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文档简介

1、核酸的化学一、是非题1 .喋吟碱分子中含有喀咤碱结构。2 .核昔由碱基和核糖以(3型的CN糖昔键相连。3 .核甘酸是由核甘与磷酸脱水缩合而成,所以说核甘酸是核甘的磷酸酯。4 .核甘酸的碱基和糖相连的糖昔键是CO型。5 .核糖与脱氧核糖的差别是糖环的2'位有无羟基。6 .核甘酸的等电点的大小取决于核糖上的羟基与磷酸基的解离。7 .在DNA双链之间,碱基配对A-T形成两对氢键,C-G形成三对氢键,若胸腺喀咤C-2位的玻基上的氧原于质子化形成OH,A-T之间也可形成三对氢键。8 .任何一条DNA片段中,碱基的含量都是A=T,C=G。9 .DNA碱基摩尔比规律仅适令于双链而不适合于单链。10

2、.用二苯胺法测定DNA含量必须用同源的DNA作标准样品。11 .DNA变性后就由双螺旋结构变成线团结构。12 .Tin值低的DNA分子中(AT)%高。13 .Tin值高的DNA分子中(C-G)%高。14 .由于RNA不是双链,因此所有的RNA分子中都没有双螺旋结构。15 .起始浓度高、含重复序列多的DNA片段复性速度快。16 .DNA的复制和转录部必须根据碱基配对的原则。17 .某氨基酸tRNA反密码子为GUC,在mRNA上相对应的密码子应该是CAG。18 .细胞内DNA的核甘酸顺序都不是随机的而是由遗传性决定的。19 .RNA链的5'核甘酸的3'羟基与相邻核昔酸的5'

3、羟基以磷酸二酯键相连。20 .假如某DNA样品当温度升高到一定程度时,OD260提高30%,说明它是一条双链DNA。21 .核酸外切酶能够降解所有的病毒DNA。二、填空题1 .核甘酸是由、和磷酸基连接而成。2 .在各种RNA中含稀有碱基最多。3 .Tm值高的DNA分子中的%含量高。Tm值低的DNA分子中%含量高。4 .真核生物的DNA存在于,其生物学作用是5 .细胞内所有的RNA的核甘酸顺序都是由它们的决定的。6 .将双链DNA放置在pH2以下或pH12以上,其OD260在同样条件下单链DNA的OD260°7 .B型结构的DNA双螺旋,两条链是平行,其螺距为每个螺旋的碱基数为。8 .

4、DNA抗碱的原因是。9 .将A、U、C和G四种核甘酸溶解在pH3.5的缓冲液中,从负极向正极进行电泳,跑得最快,跑得最慢。10 .从E.coli中分离的DNA样品内含有20%的腺喋吟(A),那么T=%,G+C=%。11 .某DNA片段的碱基顺序为GCTACTAAGC,它的互补链顺序应为。12 .具有高度重复序列的DNA片段,如,具有中度重复序列的DNA片段,如和的基因,真核细胞的结构基因是序列。13 .当温度逐渐升到一定高度时,DNA双链称为变性。当温度逐渐降低时,DNA的两条链,称为。11.DNA的复性速度与、以及DNA片段的大小有关。15 .天然DNA的负超螺旋是由于DNA双螺旋中两条链引

5、起的,为一手超螺旋。正超螺旋是由于DNA双螺旋中两条链引起的,为手超螺旋。16 .tRNA的二级结构呈形,三级结构的形状像三、选择题1 .DNA的Tm与介质的离子强度有关,所以DNA制品应保存在:A、高浓度的缓冲液中B、低浓度的缓冲液中C、纯水中D、有机试剂中2 .在以下的修饰碱基中哪种在氢键的形成方面不同于和它相关的碱基:A、2-甲基腺喋吟B、5-甲基胞喀咤C、5-羟甲基胞噂陵D、1-甲基鸟瞟吟3 .热变性后的DNA:A、紫外吸收增加B、磷酸二酯键断裂C、形成三股螺旋D、(G-C)%含量增加4 .DNA分子中的共价键有:A、碱基与脱氧核糖1位碳(C-1')之间的糖昔键。B、磷酸与脱氧

