶色浓绿，叶绿素含量高，光合能力和根系活力强，绿，叶绿素含

2、量高，光合能力和根系活力强，体内养分积累多，干物质重增多，这些生理功体内养分积累多，干物质重增多，这些生理功能增强最终在经济性状反映为单株角果数明显能增强最终在经济性状反映为单株角果数明显增加。增加。 杂种优势机理研究杂种优势机理研究 Cy3（亲本） Cy5（杂种） 华杂6号与8068A杂交重叠图谱（杂种上调表达为红色，下调表达为绿色，等量表达为黄色）华杂6号与8086A杂交荧光值散点图华杂6号与7-5R杂交重叠图谱（杂种上调表达为红色，下调表达为绿色，等量表达为黄色）华杂6号与7-5R杂交荧光值散点图 Cy5（杂种） Cy3 （亲本）主要结果主要结果 在华杂在华杂6 6号与母本号与母本808

3、6A8086A间的差异表达转录本中有间的差异表达转录本中有4545个个上调表达，上调表达，7373个下调表达个下调表达 华杂华杂6 6号与父本号与父本7-5R7-5R间的差异表达转录本中有间的差异表达转录本中有105105个上个上调表达，调表达，126126个下调表达个下调表达 这些差异表达转录本包括代谢、复制、转录、这些差异表达转录本包括代谢、复制、转录、翻译、翻译、 信号转导、转运、疾病防御等相关基信号转导、转运、疾病防御等相关基因，其中代谢相关基因数量最多因，其中代谢相关基因数量最多 在杂种中，来自父本的差异表达转录本几乎是在杂种中，来自父本的差异表达转录本几乎是母本的两倍母本的两倍油菜

4、杂种优势利用的特点油菜杂种优势利用的特点 油菜花期长（约油菜花期长（约3030天），花龄长（天），花龄长（3 35 5天），天），花器外露，有利于父、母本花期相遇和传粉结花器外露，有利于父、母本花期相遇和传粉结实，且油菜是无限花序，分枝性强，可通过分实，且油菜是无限花序，分枝性强，可通过分期播种或摘薹等措施，有效地调整父、母本花期播种或摘薹等措施，有效地调整父、母本花期，杂种制种技术容易掌握，制种产量高而稳期，杂种制种技术容易掌握，制种产量高而稳定，一般制种地单产达定，一般制种地单产达600600750750/hm/hm2 2。 油菜用种量少，繁殖系数高，达油菜用种量少，繁殖系数高，达2002

5、00500500，因，因而投入少，推广快。而投入少，推广快。 油菜杂种优势利用的主要途径油菜杂种优势利用的主要途径 细胞质雄性不育三系细胞质雄性不育三系细胞核雄性不育系细胞核雄性不育系自交不亲和系自交不亲和系化学杀雄化学杀雄甲烯蓝染色甲烯蓝染色鉴定油菜花粉活力鉴定油菜花粉活力 原理原理 具有活力的花粉有主动选择吸收或不吸具有活力的花粉有主动选择吸收或不吸收收“活性染料活性染料”的能力，它能够不吸收甲烯蓝的能力，它能够不吸收甲烯蓝等溶液而不着色；而死花粉则失去了这种能力，等溶液而不着色；而死花粉则失去了这种能力，甲烯蓝可以迅速渗入花粉而染色。根据花粉着甲烯蓝可以迅速渗入花粉而染色。根据花粉着色深

6、度可以判断花粉生活力状况。色深度可以判断花粉生活力状况。 方法方法 测定花粉活力时，先将花粉撒在载玻片测定花粉活力时，先将花粉撒在载玻片上，滴上，滴1 1滴蒸馏水，用解剖针尖将花粉轻轻搅滴蒸馏水，用解剖针尖将花粉轻轻搅匀，再滴甲烯蓝溶液（浓度为匀，再滴甲烯蓝溶液（浓度为1:60001:6000）1 1滴，滴，将花粉搅匀，静止将花粉搅匀，静止3-5min3-5min后，覆以盖玻片。染后，覆以盖玻片。染色后色后6 630min30min内在显微镜下观察。有生活力的内在显微镜下观察。有生活力的花粉不着色，死的花粉染成蓝绿色和蓝色。花粉不着色，死的花粉染成蓝绿色和蓝色。 人工授粉鉴定油菜花粉活力人工授

