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文档简介
1、实验四实验四药物对家兔离体肠管作用的影响药物对家兔离体肠管作用的影响一、实验目的一、实验目的v1.1.学习离体十二指肠或上段空肠的制备方法。学习离体十二指肠或上段空肠的制备方法。v2.2.观察乙酰胆碱,阿托品,组胺,苯海拉明,观察乙酰胆碱,阿托品,组胺,苯海拉明,氯化钡对离体兔肠平滑肌的作用的影响。氯化钡对离体兔肠平滑肌的作用的影响。原 理(2)v乙酰胆碱:乙酰胆碱:M胆碱能受体激动药胆碱能受体激动药。Ach与与M受体结合,使平滑肌受体结合,使平滑肌Ca2+通道开放,通道开放,Ca2+内内流流,肌浆,肌浆Ca2+,平滑肌收缩幅度,平滑肌收缩幅度增高增高。v阿托品:阿托品:M胆碱能受体阻断药胆碱
2、能受体阻断药。阿托品与平。阿托品与平滑肌细胞膜滑肌细胞膜M受体结合,阻断乙酰胆碱与受体结合,阻断乙酰胆碱与M受体结合,受体结合,阻断阻断乙酰胆碱与乙酰胆碱与M受体的激动作受体的激动作用。用。原 理(2)v组胺:组胺:激动平滑肌细胞膜激动平滑肌细胞膜H1受体,通过激活受体,通过激活G蛋白蛋白-磷脂酶磷脂酶C系统,使细胞系统,使细胞内内Ca2+增高增高,导致导致平滑肌收缩平滑肌收缩。vbenhailam:H1受体阻断药受体阻断药。扑尔敏与平滑。扑尔敏与平滑肌细胞膜肌细胞膜H1受体结合,阻断组胺与受体结合,阻断组胺与H1受体受体结合,从而阻断组胺对结合,从而阻断组胺对H1受体的激动作用。受体的激动作
3、用。原 理(3)v氯化钡:氯化钡:肌肉兴奋剂。肌肉兴奋剂。Ba2+经钙通经钙通道进入胞浆,使肌浆道进入胞浆,使肌浆Ba2+,平滑,平滑肌收缩幅度增高,但泵出障碍;另肌收缩幅度增高,但泵出障碍;另一方面一方面BaCl2能兴奋胆碱能受体,能兴奋胆碱能受体,使平滑肌收缩幅度增高使平滑肌收缩幅度增高。二、实验原理二、实验原理胃肠道平滑肌以胆碱能神经占优势,小剂量或低浓度的胃肠道平滑肌以胆碱能神经占优势,小剂量或低浓度的ACh即即能激动能激动M胆碱受体,兴奋胃肠道平滑肌。胆碱受体,兴奋胃肠道平滑肌。Atropine与胆碱受与胆碱受体结合而本身不产生或较少产生拟胆碱作用,却能阻断胆碱体结合而本身不产生或较
4、少产生拟胆碱作用,却能阻断胆碱能递质或拟胆碱药物与受体的结合,从而产生抗胆碱作用。能递质或拟胆碱药物与受体的结合,从而产生抗胆碱作用。组胺对多种动物的胃肠道和气道平滑肌组胺对多种动物的胃肠道和气道平滑肌H1受体有兴奋作用,受体有兴奋作用,苯海拉明为苯海拉明为H1受体拮抗剂,能阻断组胺与受体拮抗剂,能阻断组胺与H1受体的结合,从受体的结合,从而产生抗组胺作用。而产生抗组胺作用。氯化钡是一种非受体作用的有毒氯化钡是一种非受体作用的有毒化合物,对肠肌有直接的兴奋收缩作用,常用于药化合物,对肠肌有直接的兴奋收缩作用,常用于药理实验中理实验中 三、实验动物:三、实验动物:家兔家兔四、实验药品及器材:四、
5、实验药品及器材:HW-400SHW-400S生物机能信号系统,恒温平滑肌槽,张力换能器,哺生物机能信号系统,恒温平滑肌槽,张力换能器,哺乳类手术器械一套,纱布,铁支架,双凹夹,乳类手术器械一套,纱布,铁支架,双凹夹,L L型钩,型钩, 1ml1ml注注射器,射器,10ml10ml注射器,温度计,滴管,培养皿,注射器,温度计,滴管,培养皿,20%20%氨基甲酸乙氨基甲酸乙酯,酯,0.01%0.01%乙酰胆碱,乙酰胆碱,0.05%0.05%阿托品阿托品 ,1%1%组胺溶液,组胺溶液,1%1%苯海拉苯海拉明,明,1%1%氯化钡,氯化钡, 0.010.01去甲肾上腺素溶液去甲肾上腺素溶液, 0.01%