6、核糖2位碳上的羟基(2'-OH)之间的酯键。C、碱基与脱氧核糖2位碳(C-2')之间的糖音键。D、磷酸与脱氧核糖1位碳上的羟基(2'-OH)之间的酯键。5 .发生热变性后的DNA复性速度与:A、DNA的原始浓度有关。B、催化复性的酶活性有关。C、与DNA的长短无关。D、与DNA分子中的重复序列无关6 .下面关于核酸的叙述除哪个外都是正确的:A、在喋吟和喀咤碱之间存在着碱基配对。B、当胸腺喀咤与腺喋吟配对时,甲基不影响氢键形成。C、碱溶液只能水解RNA,不能水解DNA。D、在DNA分子中由氢键连接的碱基平面与螺旋轴平行。7 .下列过程与DNA的人工克隆无关的是:A、用专一

7、性的限制性内切酶在特定的互补位点切割质粒DNA和供体B、通过连接酶催化质粒DNA与供体DNA接合。C、将重组后的DNA通过结合反应引入寄主细胞。D、常常根据载体所具有的抗药性来筛选含有重组DNA的细菌。8 .核酸分子中的共价键包括:A、喋吟碱基第9位N与核糖第1位C之间连接的(3-糖昔键B、磷酸与磷酸之间的磷酸酯键C、磷酸与核糖第1位C之间连接的磷酸酯键D、核糖与核糖之间连接的糖昔键9 .下列哪种物质不是由核酸与蛋白质结合而成的复合物:A、病毒B、核糖体C、E.coli的蛋白质生物合成70S起始物D、线粒体内膜10 .下列关于核糖体的叙述正确的是:A、大小亚基紧密结合任何时候都不分开。B、细胞

8、内有游离的也有与内质网结合的核糖体。C、核糖体是一个完整的转录单位。D、核糖体由两个相同的亚基组成。11 .Crick的摆动假说较好的描述了:A、密码子的第三位变动不影响与反密码子的正确配对。B、新生肽链在核糖体上的延长机理。C、由链霉素引起的翻译错误。D、溶原性噬菌体经过诱导可变成烈性噬菌体。12 .分离出某种病毒核酸的碱基组成为:A=27%,G=30%,C=22%,T=21%,该病毒应该为:A、单链DNAB、双链DNAC、单链RNAD、双链RNA四、问答与计算:1,用RNaseT限制降解tRNA得到一个长度为13个核甘酸的片段,再用RNaseT1完全降解得到下列产物:(a)ApCpApGp

9、;(b)pGp;(c)ApCpU;(d)ApApUpApGp。用RNasecI完全降解得到下列产物:(a)ApGpApApUp;(b)pGpApCp;(c)U;(d)ApGpApCp,请写出该片段的顺序。2.某一寡聚十六核甘酸,用RNaseT1降解得到:(a)ApUpUpCpCpGp;(b)ApCpUpCpGp;(c)pUpCpCpA;(d)Gp各一分子。用RNaseA降解得到:(a)1ApUp;(b)1GpGpApCp;(c)GpUp;(d)5Cp;(e)2Up;(f)1A请写出该片段的顺序。3 .根据下列性质判断某一均匀的DNA样品应有的结构:(a)可与甲醛进行反应,并且能作为DNA聚合酶