7、粉鉴定油菜花粉活力 去雄去雄 于受体植株花蕾开放前于受体植株花蕾开放前2424小时去雄。去雄总蕾数小时去雄。去雄总蕾数依需要而定，同时摘去已开放花朵、花药已变黄的大依需要而定，同时摘去已开放花朵、花药已变黄的大花蕾及顶部小蕾。去雄后套袋备用。如母本为雄性不花蕾及顶部小蕾。去雄后套袋备用。如母本为雄性不育则不必去雄，但如系微量花粉株，仍以去雄为妥。育则不必去雄，但如系微量花粉株，仍以去雄为妥。 取粉取粉 于授粉当天选取供粉植株上正在开放花朵的花粉于授粉当天选取供粉植株上正在开放花朵的花粉（或经储藏的花粉），为了防止花粉污染，供粉花序（或经储藏的花粉），为了防止花粉污染，供粉花序必须事先套袋。必须

8、事先套袋。 授粉授粉 将由供粉植株取下的已开裂的花药直接涂抹于母将由供粉植株取下的已开裂的花药直接涂抹于母本柱头上，也可用蜂棒粘取花粉进行授粉，然后套袋本柱头上，也可用蜂棒粘取花粉进行授粉，然后套袋防止污染。授粉最好在室内或在有屏障的条件下进行，防止污染。授粉最好在室内或在有屏障的条件下进行，防止气流传粉，造成误差。防止气流传粉，造成误差。 估算估算 统计母本授粉后的结角率与结实率。据此判断花统计母本授粉后的结角率与结实率。据此判断花粉生活力。粉生活力。 油油菜菜CMSCMS细细胞胞质质的的来来源源油菜主要油菜主要CMSCMS类型的特点类型的特点 类型类型/ /来源来源败育时期败育时期遗传方式

9、遗传方式育育 种种 利利 用用 polCMS/polCMS/自自发突变发突变造孢细胞造孢细胞分化期分化期1 1对显性基对显性基因控制因控制已三系配套，不育性受温度影响，好的保已三系配套，不育性受温度影响，好的保持系难找，恢复基因频率低，陕持系难找，恢复基因频率低，陕2A2A在遗传在遗传上属同一类型，但胞质有上属同一类型，但胞质有1 1碱基差异碱基差异oguCMS/oguCMS/属属间转育间转育四分体到四分体到单核小孢单核小孢子晚期子晚期1 1对来自萝对来自萝卜的显性卜的显性基因控制基因控制不育彻底，在低温下心叶黄化，蜜腺不发不育彻底，在低温下心叶黄化，蜜腺不发达，这些问题经原生质体融合改良已经

10、改达，这些问题经原生质体融合改良已经改良（良（INRA-oguCMSINRA-oguCMS），油菜中没有恢复基因，），油菜中没有恢复基因，萝卜恢复基因可通过属间杂交转育，且该萝卜恢复基因可通过属间杂交转育，且该基因已克隆，基因已克隆，kosCMSkosCMS属于同一类属于同一类tourCMS/tourCMS/种间转育种间转育造孢细胞造孢细胞分化期分化期 1 1个或个或2 2个个显性基因显性基因控制控制 不育性稳定，雌蕊育性低，甘蓝型油菜品不育性稳定，雌蕊育性低，甘蓝型油菜品种种 Yudal Yudal 和和MangunMangun中存在恢复基因，但恢中存在恢复基因，但恢复力不强复力不强MSL

