柴胡检验标准操作规程

1、柴胡检验标准操作规程文件编码：S0P-QC-ZJ-3013-02 题 目 柴胡检验标准操作规程制定部门：质量检验中心颁发部门：质量管理部分发部门：质量管理部、质量检验中心制定人： 日期: 年 月 日 审核人： 日期: 年 月 日批准人： 日期： 年 月 日生效日期: 年 月 日变更历史：1.2003年3月制定； 2.2005年7月执行中国药典2005年版第一次修订； 3.2010年10月执行中国药典2010年版第二次修订。 目 的：建立柴胡检验标准操作规程。规范检验操作，确保柴胡质量。适用范围：适用于柴胡的检验。责 任 者：质量管理部经理、质检中心主任、质量检验员。内 容： 1品名：柴胡 2取

2、样：按药材和饮片取样标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6065）取样 3检验依据：柴胡内控质量标准（STP-QS-ZJ-3124）4性状 4.1北柴胡：取本品，在明亮处用肉眼观察，呈圆柱形或长圆锥形，尺量，长615cm，直径 0.30.8cm，根头膨大，顶端残留315个茎基或短纤维状叶基，下部分枝。表面黑褐色或浅棕色，具体纵皱纹、支根痕及皮孔。质硬而韧，不易折断，断面显纤维性，皮部浅棕色，木部黄白色。气微香，味微苦。4.2南柴胡：取本品，在明亮处用肉眼观察，根较细，圆锥形，顶端有多数细毛状枯叶纤维，下部多不分枝或稍分枝。表面红棕色或显黑棕色，靠近根头处多具细密环纹。质稍软，易折断，断面略平坦，

3、不显纤维性。具败油气。 5 鉴别 5.1 仪器：超声波清洗机、电子天平、薄层喷雾气压泵、三用紫外分析仪 5.2试剂与试液 5.2.1 试剂：甲醇、乙酸乙酯、乙醇。 5.2.2试液2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液：量取28.8ml98%浓硫酸，缓缓加入77ml水中，边加边搅拌，放冷后即为40%硫酸溶液；再将称取的2g对二氨基苯甲醛加入，搅拌使溶解成100ml即得。5.3对照品与对照药材：柴胡皂苷a对照品、柴胡皂苷d对照品、柴胡对照药材5.4操作方法5.4.1取本品粉末0.5g，置50ml具塞锥形瓶中加甲醇20 ml，密塞，超声处理10分钟，滤过，滤液置蒸发皿中浓缩至约5ml，作为供试品溶液。

4、另取北柴胡对照药材0.5g，置50ml具塞锥形瓶中加甲醇20 ml，密塞，超声处理10分钟，滤过，滤液置蒸发皿中浓缩至约5ml，同法制成对照药材溶液。再取柴胡皂苷a、柴胡皂苷d对照品，加甲醇制成每1 ml各含0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液。按薄层色谱法标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6039）试验，吸取上述三种溶液各5µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（8：2：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液，置已升温至60电热恒温烘箱中，加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在对照药材和对照品

5、色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。6检查6.1水分：按水分测定法标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6020）烘干法测定，不得过10.0%。6.1.1仪器：鼓风电热恒温干燥箱、电子天平。6.1.2操作方法：接通电子天平电源，启动电子天平，使电子天平预热30分钟。取洁净的称量瓶，置烘箱内100105干燥5小时，取出，置干燥器中室温放置30分钟，精密称定重量，再置烘箱内100105干燥1小时，取出置干燥器中室温放置30分钟，精密称定重量，直至连续两次干燥后称重的差异在0.3mg以下为止。供试品适量迅速粉碎为最粗粉，取约25g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过5mm。精密称定，记

6、录数据；打开瓶盖置热风循环烘箱中，在100105干燥5小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30分钟，精密称定；再在上述温度干燥1小时 ，冷却，称重，并记录数据，至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量，计算出供试品中含水量(%)。6.2总灰分：按灰分测定法标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6016)总灰分测定法测定，不得过8.0%。6.2.1仪器：节能电阻炉、电子天平、坩锅。6.2.2操作方法：接通电子天平电源，启动电子天平，使电子天平预热30分钟。取洁净的坩埚，置节能电阻炉内，将坩埚盖斜盖于坩埚上，经加热至600炽灼约1小时，停止加热，待节能电阻炉温度冷却至约300，取出坩埚，置

7、干燥器内，盖好坩埚盖，放冷至室温，精密称定重量，再以同样条件重复操作，直至连续两次干燥后称重的差异在0.3mg以下为止。取本品粉碎，能通过二号筛并混合均匀的粉末35g，置炽灼至恒重的坩埚中，在电子天平上精密称定，放入节能电阻炉内，缓缓炽热，至完全炭化呈黑色，逐渐升高温度至500600，停止加热，待节能电阻炉温度冷却至约300，取出观察 ，直至完全灰化，取出坩埚，置干燥器内，盖好坩埚盖，放冷至室温，精密称定重量；再以同样条件重复操作，直至连续两次炽灼后称重的差异在0.3mg以下为止。并记录数据。根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量。 6.3酸不溶性灰分：按灰分测定法标准操作规程（SOP-QC-

