病原微生物室岗前学习

1、一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人病原微生物室岗前学习病原微生物室岗前学习利川市人民医院检验科利川市人民医院检验科余清源余清源一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人什么是微生物什么是微生物 微生物是存在于自然界的微生物是存在于自然界的一大群形体微小，结构简单、一大群形体微小，结构简单、肉眼不能直接看到，必须借助肉眼不能直接看到，必须借助光学或电子显微镜放大数百倍光学或电子显微镜放大数百倍至数万倍才能看到的微小生物。至数万倍才能看到的微小生物。包括包括：一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切

2、服务于病人一切服务于病人微生物的特点1 1. .结构简单：以单细胞和细菌群体形式存在结构简单：以单细胞和细菌群体形式存在2.2.代谢旺盛（四个期）代谢旺盛（四个期）3.3.变异快，适应能力强（鉴定困难、经验用药的挑战）变异快，适应能力强（鉴定困难、经验用药的挑战）4.4.种类多、分布广、数量大种类多、分布广、数量大5.5.个体微小个体微小一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人病原微生物室职能？一.研究标本的采集、运送和保存的方法及标本处理方法对检出率的影响血培养血培养时间：未使用抗生素之前、时间：未使用抗生素之前、 发热初期或高峰期；发热初期或高峰期；

3、采血量：成人采血量：成人1020ml1020ml 儿童儿童35ml35ml频率：频率：应该应该24小时采小时采3套，以提高阳性率。套，以提高阳性率。急性脓毒病：急性脓毒病：1010分钟内从不同的部位采集分钟内从不同的部位采集2-32-3套。套。急性心内膜炎：急性心内膜炎：1-21-2小时从小时从3 3个分离部位采个分离部位采3 3套。套。亚急性心内膜炎：从不同部位采亚急性心内膜炎：从不同部位采3 3套，间隔套，间隔1515分钟，如分钟，如2424小小时内为阴性，要再采时内为阴性，要再采3 3 套。套。原因不明发热：从不同部位采原因不明发热：从不同部位采2-32-3套，间隔套，间隔1 1小时，如

4、小时，如2424小小时内为阴性，须再采时内为阴性，须再采3 3套。套。一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人淋球菌培养淋球菌培养：培养用的标本于采集后最好是马上接种，若不能：培养用的标本于采集后最好是马上接种，若不能, ,则则应置于标本运送培养基中。置于运送培养基中的标本，应置于标本运送培养基中。置于运送培养基中的标本，室温室温条件条件下，下，1212小时内的分离率为小时内的分离率为100%100%，2424小时的分离率为小时的分离率为90%90%。尿培养尿培养： 所有标本采集后都应立即送往实验室，最好在小时内。所有标本采集后都应立即送往实验室，最好在

5、小时内。如果不能及时送检，放置于冰箱内，但不要超过如果不能及时送检，放置于冰箱内，但不要超过2424小时小时痰培养：痰培养：1.1.采集方法采集方法 2. 2.一般医用棉签抑菌作用一般医用棉签抑菌作用 3. 3.消化液消化液接种平皿的选择：不同标本的组合接种平皿的选择：不同标本的组合接种方法的选择：分几区发线接种方法的选择：分几区发线一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人 二二. .明确病原体检测方法的选择、鉴定程序的选择等明确病原体检测方法的选择、鉴定程序的选择等直接镜检：不需要药敏结果，如直接镜检：不需要药敏结果，如TB、GN、五联检等、五联检等血

6、清学诊断试剂：沙门、志贺等血清学诊断试剂：沙门、志贺等显色培养皿：科玛嘉等显色培养皿：科玛嘉等免疫学方法：免疫学方法：TP等等质谱分析质谱分析PCR检测方法检测方法一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人1.1.根据病原体的根据病原体的特征特征，初步判断病原菌，初步判断病原菌1.11.1、细菌的生长现象：液体培养基、细菌的生长现象：液体培养基半固体培养基半固体培养基分离培养基分离培养基鉴定程序大小、形状、突起、边缘、大小、形状、突起、边缘、颜色颜色、表面、透明度、粘度等、表面、透明度、粘度等溶血现象：溶血现象：、双环（产气夹膜杆菌）、双环（产气夹膜杆菌）