11、(?)/MSL (?)/自发突变自发突变？对环境条件敏感，大多数推广品种都可作对环境条件敏感，大多数推广品种都可作恢复系，但保持系难以找到，只存在于特恢复系，但保持系难以找到，只存在于特定的细胞质遗传背景中。定的细胞质遗传背景中。第一个杂种油菜组合：秦油第一个杂种油菜组合：秦油2 2号号中油杂中油杂2 2号号中油杂中油杂2 2号选育号选育中双中双2 2号号双低双低100krad100kradr r射线处理射线处理M M2 2代选株自交代选株自交并与陕并与陕2A2A测交测交保持陕保持陕2A2A不育的植株不育的植株继续自交并与陕继续自交并与陕2A2A连续测交、回交连续测交、回交育成育成8908A8

12、908A和和B B陕陕2C2C恢复系恢复系227227双低、配合力高双低、配合力高F1F2选单株自交选单株自交并与陕并与陕2A2A测交测交单株种子分析品质单株种子分析品质恢复陕恢复陕2A2A育性的育性的植株自交并与陕植株自交并与陕2A2A连续测交到连续测交到F F6 6育成育成R2R2恢复系恢复系油菜双低同质恢复系油菜双低同质恢复系90-1579转育转育不育系陕不育系陕2A2A（S S）rfrfrfrf恢复系垦恢复系垦C1C1（N/SN/S）RfRfRfRf杂种杂种F F1 1秦油秦油2 2号号(S)Rfrf(S)Rfrf保持系保持系Tob-12Tob-12(N)rfrf(N)rfrf不育株不

13、育株(S)rfrf(S)rfrf淘汰淘汰可育株可育株（S S）RfrfRfrfTob-12Tob-12(N)rfrf(N)rfrf选可育株再回交一代，再选可育株再回交一代，再自交自交2 2代，育成双低同质代，育成双低同质恢复系恢复系90-157990-1579华油杂华油杂6号号 亲本组合：亲本组合：8086A7-5R 品种特点：品种特点： o 产量高产量高 o 品质优品质优 o 抗倒伏性强抗倒伏性强 o 早熟早熟油菜油菜NMSNMS类型类型 油菜油菜NMSNMS显性显性NMSNMS隐性隐性NMSNMS显性单基因显性单基因NMSNMS，如如JanpolJanpol显性上位互作显性上位互作NMSN

14、MS，如宜如宜3A3A隐性单基因隐性单基因NMSNMS双隐性重叠互作双隐性重叠互作NMSNMS，如如S45AS45A显性上位互作核不育杂交制种原理显性上位互作核不育杂交制种原理纯合两型系杂交制种模式纯合两型系杂交制种模式制种Ms_Ms_RfRfRfRf或或msmsmsmsRfRfRfRf恢复系恢复系Ms_Ms_RfrfRfrfF F1 1, , 全可育全可育MsMsMsMsrfrfrfrf( (不不育株育株) )系内兄妹交MsMsMsMsRfrfRfrf( (可可育株育株) )MsMsMsMsRfrfRfrf( (可可育株育株50%)50%)MsMsMsMsrfrfrfrf( (不不育株育株5

15、0%)50%)繁殖区繁殖区制种区制种区显性上位显性上位NMS纯合型不育系、临保系和恢复系选育纯合型不育系、临保系和恢复系选育 RS1046AB X 优良品种（系） 1/2(MsMsrfrf)+1/2（MsMsRfrf) (msmsrfrf) F1 X 优良品种（系）1/2(Msmsrfrf) + 1/2(MsmsRfrf) (msmsrfrf) 1/4(msmsRfrf) +1/4(msmsrfrf) BC1 X 优良品种（系） +1/4(Msmsrfrf) +1/4(MsmsRfrf) (msmsrfrf) 1/4(MsmsRfrf) BC2 自交 BC2F2 恢复系 纯合型不育系 临保系(

