激光共聚焦显微镜A1培训大纲

1、激光共聚焦显微镜A1使用培训上海千欣仪器有限公司第一章：开机与关机1、开启激光器 先开启先开启LU-LR型型4激光台电源箱电源钥匙；激光台电源箱电源钥匙； 开启蓝宝石激光器（488/561）：先开启后面板电源开关，待正面显示屏显示“Stand By”信息后开启正面面板钥匙（如果次序相反，则激光不能被激发）； 开启多线氩离子激光器：ON/OFF 换档开关置“ON”位置，待显示屏指示功率数上升后，Run/Stand By开关置“RUN”位置； 开启半导体激光器（405/640）：直接开启电源钥匙；2、开启共聚焦相机控制器电源 启动控制器按钮3、开启Ti-E显微镜 开启荧光电源开关 开启可见光电源开

2、关 开启扫描台控制器开关 开启HUB电源开关4、启动NIS-Elements C双击Windows 7桌面图标启动A1照相系统：启动共聚焦显微镜工作站电脑系统初始化说明 按照正常程序开机后，显微镜光路处于E100状态，荧光滤镜转盘处于“1”位置，通常为“空”位置； 此时可以将样品置于显微镜平台上，操作显微镜，可以用双眼观察显微样品；结束操作 退出NIS-Elments C软件，退出Windows关闭工作站电脑； 关闭显微镜（与开机次序相反）； 关闭共聚焦相机控制器； 逐个关闭激光器（与开机次序相反）；第二章：认识软件界面图形用户界面GUI及光学设置 主控窗口及主菜单 图像窗口 弹出式菜单 LU

3、TS：图像亮度及对比度调节对话框 A1plus Compact GUI/A1plus Settings：照相对话框 A1plus Scan Area：扫描视野设置对话框 NIS-Elements AR主控窗口及主菜单文档管理文档编辑图像处理感兴趣区域二进制阈值处理分析测量宏操作查看设备管理高级应用图像窗口弹出式菜单弹出式菜单弹出式菜单弹出式菜单弹出式菜单Compact GUI照相操作界面（3荧光通道）光学设置4荧光通道第三章：操控Ti-E显微镜操作Ti-E显微镜Ti-E 前方控制按钮控制状态信息PFS启用光路选择倍率变换跟踪层面记忆跟踪层面恢复Ti-E右侧/左侧控制按钮控制设置调焦精度调焦钮调

4、焦钮选择滤块调节光亮度打开光源选择物镜Remote ControllerRemote Controller的基本操作20X物镜选择滤镜选择激发光强度选择光路选择调用状态记忆可选择的选项开启透射光控制显微镜的状态记忆设置状态保存开启/关闭PFS状态记忆Remote Controller的基本操作20X关闭透射光控制释放透射光控制权，用户可在Ti-E上调节亮度，方便延续用户在机体上控制透射照明亮度的习惯。高阶操作：记忆Ti-E的状态（命名）与状态相关联的硬件（ON）可见光观察记忆：光路端口Path、可见光开关状态DIA ON/OFF、聚光器模块位置Condenser、荧光转盘位置Filter Bl

5、ock1。荧光观察记忆：光路端口Path、可见光开关状态DIA ON/OFF、荧光光源INTSL Shutter、INTSL ND、荧光转盘位置Filter Block1等。照相状态记忆：光路端口Path、可见光开关状态DIA ON/OFF、聚光器模块位置Condenser、荧光光源INTSL Shutter、INTSL ND、荧光转盘位置Filter Block1等。保存设置按下“Control”按钮按下“SAVE”按钮重复操作：最多可记忆共8个状态模式状态参数记忆返回也可以将当前显微镜状态直接记忆到右图所示的对应按钮中快捷键设置使用快捷键调用显微镜状态A001A002A003A004 A0

6、05A006电动扫描台控制设置移动速度设置调焦步距XY位置移动调焦第四章：观察与照相之间切换Compact GUI初始状态初始化共焦照相状态关于“EyePort”按钮操作 共聚焦照相状态：在经过初始化共焦照相状态后，共聚焦照相状态参数将被记忆；如果调节GUI上的参数设置，刷新了的共聚焦照相状态参数将被记忆；A. 切换到显微镜观察状态：下压EyePort按钮，进入显微观察状态，显微镜光路均指向E100，同时TD检测器保持OUT状态，显微镜观察状态参数将被 记忆，调节显微镜，刷新了的状态参数将被记忆；B.切回到共聚焦照相状态：松开EyePort按钮，上面的共聚焦照相状态参数将恢复；l A、B两种状

7、态的反复，是正常操作流程，l在A状态下，请不要操作显微镜光路切换钮和滤光片转换钮 ，否则会影响状态参数的正确记忆；l在B状态下，请不要操作GUI上的任何选项，否则会影响状态参数的正确记忆；从共焦照相直接切换到目镜观察状态目镜观察状态！第五章：拍摄XY图像设置相关参数(选择扫描速度)(多通道序列扫描)(取消降噪功能)(快速扫描模式)(通道选择)(设置扫描图像尺寸)首先需要将状态切换到首先需要将状态切换到共聚焦照相状态共聚焦照相状态变换图像通道，逐一预览变换图像通道，逐一预览变换图像通道，逐一预览在预览时调节各通道图像的亮度(改变PMT增益，调节图像亮度)(改变激光强度，调节图像亮度)(图像背景调

8、节)(调节针孔尺寸)(PMT自动增益)(推荐针孔尺寸)采集图像(设定降噪算法)第六章：采集多维图像Z序列图像采集Acquire Capture Z-SeriesCapture Automatically：时间序列图像采集 Acquire Capture Timelapse Capture Automatically.：4D图像序列采集Photo Activation序列式光刺激控制同步光刺激控制大图采集Acquire-Scan Large Image Multichannel Capture 功能主要用于功能主要用于CCD图像采集应用，在图像采集应用，在A1采集大图时一般不使用！采集大图时一般不使用！第七章：图像处理篇图像的保存和转换 所有A1拍摄的照片保存文件的格式应为：ND2、JP2、TIFF等格式，不能保存为JPG、BMP、GIF格式 通用的Windows图像软件不能识别ND2、JP2格式以及TIFF（12bit）的图像，需要在NIS-Elements软件下转换为16bit、8bit图像FileImport/ExportExport ND Document导出单帧图像FileImport/ExportExport ND Documen