肢体远端缺血预处理对大鼠心

1、肢体远端缺血预处理对大鼠心肢体远端缺血预处理对大鼠心肌细胞线粒体膜通透性转换孔肌细胞线粒体膜通透性转换孔开放的影响开放的影响基础医学系01系第1组沈方 许震宇 沈倩 l缺血预处理是对心肌预先短暂缺血复灌几个循环后，缺血预处理是对心肌预先短暂缺血复灌几个循环后，心肌可以耐受随后较长时间缺血的现象心肌可以耐受随后较长时间缺血的现象l心脏外脏器的短暂缺血可以在一定程度上使心脏耐受心脏外脏器的短暂缺血可以在一定程度上使心脏耐受缺血，缓解缺血对心脏的损害，这种现象被称为远距缺血，缓解缺血对心脏的损害，这种现象被称为远距离预处理离预处理l线粒体在细胞死亡的调控中扮演重要角色，线粒体膜线粒体在细胞死亡的调控

2、中扮演重要角色，线粒体膜通透性转换孔是调控细胞死亡的重要结构基础通透性转换孔是调控细胞死亡的重要结构基础目的目的远距离预处理远距离预处理MPTP的开放的开放心肌保护心肌保护 ？方法方法远距离预处理模型建立远距离预处理模型建立 在体心肌缺血再灌注损伤在体心肌缺血再灌注损伤离体心脏灌流离体心脏灌流心肌线粒体的制备与心肌线粒体的制备与MPTP开放的检测开放的检测远距离预处理模型建立远距离预处理模型建立l雄性雄性SDSD大鼠水合氯醛腹腔麻醉大鼠水合氯醛腹腔麻醉l分离双下肢股动脉分离双下肢股动脉l微血管钳钳夹微血管钳钳夹5min5min，造成双下肢缺血，造成双下肢缺血l松开松开5min5min，恢复双下

3、肢血液灌流，恢复双下肢血液灌流l以上步骤重复以上步骤重复3 3次次在体心肌缺血再灌注损伤在体心肌缺血再灌注损伤l缺血再灌注模型建立：左冠状动脉结扎，收紧缺血再灌注模型建立：左冠状动脉结扎，收紧结扎线，造成缺血结扎线，造成缺血40min40min，放松结扎线后行再，放松结扎线后行再灌注灌注180min180minl心肌梗死范围的测定心肌梗死范围的测定 ：EvanEvan蓝蓝 TTC TTC 染色染色l生化指标测定：血清丙二醛与超氧化物歧化酶生化指标测定：血清丙二醛与超氧化物歧化酶离体心脏灌流离体心脏灌流 l头部击昏，迅速开胸，取出心脏头部击昏，迅速开胸，取出心脏 l主动脉套上主动脉套上Lange

4、ndorff心脏灌流装置，以新心脏灌流装置，以新鲜鲜K-H液逆行恒压灌流心脏液逆行恒压灌流心脏 l记录左室功能指标：左室收缩压与左心室内压记录左室功能指标：左室收缩压与左心室内压力最大上升速率力最大上升速率l停搏液灌流停搏液灌流30min30min 心肌线粒体制备与检测线粒体心肌线粒体制备与检测线粒体PTP开放开放l剪取心室肌，充分剪碎、匀浆，采用差速离心剪取心室肌，充分剪碎、匀浆，采用差速离心法分离线粒体法分离线粒体lBradfordBradford法蛋白定量法蛋白定量l分光光度仪检测线粒体在分光光度仪检测线粒体在540nm540nm处吸光度的变处吸光度的变化来测定化来测定PTPPTP开放开放 预期结果预期结果l远距离预处理减轻缺血再灌注损伤？远距离预处理减轻缺血再灌注损伤？l远距离预处理改善左心室功能？远距离预处理改善左心室功能？l远距离预处理抑制线粒体远距离预处理