16、MsMsRfRf)或（msmsRfRf) (MsMsrfrf)+(MsMsRfrf) (msmsrfrf)显性上位互作核不育杂交制种原理显性上位互作核不育杂交制种原理杂合两型系杂交制种模式杂合两型系杂交制种模式制种Ms_Ms_RfRfRfRf或或msmsmsmsRfRfRfRf恢复系恢复系Ms_Ms_RfrfRfrf或或msmsmsmsRfrfRfrfF F1 1, , 全可育全可育MsmsMsmsrfrfrfrf( (不不育株育株) )系内兄妹交msmsmsmsrfrfrfrf( (可可育株育株) )msmsmsmsrfrfrfrf( (可可育株育株50%)50%)MsmsMsmsrfrfr

17、frf( (不不育株育株50%)50%)繁殖区繁殖区制种区制种区隐性细胞核雄性不育三系杂种生产模式隐性细胞核雄性不育三系杂种生产模式 不育系 1/2（msmsmsmsSpSp) x 1/2(MsmsmsmsSpSp) 不育系 x 临保系1/2(msmsmsmsSpSp) (msmsmsmsspsp)+1/2(MsmsmsmsSPSP) 不育F1 x 恢复系 （msmsmsmsSpsp) (MsMs_ _spsp)或 （_ _MsMsSpSp) 杂种F1 1/2(Msms_ _Spsp)+1/2(Msms_ _spsp) 或1/2（_ _MsmsSpsp)+1/2(_ _MsmsSpSp)隐性G

18、MS临保系的选育优良RGCMS不育系x(msmsmsmsspsp)1/2(MsmsmsmsSpSp)BC1 1/4 msmsmsmsSpsp1/2(MsmsmsmsSpSp)F1(msmsmsmsSpsp)xxBC2 1/4 MsmsmsmsSpspBC2F2 1/16 msmsmsmsspsp (F)自交1/2(MsmsmsmsSpSp)+ 1/2 (msmsmsmsSpSp)临保系基因工程显性核不育杂交制种基因工程显性核不育杂交制种转基因雄性不育植株转基因雄性不育植株转基因雄性不育三系转基因雄性不育三系 A A系系 雄性不育系（转不育基因的湘油雄性不育系（转不育基因的湘油1515号，号，具

19、有具有S S显性不育基因，且与抗除草剂基因显性不育基因，且与抗除草剂基因H H紧紧密连锁）密连锁） AA系系 保持系（未转不育基因的湘油保持系（未转不育基因的湘油1515号，号，且无抗除草剂基因，表现可育）且无抗除草剂基因，表现可育） B B系系 恢复系（具有显性基因恢复系（具有显性基因R+HR+H，雄性可育），雄性可育）转基因杂交油菜繁殖、制种原理转基因杂交油菜繁殖、制种原理A(SsHhrr) A(sshhrr)A(sshhrr)雄性可育，雄性可育，50%不抗草胺膦，杀死不抗草胺膦，杀死A(SsHhrr)雄性不育，雄性不育，50%抗草胺膦抗草胺膦B(RRHHss)雄性可育，雄性可育，100%

20、抗草胺膦抗草胺膦F1(ssHhRr, SsHHRr) 100%雄性可育，抗草胺膦雄性可育，抗草胺膦不育系繁殖不育系繁殖杂交制种杂交制种白菜型油菜自交不亲和基因克隆白菜型油菜自交不亲和基因克隆材料名称材料名称自交亲和反应自交亲和反应青海大黄青海大黄SCSC黄籽沙逊黄籽沙逊SCSC关中油白菜关中油白菜SISI 芸薹属自交不亲和芸薹属自交不亲和S S位点结构位点结构SCRSCR是一种分泌性亲水蛋白质，仅在花粉中表达是一种分泌性亲水蛋白质，仅在花粉中表达SCRSCR位于位于SRKSRK和和SLGSLG之间，转录方向并不一致之间，转录方向并不一致(Kachroo (Kachroo et alet al，