7、气味：铜绿生姜味变形杆菌巧克力烧焦气味白假丝酵母菌酵母味放线菌-泥土味味一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人1.21.2、细菌的分布特征：、细菌的分布特征：、干燥环境中大部分是、干燥环境中大部分是G G+C+C 潮湿环境中大部分是潮湿环境中大部分是G G-b-b 。 、人体正常菌群的分布：、人体正常菌群的分布：一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人 人体的体表皮肤和与外界相通的口腔、人体的体表皮肤和与外界相通的口腔、上呼吸道、肠道、泌尿生殖道等粘膜及其腔道上呼吸道、肠道、泌尿生殖道等粘膜及其腔道寄居着不同种类

8、和数量的微生物。寄居着不同种类和数量的微生物。 寄生物在正常情况下与宿主相安无事，寄生物在正常情况下与宿主相安无事，互相适应，而且各种微生物之间也相互制约而互相适应，而且各种微生物之间也相互制约而保持一个彼此共存的状态。保持一个彼此共存的状态。 一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人喷嚏中的细菌喷嚏中的细菌一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人人体正常菌群的数量 部位部位 数量（每克样数量（每克样品）品） 厌氧菌：好氧菌厌氧菌：好氧菌 唾液唾液 10108 8-10-109 9 3-103-10：1 1 牙齿表

9、面牙齿表面 10109 9-10-101010 1 1：1 1 齿龈缝隙齿龈缝隙 10101111-10-101212 10102 2-10-103 3：1 1 胃胃 10102 2-10-105 5 1 1：1 1 小肠近端小肠近端 10102 2-10-104 4 1 1：1 1 回肠远端回肠远端 10104 4-10-107 7 1 1：1 1 大肠大肠 10109 9-10-101212 10102 2-10-103 3：1 1 阴道阴道 10108 8-10-109 9 5-105-10：1 1 子宫颈内膜子宫颈内膜 10108 8-10-109 9 5-105-10：1 1 一切为

10、了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人皮肤、耳、眼部皮肤、耳、眼部表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌金黄色葡萄球菌较多见脸部与手部皮肤。金黄色葡萄球菌较多见脸部与手部皮肤。大肠埃希菌较多见鼻翼、腋窝及腹股沟等处皮肤较潮湿。大肠埃希菌较多见鼻翼、腋窝及腹股沟等处皮肤较潮湿。丙酸杆菌较多见皮脂多的部位常见。丙酸杆菌较多见皮脂多的部位常见。耻垢分枝杆菌在外阴部与肛门周围皮肤可找到耻垢分枝杆菌在外阴部与肛门周围皮肤可找到中耳和内耳一般无菌。中耳和内耳一般无菌。 皮肤受损时，这些正常菌群可趁机侵入引起化脓性感皮肤受损时，这些正常菌群可趁机侵入引起化脓性感染。主要有金黄色葡萄球菌

11、引起的疖、浓疱疮、汗腺染。主要有金黄色葡萄球菌引起的疖、浓疱疮、汗腺炎等；表皮葡萄球菌可以在痤疮内找到，同时还可以炎等；表皮葡萄球菌可以在痤疮内找到，同时还可以发现痤疮丙酸杆菌。外耳道的正常菌群以肺炎发现痤疮丙酸杆菌。外耳道的正常菌群以肺炎链球菌链球菌和和铜绿假单胞铜绿假单胞菌较多菌较多一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人 眼结膜上菌群甚少，因泪液中有溶菌眼结膜上菌群甚少，因泪液中有溶菌酶存在。有时可有葡萄球菌、甲型链球菌、酶存在。有时可有葡萄球菌、甲型链球菌、流感嗜血杆菌等。流感嗜血杆菌等。 一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切

