缺血性心力衰竭的细胞学治疗研究进展-课件幻灯

1、0河南省人民医院心血管内科 赵永辉12l每年新发心力衰竭病例55万；l50%的病人在6个月内需再次住院。l生活质量远不如肿瘤病人。l55岁以上男性HF患病率约为6%，75岁以上男性患病率约为10%。 在女性病人中， 55-64岁为2%，65-74岁为4%，75岁以上为10.9%。 l80%的心衰病人住院时年龄大于65岁。1979年心力衰竭住院为万人，2002年为97万人，增加157%。2%的卫生预算用在心力衰竭病人的治疗上。大大超过国家预算。 3l每年有110万发生心肌梗死，其中约20万人因心肌梗死死亡。l心肌梗死生存的病人，约20%的男性和38%女性在6年内进展为慢性心力衰竭。l在中国，心肌

2、梗死的发生率约为0.1%，冠心病相关的心力衰竭已经成为首要死亡原因。l据报道，NYHA I 级死亡率为5%, II 级为10%，III级为20%， VI级为50%4心力衰竭的预后心力衰竭的预后5心力衰竭的现状：心力衰竭的现状：CHF死亡增加死亡增加61，心力衰竭是心血管死亡的 主要原因2，年死亡率 20-40%7l冠心病：心肌梗死 60%l高血压：左心室肥大 20%l扩张型心肌病：心肌坏死 10%l糖尿病：冠心病和心肌病 5%l其他： 5%8l药物治疗？BETA-阻滞剂l 血管紧张素 2 转换酶抑制剂l 血管紧张素 2 受体拮抗剂l 醛固酮受体拮抗剂l 硝酸脂+肼本达嗪?(美国黑人l干细胞移植

3、： CCM ？l心室同步化治疗：CRT？l再血管化治疗：搭桥和介入？l外科左心室重建术？l生长因子l基因治疗9 不能从根本上修复已坏死的心肌组织，彻底恢复心脏的正常收缩功能，难以从根本上改善患者生活质量。主要原因是过量功能心肌细胞丧失和无功能心肌形成。10l坏死心肌l冬眠心肌l顿抑心肌l凋亡心肌11岛状新生心肌治疗心衰的关键是： 使无功能心肌复活12 近十余年，在动物实验中发现肌样或多能干细胞移植可修复受损心肌，改善受损的心功能，使细胞移植治疗成为治疗心梗的一条崭新途径。13l1961年Till等首先描述了造血干细胞多向分化潜能和自我更新;l1994年Soonpaa提出l细胞移植(cecllu

4、lar transplantation)l心肌再生(myocardial regeneration)的 概念；14l1999年年Bjornson等发现干细胞的可塑性，等发现干细胞的可塑性，即横向分化潜能即横向分化潜能；l1999年年Makino等发现骨髓间充质干细胞等发现骨髓间充质干细胞可横向分化为心肌细胞；可横向分化为心肌细胞；l2001年年Orlic等发现造血干细胞可横向分等发现造血干细胞可横向分化为心肌细胞；化为心肌细胞；l2001年年Strauer等成功进行了首例骨髓干等成功进行了首例骨髓干细胞治疗心肌梗死的临床试验细胞治疗心肌梗死的临床试验；l2003年年Christof等成功利用造

5、血干等成功利用造血干/祖细祖细胞重建梗死部位血供的临床研究胞重建梗死部位血供的临床研究。15 干细胞STEM CELL是一类具有无限的自我更新能力的细胞，能够产生至少一种类型的高度分化的子细胞。具有多分化潜能和自我更新能力，是处于细胞系起源顶端的最原始细胞。16l全能干细胞: 有全能的分化方向和能力。l多能干细胞多能干细胞: 分化方向已确定，分化为特定组织。分化方向已确定，分化为特定组织。l单能干细胞单能干细胞17l胚胎干细胞embryonic stem cell, ESC)l成体干细胞 (adult stem cell)18根本特点：多向分化潜能和自我更新 1, 属非终末分化细胞； 2，在机

6、体数目，位置相对恒定； 3，具有自我更新能力； 4，能无限分裂，增殖； 5，有多向分化潜能，可分化为不同类型组织细胞，具有分化发育可塑性，在特定环境下能被诱导分化成在发育上无关的细胞类型，其分化受所处周围微环境影响。 19l取代坏死心肌细胞；l刺激心肌增殖释放IGF-1，VEGF，FGF等；l局部血管新生，提高堵塞区再灌注，有助于冬眠心肌功能和损伤基质的恢复；l抑制心肌细胞外基质降解，在损伤区分泌掺入新成分，限制扩展，提高心功能。20l定向诱导，即把胚胎干细胞转化为特定的心肌细胞；l横向分化trans-differentiation)，即把来源于其他组织的成体干细胞诱导分化为心肌细胞。211，