21、2002)2002) SLG SCR SRK Class I SRK SCR SLG Class II 白菜型油菜白菜型油菜SISI位点位点基因的克隆基因的克隆 利用同源序列法和利用同源序列法和PCR步行法克隆步行法克隆SLG和和SRK 1,黄籽沙逊2,青海大黄3,关中油白菜1,青海大黄2,关中油白菜3,黄籽沙逊D,DraI ;P-PvuII CK1,AP2 primerCK2,GSP2 白菜型油菜白菜型油菜S-S-locuslocus基因的克隆基因的克隆SLG 和eSRK基因的序列：基因的序列： 青海大黄， SLG为882 bp，gi|38046365|gb|AY448026.1|38046

22、365； eSRK为1495 bp，gi|38046363|gb|AY448025.1|38046363； 关中油白菜，SLG为882 bp，gi|38046373|gb|AY448030.1|38046373； eSRK为1727 bp，gi|38046371|gb|AY448029.1|38046371； 黄籽沙逊， SLG为882 bp，gi|38046369|gb|AY448028.1|38046369； eSRK为1494 bp，gi|38046367|gb|AY448027.1|38046367；SLG 和eSRK基因基因BLAST ： 青海大黄和黄籽沙逊的青海大黄和黄籽沙逊的SL

23、GSLG基因与甘蓝的基因与甘蓝的SLGSLG、白菜型油菜的、白菜型油菜的SLGSLG基因的基因的同源性很高；同源性很高； 关中油白菜的关中油白菜的SLG SLG 基因与甘蓝型油菜的基因与甘蓝型油菜的SLGSLG-4-4、白菜型油菜的、白菜型油菜的SLG SLG 8 8和和SLGSLG基因的同源性较高；基因的同源性较高； 青海大黄和黄籽沙逊的青海大黄和黄籽沙逊的eSRKeSRK基因与白菜型油菜的基因与白菜型油菜的SRKSRK3535、SRKSRK3737基因及基因及甘蓝的甘蓝的SLGSLG和和 SRKSRK6060基因具有很高的同源性；关中油白菜的基因具有很高的同源性；关中油白菜的eSRKeSR

24、K基因与基因与甘蓝的甘蓝的SRKSRK6060、SRKSRK2929及白菜型油菜的及白菜型油菜的SRKSRK1212、SRKSRK3737基因的同源性较高基因的同源性较高； S S-locus-locus基因的亲缘关系分析基因的亲缘关系分析 青海大黄青海大黄和和黄籽沙逊黄籽沙逊的的SRKSRK、SLGSLG基因的亲缘关系很近，可基因的亲缘关系很近，可能具有共同的起源能具有共同的起源 关中油白菜关中油白菜的的SLG SLG 基因与甘基因与甘蓝型油菜的蓝型油菜的SLG SLG T T2 2、白菜型油菜的白菜型油菜的SLG SLG D85216D85216亲缘关系较近，与其它亲缘关系较近，与其它SL

25、GSLG亲缘关系较远亲缘关系较远关中油白菜关中油白菜的的SRKSRK基因与其它基因与其它的的SRKSRK基因亲缘关系较远基因亲缘关系较远 B.turnip SLG9 B.rapa SLG9 B.rapa SRK9-a B.rapa SRK9-b B.campestris BcRK3 B.oleracea SLG3 B.campestris SRK45 B.oleracea SRK3 B.napus SRK T2 B.oleracea SRK6 B.rapa BcRK6 B.oleracea SLG-BS29 B.oleracea SLG-SLR B.napus Westar SLR B.cam

26、pestris SLG2 B.rapa SRK22 B.insularis SLR1 B.oleracea SLR1 B.campestris SLG27 B.campestris SLG38 B.oleracea SRK15 B.oleracea SRK5 B.oleracea SLG-Bj B.oleracea SLG-Bh B.oleracea SLG-Bl B.oleracea SLG-B B.napus SLG type II B.rapa SLG29 B.oleracea SLG-Sc B.alboglabra SRK29 B.campestris SRK12 B.oleracea