6、, 0.01%酚妥拉明酚妥拉明溶液溶液, ,台氏液台氏液 。五、实验步骤及观察项目五、实验步骤及观察项目(一)仪器连接(一)仪器连接1、打开、打开HW300型恒温平滑肌,型恒温平滑肌,恒温恒温37-38摄氏度。摄氏度。2、启动电脑,确认、启动电脑,确认USB接口已经接口已经连通,打开连通,打开BL420E生物机能实生物机能实验系统软件,在验系统软件,在“实验项目实验项目”下下拉菜单中选择拉菜单中选择“消化道平滑肌活消化道平滑肌活动动”,或在,或在“输入信号输入信号”下拉菜下拉菜单中选择单中选择“1通道通道”的的“张力张力”,在在“1通道通道”连接张力换能器。连接张力换能器。离体小肠平滑肌灌流装
7、置离体小肠平滑肌灌流装置 (二)制备标本(二)制备标本取家兔取家兔1只,击头致死,剖腹,取出空肠或十二指只,击头致死,剖腹,取出空肠或十二指肠,放入台氏液的器皿中,用吸管吸取台氏液将肠肠,放入台氏液的器皿中,用吸管吸取台氏液将肠内容物冲净,剥离肠系膜。将肠管剪成内容物冲净,剥离肠系膜。将肠管剪成2cm的肠段的肠段备用。肠管两端对角穿线,将其安放在有台氏液的备用。肠管两端对角穿线,将其安放在有台氏液的平滑肌槽中,上端连接拉力换能器,下端系于平滑肌槽中,上端连接拉力换能器,下端系于L型型钩上,通入空气供氧。钩上,通入空气供氧。 (三)观察项目(三)观察项目1.1.正常曲线正常曲线2.2.加药:待肠
8、肌稳定加药:待肠肌稳定10min10min后,描记正常收缩后,描记正常收缩曲线,然后依次加药并记录收缩曲线的变化,曲线,然后依次加药并记录收缩曲线的变化,顺序如下:顺序如下:(1 1)0.01%Ach0.01%Ach溶液溶液0.2ml0.2ml,当肠肌活动曲线,当肠肌活动曲线降至基线时,台氏液连续冲洗降至基线时,台氏液连续冲洗3 3次;次;(2 2)重复()重复(1 1),作用达到最高点时再加),作用达到最高点时再加0.05%0.05%阿品托阿品托0.2ml0.2ml,记录曲线变化后,台氏,记录曲线变化后,台氏液连续冲洗液连续冲洗3 3次;次; (3)1%氯化钡氯化钡1.0ml作用达到最高峰时
9、立即加入作用达到最高峰时立即加入0.1%阿品托阿品托1.0ml,记录曲线变化;,记录曲线变化;(4) 加入加入1%1%组胺组胺 0.3ml0.3ml,待作用明显时,待作用明显时(1-2(1-2分钟分钟) ),迅速换液。使肠肌张力恢复正常,迅速换液。使肠肌张力恢复正常 (5)加入加入1%1%苯海拉明溶液苯海拉明溶液0.2ml 50.2ml 5分钟后分钟后( (不不换液换液) ),加入同量组胺,加入同量组胺 ,观察并记录其收缩,观察并记录其收缩曲线。曲线。六、实验结果六、实验结果将描记的曲线图画在实验报告纸上,标明加药将描记的曲线图画在实验报告纸上,标明加药标记。标记。 七、分析讨论七、分析讨论 为什么会出现上述现象及结果。为什么会出现上述现象及结果。八、结论八、结论 与实验目的是否吻合的结论。与实验目的是否吻合的结论。九、注意事项九、注意事项1 1实验动物先禁食实验动物先禁食24 h24 h,于实验前,于实验前1h1h喂食,然后喂食,然后处死处死, ,取出标本,肠运动效果更好。取出标本,肠运动效果更好。2 2标本安装好后,应在新鲜标本安装好后,应在新鲜3838台氏液中稳定台氏液中稳定5 510min10min,有收缩活动时即可开始实验。,有收缩活动时
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