8、ZJ-6016)酸不溶性灰分测定法测定，不得过3.0%。6.3.1仪器：节能电阻炉、电子天平、坩锅6.3.2试液稀盐酸：取盐酸234ml,加水稀释至1000ml，即得。（含盐酸应为9.5%10.5%） 稀硝酸 ：取硝酸105ml,加水稀释至1000ml，即得。（含硝酸应为9.5%10.5%） 硝酸银试液：取用硝酸银滴定液（0.1mol/L） 。6.3.3取上项所得灰分，在坩埚中加入稀盐酸10ml，用表面皿覆盖坩埚，置水浴上加热10分钟，表面皿用热水5ml冲洗，洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过，向坩埚内加入热水，洗涤坩埚内的残渣，洗液用上述无灰滤纸滤过，如此反复，直至坩埚内无可见残渣。取最后一次洗

9、液1ml，置小试管中，加稀硝酸使成酸性后，滴加硝酸银试液，若不生成白色凝乳状沉淀，滤渣连同滤纸移至同一坩埚中，放入节能电阻炉内，缓缓炽热，至完全炭化呈黑色，逐渐升高温度至500600，停止加热，待节能电阻炉温度冷却至约300，取出观察 ，直至完全灰化，取出坩埚，置干燥器内，盖好坩埚盖，放冷至室温，精密称定重量，再以同样条件重复操作，直至连续两次干燥后称重的差异在0.3mg以下为止。并记录数据。根据残渣重量，计算供试品中酸不溶性灰分的含量（%）。 6.4浸出物：按浸出物测定法标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6015）项下的热浸法测定，用乙醇作溶剂，不得少于11.0%。 6.4.1仪器：鼓风电热

10、恒温干燥箱、 电子天平、电子恒温水浴锅。 6.4.2试剂：乙醇 6.4.3操作方法：接通电子天平电源，启动电子天平，使电子天平预热30分钟。取洁净的蒸发皿，置烘箱内100105干燥1小时，取出，置干燥器中室温放置30分钟，精密称定重量，再置烘箱内100105干燥1小时，取出置干燥器中室温放置30分钟，精密称定重量，直至连续两次干燥后称重的差异在0.3mg以下为止。 取样品适量粉碎能通过二号筛并混合均匀的供试品约4g，置250ml的磨口锥形瓶中，精密加乙醇100ml，密塞，称定重量，静置1小时后连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1小时。放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用乙醇补足减失的重

11、量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取滤液25ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于100105干燥3小时 ，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量。并记录数据。除另有规定外，以干燥品计算供试品浸出物的含量。 6.5二氧化硫残留量：按二氧化硫残留量测定法标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6062）测定，不得过150mg/kg。6.5.1仪器：SO2测定装置（1000ml）、电热套、10ml棕色滴定管、250ml锥形 瓶、磁力搅拌器、100ml量筒。 6.5.2试液6mol/L盐酸溶液：取盐酸54ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀。淀粉指示液：本液应临用新制。取可溶性淀粉0.5

12、g，加水5ml搅匀后，缓慢倾入100ml沸水中，随加随搅拌继续煮沸2分钟，放冷，倾取上层清液，即得。0.01mol/L碘滴定液： 6.5.3 仪器装置：A为1000ml两颈圆底烧瓶；B为竖式回流冷凝管；C 为（带刻度)分液漏斗；D 为连接氮气流入口；E 为二氧化硫气体导出口； 6.5.4操作方法： 取药材细粉约10g，精密称定W，置两颈圆底烧瓶中，加水300400ml（应加水至没过氮气导气管的下端），取6mol/L盐酸溶液10ml加入带刻度分液漏斗中。锥形瓶里加入水125ml和淀粉指示液1ml作为吸收液，置于磁力搅拌器上不断搅拌。打开冷凝管，将冷凝管的上端口处连接一橡胶导气管置于锥形瓶内液面以

13、下。连接导气管入口。开通氮气，调节适宜的气体流量（氮气流速约为0.2L/min,至蒸馏瓶内有气泡均匀排出）。打开带刻度分液漏斗的活塞，使盐酸溶液10ml流入烧瓶中。给两颈烧瓶内的溶液加热至沸，并保持微沸约3分钟后开始用碘滴定液（0.01mol/L）滴定，吸收液置于磁力搅拌器上不断搅拌，至吸收液显蓝色或蓝紫色持续30秒钟不完全消褪，记录样品消耗滴定液体积A；并用空白试验校正，记录消耗滴定液体积B。每1ml的碘滴定液（0.01mol/L）相当于0.6406mg的SO2。C为碘滴定液浓度的校正因子 7 含量测定：北柴胡 按高效液相色谱法标准操作规程（SOP-QC-ZJ-6041）测定。 7.1仪器：

14、高效液相色谱仪、电子天平、超声波清洗机。 7.2试剂与试液：7.2.1试剂：乙腈、甲醇7.2.2试液5%浓氨试液：取浓氨溶液5ml，加水使成1000ml，即得。7.3对照品：柴胡皂苷a、柴胡皂苷d对照品7.4操作方法 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂：以乙腈为流动相，以水为流动相，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为210nm。理论板数按柴胡皂苷a峰计算应不低于10000。 时间(分钟)流动相 A(%)流动相B05 025 9090505 59010对照品溶液的制备 取柴胡皂苷a对照品、柴胡皂苷d对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含柴胡皂苷a0.4mg（C对a）、柴胡皂苷d0.5mg（C对d）的溶液，摇匀，即得。供试品溶液的制备 取本品粉末（过四号筛）约0.5g，精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，加入含5%浓氨试液的甲醇溶液25ml，密塞，30水温超声处理（功率200W，频率40kHZ）30分钟，滤过，用甲醇20ml分两次洗涤容器及药渣，洗液