27、 SRK29 B.rapa-SRK29 B.oleracea SRK2-b B.oleracea SRK23 B.oleracea SRK18 B.oleracea SRK60 B.oleracea SRK B.campestris Qinghuang SRK B.campestris Yellow saeson SRK B.campestris SRK8 B.campestris SLG D85224 B.napus SLG4 B.campestris SLG8 D86648 B.campestris SLG8 X55274 B.napus SLG T2 B.campestris SLG D

28、85216 B.campestris Guanyou SLG B.rapa SRK35 B.campestris SLG D85220 B.rapa SRK37 B.campestris Qinghuang SLG B.campestris Yellow sarson SLG B.campestris Guanyou SRK B.oleracea SLG D8520510010010097100100100100100100100100871001001001001001001001001001001001009986595951608510010010098526810097100油菜自交不

29、亲和性及其测定方法油菜自交不亲和性及其测定方法自交不亲和性（自交不亲和性（self incompatibility, SIself incompatibility, SI）是指具有是指具有相同基因型的植株的花粉和雌配子不能结合形成合子相同基因型的植株的花粉和雌配子不能结合形成合子的现象。的现象。SISI判断方法判断方法 1.1.苯胺蓝荧光染色苯胺蓝荧光染色 在授粉在授粉2424小时后进行花粉管计数，小时后进行花粉管计数，每一花柱中花粉管每一花柱中花粉管不到不到5 5条条 2.2.亲和指数亲和指数 授粉授粉7 71010天后或成熟时考察套袋自交亲天后或成熟时考察套袋自交亲和指数，自交亲和指数和指

30、数，自交亲和指数小于小于1 1( (变幅在变幅在0.50.52 2之间之间，与，与植物每一角果的种子数和要求的杂交种子纯度有关植物每一角果的种子数和要求的杂交种子纯度有关) )育种上以套袋自交育种上以套袋自交亲和指数亲和指数较为实用。较为实用。 自自交交不不亲亲和和的的遗遗传传自交不亲和反应的识别过程自交不亲和反应的识别过程Recognition of self pollen in BrassicaDixit and Nasrallah (2001) Plant Physiol. 125:105nAllele specific interaction between the SCR gene

31、product in pollen coatnActivation of signalling pathwaynBlock in pollen hydration and germination自交不亲和系的选育自交不亲和系的选育对自交不亲和系的要求对自交不亲和系的要求 具备良好的经济性状和高的配合力具备良好的经济性状和高的配合力 高度的系内花期株间交配和高度的系内花期株间交配和SISI性性 稳定的花期稳定的花期SISI性性 容易繁殖容易繁殖 自交不亲和系的选育自交不亲和系的选育1.1.从群体中选大量单株进行两种自交处理从群体中选大量单株进行两种自交处理 花期套袋自交，以测定其自交亲和性。花期

32、套袋自交，以测定其自交亲和性。先在开花前选株套先在开花前选株套袋，待主花序开花袋，待主花序开花10102020朵时，取下纸袋，进行人工辅助授朵时，取下纸袋，进行人工辅助授粉自交，套回纸袋，并标记授粉日期及自交花朵数。粉自交，套回纸袋，并标记授粉日期及自交花朵数。 蕾期剥蕾自交，获得自交种子，以供继续选育之用蕾期剥蕾自交，获得自交种子，以供继续选育之用。套袋。套袋自交自交10101515天后，能大致鉴别自交结实情况时，选自交结实天后，能大致鉴别自交结实情况时，选自交结实差（亲和指数低于差（亲和指数低于1 1，早期世代可适当放宽到，早期世代可适当放宽到2 2）的单株，取）的单株，取其下部分枝剥蕾自