12、服务于病人一切服务于病人口腔与消化道口腔与消化道 口腔中有弱碱性唾液、食物残渣等，口腔中有弱碱性唾液、食物残渣等，为正常菌群的繁衍提供了合适条件。为正常菌群的繁衍提供了合适条件。 牙牙齿齿上上的的细细菌菌一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人 最最常见的菌群是甲型链球菌和厌氧链球菌，常见的菌群是甲型链球菌和厌氧链球菌，其次是表皮葡萄球菌、奈瑟氏菌、乳杆菌、其次是表皮葡萄球菌、奈瑟氏菌、乳杆菌、螺旋体、假丝酵母等。螺旋体、假丝酵母等。 一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人 当拔牙时，甲型链球菌可通过伤口当拔牙时

13、，甲型链球菌可通过伤口进入血流。一般情况下，少量菌很快被进入血流。一般情况下，少量菌很快被肝、脾、淋巴结和骨髓中的吞噬细胞清肝、脾、淋巴结和骨髓中的吞噬细胞清除。但若心脏瓣摸有病损，或者是安装除。但若心脏瓣摸有病损，或者是安装了人工瓣膜的人，细菌就会被阻留在那了人工瓣膜的人，细菌就会被阻留在那里并繁殖起来，导致内心膜炎。里并繁殖起来，导致内心膜炎。 一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人 新生儿出生后数天内的口腔菌群，与母亲阴道内的菌群相同，随后逐渐接近成人的口腔菌群。 一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人

14、消化道中的正常菌群的种类和数量，消化道中的正常菌群的种类和数量，在不同部位是不同的。胃酸的酸度很高在不同部位是不同的。胃酸的酸度很高（pH2-3pH2-3），因而胃内基本无活菌。空肠），因而胃内基本无活菌。空肠和回肠上部的菌群很少。结肠和直肠则有和回肠上部的菌群很少。结肠和直肠则有大量细菌，主要是类杆菌大量细菌，主要是类杆菌（BacteroidesBacteroides）、双歧杆菌）、双歧杆菌（BifidobacteriumBifidobacterium）、大肠埃希氏菌、）、大肠埃希氏菌、乳杆菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌乳杆菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌（ProteusProteus）、梭菌（）、梭

15、菌（ClostridiumClostridium）等。）等。 一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人鼻腔与呼吸道鼻腔与呼吸道 鼻腔粘膜常有表皮葡萄球菌和金黄鼻腔粘膜常有表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌存在，有时有甲型链球菌、色葡萄球菌存在，有时有甲型链球菌、棒状杆菌（棒状杆菌（CorynebacteriumCorynebacterium）、布兰）、布兰汉菌（汉菌（BranhamellaBranhamella）等。）等。 一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人泌尿生殖道泌尿生殖道 外生殖器的正常菌群较多，常有表皮外生

16、殖器的正常菌群较多，常有表皮葡萄球菌、甲型链球菌、肠球菌、棒状杆葡萄球菌、甲型链球菌、肠球菌、棒状杆菌、类杆菌、奈瑟氏菌、不动杆菌、耻垢菌、类杆菌、奈瑟氏菌、不动杆菌、耻垢分枝杆菌、支原体、假丝酵母等。这些菌分枝杆菌、支原体、假丝酵母等。这些菌群也可以在男女两性的尿道口发现。群也可以在男女两性的尿道口发现。 一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人 阴道内菌群随内分泌变化而波动。阴道阴道内菌群随内分泌变化而波动。阴道分泌物中常含有无害的微球菌。初生女婴阴分泌物中常含有无害的微球菌。初生女婴阴道的酸碱度在道的酸碱度在5 5左右，主要为乳杆菌；出生后左右，主

