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文档简介
1、 DNA的提取和分离及鉴定知识梳理知识梳理1.DNA的粗提取与鉴定(1)基本原理0.14mol/LNaCl酒精二苯胺(2)操作流程材料的选取:选用 含量相对较高的生物组织 破碎细胞(以鸡血为例):鸡血细胞加 用玻璃棒搅 拌用纱布过滤收集滤液 去除杂质:利用DNA在 中溶解度不同,通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质DNA蒸馏水不同浓度的NaCl溶液 DNA的析出:将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等 的、冷却的体积分数为95%的 溶液 DNA的鉴定:在溶有DNA的溶液中加入二苯胺试剂,混合 均匀后将试管在沸水中加热5 min,溶液变 成 酒精蓝色思维诊断(1)进行DNA粗提取和鉴定实验时,加入
2、洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨(2013江苏,4A)( )(2)洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度(2012江苏,18A)( )(3)将制备的含有DNA的滤液加入6075 的恒温水浴箱中保温1015 min,可以将DNA析出( )题组一题组一DNA的粗提取与鉴定过程分析的粗提取与鉴定过程分析1.“DNA的粗提取与鉴定”实验中,操作正确的是()A.取制备好的鸡血细胞液510 mL注入烧杯中,迅速加入物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液20 mL,同时用玻璃棒沿同一方向快速搅拌5 min,可使血细胞破裂,释放出DNAB.整个DNA提取过程中,两次加蒸馏水的目的都是
3、为了降低溶液中NaCl的浓度,使DNA分子的溶解度达到最低,析出DNA分子解题探究解题探究C.整个DNA提取操作中,两次加入2 mol/L的NaCl溶液,目的都是使DNA尽可能多地溶解在NaCl溶液中D.DNA鉴定操作中,只要向溶有DNA的NaCl溶液中加入4 mL的二苯胺试剂,即可出现蓝色c2.做DNA粗提取和鉴定实验时,实验材料用鸡血而不用猪血的原因是()A.鸡血的价格比猪血的价格低B.猪的成熟红细胞没有细胞核,不易提取到DNAC.鸡血不凝固,猪血会凝固D.用鸡血提取DNA比用猪血提取操作简便B归纳提升DNA的粗提取与鉴定实验中的的粗提取与鉴定实验中的“2、3、4、5”加蒸馏水2次加到鸡血
4、细胞液中,使血细胞吸水涨破;加到含DNA的2 mol/L的NaCl溶液中,使NaCl溶液的物质的量浓度下降到0.14 mol/L,使DNA析出用纱布过滤3次过滤血细胞破裂液,得到含细胞核物质的滤液;滤取0.14 mol/L的NaCl溶液中析出的DNA(黏稠物);过滤溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液用NaCl溶液4次加2 mol/L的NaCl溶液,溶解提取的细胞核物质;用0.14 mol/L的NaCl溶液使DNA析出;用2 mol/L的NaCl溶液,溶解滤取的DNA黏稠物;用2 mol/L的NaCl溶液,溶解丝状物用于鉴定DNA要语强记要语强记1.DNA在NaCl溶液中的溶解度随着NaC
5、l溶液浓度的改变而改变,在物质的量浓度为0.14 mol/L时的溶解度最小。探究高考 明确考向1.(2014江苏,16)下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述,错误的是()A.酵母和菜花均可作为提取DNA的材料B.DNA既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸馏水C.向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,可见玻棒上有白色絮状物D.DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝4321C567891011121312344.下表是关于DNA粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用,表述正确的是() 试剂操作作用A 柠檬酸钠溶液与鸡血混合防止DNA凝固B蒸馏水与鸡血细胞混合保持细胞形状C蒸馏水加入
6、溶解有DNA的NaCl中析出DNA丝状物D冷却的酒精过滤后的DNA加入其中产生特定的颜色反应C678910111213123455.下列操作中,对DNA的提取量影响较大的是()使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂,释放出DNA等核物质搅拌时,要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动在析出DNA黏稠物时,要缓缓加蒸馏水,直至溶液中黏稠物不再增多在用酒精沉淀DNA时,要使用冷酒精,甚至再将混合液放入冰箱中冷却在DNA的溶解和再溶解时,要充分搅拌A. B. C. D.C1234567891011121313.自1973年博耶和科恩成功地使外源基因在原核细胞中表达开始,基因工程正式问世了,人们对DNA的关注也越来越多。分析并回答下列问题:(1)从生物组织中提取DNA时,若要获取含有DNA的滤液,需破碎细胞;若为鸡的成熟红细胞,可以加入一定量的蒸馏水,原因是细胞 而涨破;若为植物细胞可以加入一定量的洗涤剂。吸水膨胀(2)利用DNA和RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,可以将它们分离。如DNA的溶解度在NaCl溶液浓度为 时最小,可以使DNA与其他杂质初步分离。123456789101112130.14 mol/L12345678910111213(3)为了纯化提取的DNA,可以用95%的酒精去除滤液中的杂质。其原理是
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