33、交。其下部分枝剥蕾自交。2.2.连续自交和选择连续自交和选择4 46 6代以上，直至代以上，直至SISI系全部性状都系全部性状都趋于稳定为止。趋于稳定为止。3. 3. 在后期世代当选的在后期世代当选的SISI单株需相互授粉进行兄妹交，单株需相互授粉进行兄妹交，兄妹交的亲和指数也在兄妹交的亲和指数也在1 1以下，即可认为已育成稳定以下，即可认为已育成稳定的的SISI系。系。自自交交不不亲亲和和系系选选育育过过程程一切阻碍识别物质合成、破坏识别物质存在和干扰识别过程的方法一切阻碍识别物质合成、破坏识别物质存在和干扰识别过程的方法 剥蕾授粉剥蕾授粉 选开花前选开花前3 36 6天的中等大小花蕾剥蕾授

34、粉天的中等大小花蕾剥蕾授粉。剥蕾授粉剥蕾授粉费工费时，费工费时， 成本较高，技术要求也较严格，因此一般在成本较高，技术要求也较严格，因此一般在SISI系选育时才应系选育时才应用。用。喷施食盐水喷施食盐水 在在SISI系花期每隔系花期每隔3 35 5天将天将5%5%10%10%的食盐水喷在花的食盐水喷在花朵上，朵上，即可使乳突细胞的细胞壁皱缩，增加花粉在柱头表面的粘附和花即可使乳突细胞的细胞壁皱缩，增加花粉在柱头表面的粘附和花粉萌发，同时抑制胼胝质合成，减少不亲和花粉管生长的障碍，从而能有粉萌发，同时抑制胼胝质合成，减少不亲和花粉管生长的障碍，从而能有效地繁殖效地繁殖SISI系。系。COCO2

35、2处理处理 将将SISI系花期植株定期地置于含系花期植株定期地置于含3%3%5%CO5%CO2 2的密闭室内或的密闭室内或袋内处理一定时间（袋内处理一定时间（2 26 6小时），小时），改变柱头和花粉的生理代谢，促改变柱头和花粉的生理代谢，促进花粉与柱头粘附、花粉萌发和花粉管生长，抑制胼胝质形成，克服进花粉与柱头粘附、花粉萌发和花粉管生长，抑制胼胝质形成，克服SISI性性表达，实现表达，实现SISI系繁殖的目的。系繁殖的目的。SISI保持系法保持系法 SISI系与系与SISI系或系或SCSC系杂交后，杂种系杂交后，杂种F F1 1仍然自交不亲和仍然自交不亲和，因而可以用这种因而可以用这种SIS

36、I系或系或SCSC系作为系作为SISI保持系，使保持系，使SISI系得到连续繁殖系得到连续繁殖。自交不亲和系的繁殖方法自交不亲和系的繁殖方法单交种单交种 利用利用SISI系系SCSC配制杂种一代配制杂种一代，如，如SCSC对对SISI为显性，则为显性，则F F1 1植植株全部自交亲和。株全部自交亲和。三交种三交种( (三种方式三种方式) )（显性（显性SISI系系SISI系的近等系的近等SCSC系）系）F F1 1SCSC系（具有高配系（具有高配合力）生产三交杂种合力）生产三交杂种F F1 1 （ 50%50%植株植株SCSC，50%50%植株植株SISI）。）。( (隐性隐性SISIA A系系隐性隐性SISIB B系系) F) F1 1 (SI) (SI) SCSC系（具有高配系（具有高配合力）生产三交杂种合力）生产三交杂种F F1 1 ( (全部植株全部植株SC)SC)。a.a. (SI(SI系系SISI保持系保持系) F) F1 1(SI) (SI) SISI恢复系生产恢复系生产SCSC三交杂三交杂种。种。SISI保持系既可是保持系既可是SISI系，也可是系，也可是SCSC系。系。SCSC系作保系作保持系比持系比SISI系作保持系三交杂种系作保持系三交杂种F F1 1结实率更高。结实率更高。自交不亲和系杂交