17、要为乳杆菌；出生后1 1个月至青春期，酸碱度升至个月至青春期，酸碱度升至7 7左右，主要菌左右，主要菌群转为表皮葡萄球菌、棒状杆菌、大肠埃希群转为表皮葡萄球菌、棒状杆菌、大肠埃希菌等。青春期后，阴道酸碱度又下降，乳杆菌等。青春期后，阴道酸碱度又下降，乳杆菌等重占优势，直至绝经期为止。菌等重占优势，直至绝经期为止。 一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人革兰氏阴性杆菌革兰氏阴性杆菌 OXOX2.2.涂片染色：涂片染色：抗酸染色抗酸染色-阳性分枝杆菌：结核杆菌？阳性分枝杆菌：结核杆菌？革兰染色：革兰氏阴性双球菌（奈瑟氏菌属），肾形革兰染色：革兰氏阴性双球菌

18、（奈瑟氏菌属），肾形淋球菌？淋球菌？3.3.革兰氏阳性球菌革兰氏阳性球菌 H2O2H2O2微球菌微球菌葡萄球菌属：葡萄球菌属：PHEPHE、NITNIT、VPVP、CgCg管管链球菌属：链球菌属：肠球菌属：肠球菌属： 非发酵菌：例外（鲍曼不动杆菌、非发酵菌：例外（鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌）嗜麦芽窄食单胞菌）肠杆菌科：肠杆菌科：VPVP、INDIND、PHEPHE真菌孢子真菌孢子一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人4.4.关键性实验：杆菌肽（关键性实验：杆菌肽（S S）-A-A群；七叶甘（水解）群；七叶甘（水解）-D-D群群 OptochinOp

19、tochin（S S）- -肺炎链；肺炎链；CAMP-BCAMP-B群群三、指导临床合理使用抗生素三、指导临床合理使用抗生素四、监控医院感染四、监控医院感染一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人1 1、如何进行安全防护？、如何进行安全防护？五、安全防护五、安全防护标准预防：认定病人标准预防：认定病人血液血液，体液，分泌物，体液，分泌物，排泄物排泄物均具有传染性，需进行隔离，不论是均具有传染性，需进行隔离，不论是否有明显的血迹污染或是否接触非完整的皮否有明显的血迹污染或是否接触非完整的皮肤与肤与黏膜黏膜接触上述物质者必须采取接触上述物质者必须采取防护措防

20、护措施施根据传播途径采取接触隔离，飞沫隔离，根据传播途径采取接触隔离，飞沫隔离，空气隔离，是预防医院空气隔离，是预防医院感染感染成功而有效的措成功而有效的措施。施。一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人2.2.病原物生物的分级病原物生物的分级第一类病原微生物，相应的风险等级为第一类病原微生物，相应的风险等级为IVIV级级( (个体高风险，个体高风险，群体高风险群体高风险) ) ，如：鼠疫耶尔森菌、霍乱弧菌等，如：鼠疫耶尔森菌、霍乱弧菌等第二类病原微生物，相应的风险等级为第二类病原微生物，相应的风险等级为级级( (个体高风险，个体高风险，群体低风险群体低

21、风险) )，如：炭疽、布鲁菌、结核菌，如：炭疽、布鲁菌、结核菌 、HIVHIV等等第三类病原微生物，相应的风险等级为第三类病原微生物，相应的风险等级为级级( (个体中风险，个体中风险，群体有限风险群体有限风险) )，如：金葡、链球菌、梅毒螺旋体、，如：金葡、链球菌、梅毒螺旋体、Ca-16Ca-16等等第四类病原微生物，相应的风险等级为第四类病原微生物，相应的风险等级为I I级级( (个体低风险，群个体低风险，群体低风险体低风险) )。 其中第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。其中第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。一切为了病人一切为了病人一切方便于病人一切方便于病人一切服务于病人一切服务于病人4.4.掌握消毒灭菌知识掌握消毒灭菌知识3.3.规范操作规范操作如：揭采血管盖、烧接种环、高压灭菌锅等如：揭采血管盖、烧接种环、高压灭菌锅等紫外线：一般直接照射消毒紫外线：一般直接照射消毒30min 30min ；可以杀灭