俄国植物学家茨维特——%20色谱法PPT%20ppt

1、7.7 色谱法色谱法1903年，俄国植物学家茨维特年，俄国植物学家茨维特植物叶子的色素植物叶子的色素;石油醚石油醚CaCO3,长玻璃管长玻璃管;吸附作用微小的差异吸附作用微小的差异可以画图可以画图色带色带,色谱色谱,色层色层科研的原创性科研的原创性叶绿素叶绿素A,叶绿素叶绿素B,叶黄素和胡萝卜素叶黄素和胡萝卜素: 叶绿素叶绿素电子计算机电子计算机/电脑电脑;红楼梦现象红楼梦现象;沙漠治理沙漠治理;瓶子盛水插枝瓶子盛水插枝;按流动相状态分为气相色谱和液相色谱按流动相状态分为气相色谱和液相色谱气相色谱仪气相色谱仪Gas Chromatography可以放实验可以放实验CAI中的录象，事先试电脑中的

2、录象，事先试电脑高效液相色谱法高效液相色谱法High Performance Liquid Chromatography HPLC概述概述 高效液相色谱法（高效液相色谱法（HPLCHPLC）是）是2020世纪世纪6060年代末年代末7070年代初发展起来的一种新型分离分析年代初发展起来的一种新型分离分析技术，随着不断改进与发展，目前已成为应用技术，随着不断改进与发展，目前已成为应用极为广泛的化学分离分析的重要手段。它是在极为广泛的化学分离分析的重要手段。它是在经典液相色谱基础上，引入了气相色谱的理论，经典液相色谱基础上，引入了气相色谱的理论，在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏在技术上采用

3、了高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器，因而具备速度快、效率高、灵敏度度检测器，因而具备速度快、效率高、灵敏度高、操作自动化的特点。高、操作自动化的特点。高效液相色谱法与气相色谱法高效液相色谱法与气相色谱法 （l l）气相色谱法分析对象只限于分析气体和）气相色谱法分析对象只限于分析气体和沸点较低的化合物，它们仅占有机物总数的沸点较低的化合物，它们仅占有机物总数的2020。对于占有机物总数近。对于占有机物总数近8080的那些高沸点、的那些高沸点、热稳定性差、摩尔质量大的物质，目前主要采热稳定性差、摩尔质量大的物质，目前主要采用高效液相色谱法进行分离和分析。用高效液相色谱法进行分离和分析。 (2)(

4、2)气相色谱采用流动相是惰性气体，它对气相色谱采用流动相是惰性气体，它对组分没有亲和力，即不产生相互作用力，仅起组分没有亲和力，即不产生相互作用力，仅起运载作用。而高效液相色谱法中流动相可选用运载作用。而高效液相色谱法中流动相可选用不同极性的液体，选择余地大，它对组分可产不同极性的液体，选择余地大，它对组分可产生一定亲和力，并参与固定相对组分作用的剧生一定亲和力，并参与固定相对组分作用的剧烈竞争。因此，流动相对分离起很大作用，相烈竞争。因此，流动相对分离起很大作用，相当于增加了一个控制和改进分离条件的参数，当于增加了一个控制和改进分离条件的参数，这为选择最佳分离条件提供了极大方便。这为选择最佳

5、分离条件提供了极大方便。HPLC流出体积流出体积:检测到某种成分时流出的流动相的体积检测到某种成分时流出的流动相的体积其它条件固定其它条件固定,对某物质有特定值对某物质有特定值按原理分类按原理分类:吸附色谱吸附色谱:分配色谱分配色谱:分配定律分配定律离子交换色谱离子交换色谱:亲和色谱亲和色谱:利用生物的特异性利用生物的特异性凝胶凝胶(过滤过滤)色谱：色谱：Gel Chromatography根据多孔型凝胶网眼孔径的不同将物质进根据多孔型凝胶网眼孔径的不同将物质进行分离行分离.亲和色谱亲和色谱凝胶色谱凝胶色谱凝胶色谱凝胶色谱 Gel Chromatography流出体积流出体积V:检测到某种成分时流出的流动相的体积检测到某种成分时流出的流动相的体积其它条件固定其它条件固定,对某物质有特定值对某物质有特定值.例如例如,有些体系有些体系V与分子量存在一定关系与分子量存在一定关系VbaMlnln 或者或者bVaM lna,b为