10、的模板、热变性时A260增加;(b)可与硝化纤维膜结合;(c)在高离子强度介质中的沉降系数比在低离于强度介质中稍高;(d)变性时在CsCI中的浮力密度增加约0.011"cm3;(e)变性后经区带离心得到A和B两个片段。A被切开一个缺口产生C,在高离子强度介质中,C与A的沉降系数相等,在低离子强度的介质中比A低,无论在哪种情况下,C均比B高。4 .DNA样品在水浴中加热到一定温度,然后冷至室温测其OD260,请问在下列情况下加热与退火前后OD260的变化如何?(a)加热的温度接近该DNA的Tm值;(b)加热的温度远远超过该DNA的Tm值。5 .有一核酸溶液通过实验得到下列结果:(a)加

11、热使温度升高.该溶液的紫外吸收增加。迅速冷却紫外吸收没有明显的下降;(b)经CsCI梯度离心后,核酸位于1.77g/ml溶液层。(c)核酸经热变性后迅速冷却再离心,原来的浮力密度=1.77g/ml的区带消失,新带在p=1.72g/ml出现。此带的紫外吸收只有原来的一半。将离心管里的组分重新混合,通过适当温度处理进行退火,再离心后新带消失,p=1.77g/ml的原带又重新出现了。具紫外吸收与变性前相同。(d)用提高pH12然后中和到7的方法代替热变性重复(c)步骤,得到与(c)步骤的第一次离心后相同的结果,但经退火处理后p=1.72g/ml的区带不消失。根据以上现象推断该核酸样品的结构。6 .如

12、果E.coli染色体DNA的75%用来编码蛋白质.假定蛋白质的平均分子量为60X103O请问:若E.coli染色体大约能编码2000种蛋白质。求该染色体DNA的长度是多小?该染色体DNA的分子量大约是多少?(以三个碱基编码一个氨基酸,氨基酸平均分子量为120u,核甘酸平均均分子量为640计算。)7 .假定每个基因有900对核甘酸,并且有三分之一的DNA不编码蛋白质,人的一个体细胞(DNA量为6.4X109对核昔酸),有多少个基因?如果人体有1013个细胞.那么人体DNA的总长度是多少千米?等于地球与太阳之间距离(2.2X109千米)的多少倍?8 .根据同源蛋白质的知识,说明为什么编码同源蛋白质

13、的基因(DNA片段)可以杂交?9 .有一噬菌体的突变株其DNA长度为15m,而野生型的DNA长度为17m,问该突变株的DNA中有多少个碱基缺失?10 .用RNases降解纯tRNA样品获得一条寡核甘酸片段,用蛇毒磷酸二酯酶完全水解。可产生pA,pC,pU和U,其比例是1:2:1:1,根据这一信息和tRNA3'端的特点能否推断tRNA3'端的核百酸顺序11 .解释下列名词:(1)稀有碱基;(2)DNA超螺旋;u)DNA的增色和减色效应;(4)mRNA的帽子结构;(5)反密码子。答案一、是非题1对。2对。3对。4错。S对。6错。7错.8错。9对。10错。11对。12对。13对。14

14、错。15对。16对。17错。18对。19对。20对。21错。二、填空题1 .碱基核糖2 .tRNA3 .(G-C)(A-T)4 .核内携带遗传信息5 .基因6 .高不变7 .反向平行5.4urn108 .脱氧核糖的第2位碳原子上没有羟基,不利于碱(-OH)作用使磷酸二酯键断裂。9 .UA10 206011 GCTTAGTAGC12.卫星DNAtRNArRNA单拷贝(不重复)13 .解开重新结合复性14 .起始浓度重复序列多少15 .松弛(少绕)右扭紧(多绕)左16 .三叶草倒L形三、选择题1.A2,D3.A4.A5.A6.D7.B8.A9.D10.D11.A12A四、问答与计算1 .根据RNa