7、经冠状动脉输注 在PCI术成功后经堵塞相关血管注射。2，经心外膜心肌内注射 CABG时3，经心内膜心肌内注射 NOGA系统。4，静脉内输注5, 细胞因子刺激221，骨髓单个核细胞 成体骨髓单个核细胞含有如间充质细胞，造血干细胞和内皮祖细胞之类的干细胞，这些细胞既有分化潜能，又能释放某些细胞因子促进血管新生，且操作简单，无免疫排斥反响。 1%-2%的CD34+ 细胞河南省人民医院232，内皮祖细胞EPCs)3，骨髓某个亚群细胞-AC133 血管新生4，发动的骨髓干细胞SCF，G-CSF24大鼠骨髓中别离的单个核细胞经过培养能分化成具有心肌可收缩细胞根本结构和横纹的细胞25图片2 横纹肌肌动蛋白染

8、色阳性的细胞SP400河南省人民医院26图3 细胞的闰盘样结构 SP400河南省人民医院27图片4 带横纹的细胞 HE 400 河南省人民医院28 与对照组比较 组别组别例数例数24h7d对照组对照组1011.751.212.330.74动员组动员组10 10.060.831.370.66河南省人民医院29与对照组比较，发动组治疗后；发动组治疗前后比较30 表-3 发动组与对照组心梗后24h、7dCD34+及7dBrdU标记阳性细胞计数比较 组别 例数 心梗后24h 7d CD34+ CD34+ BrdU 对照组 101.100.88 1.400.51 发动组 与对照组比较， 24h、7d发动

9、组CD34+细胞数和7dBrdU标记阳性细胞计数 发动组CD34+细胞数7d与24h比较；31中性粒细中性粒细胞胞阳性细胞阳性细胞河南省人民医院32 单个核细胞心肌细胞阳性细阳性细胞胞33阳性细胞阳性细胞阳性细胞阳性细胞河南省人民医院34 阳性细胞阳性细胞阳性细胞阳性细胞35新生血新生血管管36l研究时间：2003年6月2005年12月l成人缺血性心肌病患者156例lDCM48例l年龄367153.614.3)l术前心脏彩色B超测定射血分数EF为184637.312.6)%l心肌堵塞时间4周6月，前壁心肌堵塞64例，下后壁19例,侧壁16例雷平冲博士与第一例心肌干细胞移植37选择病人心功能恢复

10、良好的最正确时机，在百级实验室，2%利多卡因局麻下，在髂后上棘8点法抽取骨髓80160106.620.2)。在细胞培养室，用FICOLL密度梯度离心法去除红细胞、多核细胞、血清和细胞碎片，获得骨髓单个核细胞。38用普通冠脉造影导管分别注入左右冠状动脉.术后随访患者的临床病症,NYHA分级,因心血管事件再住院情况,并用99Tc心脏ECT检查心肌缺血区的变化。391，骨髓：8点穿刺2，别离：Ficoll密度梯度离心法3，单个核细胞数： 1.9108(3.11.6108)(10ml)4，细胞活：大于93%952%5，事件：其中一例在向右冠状动脉注入时发生 室颤，除颤后复苏。40l在百级层流实验室用1

11、%利多卡因局麻下，髂后脊8点法抽取骨髓80160ml，术中均顺利。河南省人民医院心脏内科：骨髓穿刺41l用Ficoll密度梯度离心法获得骨髓单个核细胞88，8 )(10ml),细胞活性均大于93%952%。河南省人民医院：细胞别离实验室42单个核细胞位于中层呈白色43l冠状动脉灌注法左冠状动脉注入2/3的单个核细胞，右冠状动脉注入1/3的单个核细胞l其中一例在右冠状动脉注入时发生心室颤抖，除颤后复苏：导管冠状动脉阻塞l其他98例术前、术中和术后均顺利。441，患者活动能力明显改善2，NYHA提高2级84例，1级12例3，EF明显提高36.412.5%, s46.310.6% 4，99Tc心脏E

12、CT检查示岛状放射性同位素 充盈，提示有局部新生心肌存在5，事件：因心肌再堵塞住院一例并死亡， 其他无明显病症。4525%的心肌梗死面积缩小的心肌梗死面积缩小河南省人民医院4647图1 99Tc 心肌灌注扫描ECT短轴观。 上排示心肌梗死后4周、骨髓单个核细胞移植前，室间隔、心尖和前壁心肌坏死，无同位素充盈心肌。下排为骨髓单个核细胞移植后4周ECT显像，在室间隔部位可见明显同位素充盈，提示局部新生心肌存在。48图2 ECT水平切面。上排为心肌梗死后4周、骨髓单个核细胞移植前，室间隔、心尖和局部前壁心肌坏死，无同位素充盈心肌。 下排为骨髓单个核细胞冠状动脉内移植后4周ECT显像，在室间隔部位可见明显同位素充盈，提示局部岛状新生心肌存在。 49图3 ECT长轴切面。骨髓单个核细胞移植后4周下排与骨髓单个核细胞移植前上排相比，前壁可见岛状放射性同位素充盈。提示前壁有局部新生心肌存在。 503拍于2003年11月9日肺淤血征，C/T值0.7拍于2004年3月12日肺野清晰无明显淤血,C/T值0.6男，56岁，病症为心力衰竭51优点：获取方便进行自体移植不会产生免疫排斥1.无伦理问题。52问题：选择哪种类型的移植细胞