15、seT1降解RNA生成Gp或以Gp为3'-末端寡核甘酸片段的特性,pGp为该片段的5'-末端,ApCpU为3'-末端。根据RNaseI降解RNA生成Cp,Up或以Cp,Up为3'-末端寡核甘酸片段的特性,GpApCp为5'-末端,U为3'-末端。将两种酶降解的片段叠加,可得该片段的全部顺序为:pGpApCpApGpApApUpApGpApCpU2 .根据RNaseT1特异性地降解G与相邻核甘酸之间的磷酸二酯键生成Gp或以Gp为3'-末端寡核甘酸片段的特性,以及根据RNaseA特异性地降解C和U与相邻核甘酸之间的磷酸二酯键生成Cp、Up,或

16、以Cp、Up为3'-末端寡核甘酸片段的特性,将两种酶降解的片段叠加,可得该片段的全部顺序为:ApUpUpCpCpGpGpApCpUpCpGpUpCpCpA3 .根据DNA结构鉴定的一般标准,可判断DNA样品是一个由一条环状单链A和一条线状单链B组成的环状DNA分子,B链的长度短于A,所以该环状DNA分子具有部分单链。实验数据也表明该DNA分子具有单链性质(a,b,d,e,f)。由e可知A为环状单链,只有这样,在被切开一个切口时,才能产生与其沉降系数接近的线状单链Co由于C的沉降系数B,A的长度B,所以A与B形成环状分子,除A与B互补双链外,还有A剩余部分的单链。4 .(a)加热的温度接

17、近该DNA的Tm值,开始退火复性后的A260与变性前应完全相同,因为在接近Tm值的温度时,DNA的两条链并未完全分开,所以复性可以达到与变性前相同的程度。(b)加热的温度远远超过该DNA的Tm值,退火复性后的A260比变性前高,因为在远远超过Tm值的温度时,DNA的两条链完全分开复性不容易达到与变性前相同的程度。5 .(a)紫外吸收随温度升高而增大,迅速冷却后,紫外吸收并不降低说明此样品分子为含氢键丰富的双键结构。(b)经CsCL密度梯度离心后,p值较高,表明此样品中除DNA片段外,还有RNA片段。(c)热变性后迅速离心,重新离心出现新带,这说明两条链的p值不同,一条p-1.720是DNA的特

18、征带,另一条值1.80,由于密度太大,离心时不能形成区带,但此链仍然完整存在,退火后重新出现就是证据。(d)双链中p值大的一条链被碱降解说明此链是RNA。综上所述,此核酸样品是由一条DNA片段和一条RNA片段形成的杂交分子。6 .设E.coli染色体应有的碱基为x,编码蛋白质的基因片段中应有的碱基对数为:3X2000X60000/120=3x106=0.75xx=3X106/0.75=4X106(碱基对)染色体的长度=0.34nmX4X106=1.36X106nm。染色体DNA的分子量=640X4X106=2.56X109u7 .每个体细胞中有:(6.4X109-6.4X109X1/3)/90

19、0=4.72X106(个基因)每个体细胞中DNA的长度:6.4X109X0.34nm=2.2X109nm=2.2km人体内DNA的总长度:2.2X1013千米等于地球与太阳之间距离的:(2.2X1013)/(2.2X109)=104倍8 .同源蛋白质是指来源不同的同一种蛋白质,它们具有基本相同的氨基酸序列,所以它们的基因具有相同的核着酸序列。当将带有同源蛋白质基因的*N八片段,进行杂交时.形成杂交分子的机会就比较多。9 .显然,突变株的DNA比正常株的DNA短2m2wm=2Xl04?,2X104/3.4=5.88X103所以大约有5.88X103个碱基对缺失。10 .tRNA的功能是在蛋白质生物合成的过程中,转运氨基酸到核糖体参与肽链的形成。其3'-端有一共同的序列是CCA,根据蛇毒磷酸二酯酶的水解产物可以推断该tRNA经RNaseT1降解的寡核甘酸片段顺序为UpUpCpCpA16.解释名词:(l)稀有碱基又称修饰碱基,这些碱基在核酸分子中含量比较少,但它们是天然存在不是人工合成的,

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