地中海贫血及新生儿筛查检测项目

1、地中海贫血及新生儿筛查检测项目第1页/共33页第2页/共33页地贫难治但可防！地贫难治但可防！把住把住“三关三关”- -婚检、孕检和产检婚检、孕检和产检第3页/共33页地区携带率（%）地贫地贫合计广西17.66.424.0云南9.87.317.1海南12.72.715.4广东8.52.511.0贵州4.25.19.3江西（南部）3.52.96.4福建4.11.55.6湖南2.22.04.2四川1.92.24.1重庆1.02.33.3J Clin Pathol, 2004; Clin Genet, 2010; 中华医学遗传学杂志, 2012.第4页/共33页基因类型基因类型临床类型临床类型症状症

2、状/正常人-/或T/静止型无症状-/、-/T或T/T或-/-轻型（标准型）轻度贫血-/-或-/T血红蛋白H病溶血性贫血-/-Hb Barts胎儿水肿综合征胎儿水肿- a a3.7 - a a4.24.2 a a2 2Ta a1 1 - - - -第5页/共33页基因类型基因类型基因产物基因产物临床类型临床类型临床表现临床表现+/A、0/A能合成适量的链静止性及轻型地贫贫血不明显或轻度贫血+/ +变异型纯合子链部分合成中间型地贫介于重型和轻型之间（不需输血）+/+、0/0、 +/0链几乎不能合成链合成相对增加Hb F和Hb A2增加重型地贫地中海贫血面容溶血性贫血（需输血）+ 0第6页/共33页

3、突变种类发生区域致病原理突变类型表型转录突变起始位点上游启动子TATA框使转录效率降低，mRNA生成量减少而产生的+地贫-28 (A -G) +-29 (A-G)+RNA加工突变非编码区IVS-1和IVS-2影响mRNA剪切等加工过程不能准确进行形成异常的mRNA，导致0或+地贫IVS-1 nt 1 (G-T)0IVS-1 nt 5 (G-C)+IVS-2 nt 654 (C-T)+RNA裂解部位（加帽部位）由于异常的RNA加帽部位突变，影响RNA转录后不能准确裂解，产生不稳定的mRNA，使正常链生成减少引起+地贫CapM (-AAAC)+编码区外显子突变引起相邻裂解信号被激活，影响IVS正常

4、位点的剪接，生成异常mRNA，产生Hb ECD26/eM (G-A)Hb E翻译突变编码区导致生成的mRNA稳定性降低，或形成无功能的mRNA，从而不能合成正常的珠蛋白链，多数为0地贫起始密码突变IntM (T-G)0无义突变CD17 (A-T)0CD43 (G-T)0移码突变CDs14/15 (+C)0CDs27/28 (+C)0CDs31 (-C)0CDs41/42 (-TCTT)0CDs71/72 (+A)0第7页/共33页自主研发自主研发的导流杂交技术平台，的导流杂交技术平台，两项两项美国专利美国专利第8页/共33页v 本试剂盒用于可以快速准确同步诊断中国人常见的3种缺失型-地中海贫血

5、（-SEA、-3.7 和 -4.2）和3种突变型（CS、QS、WS）及-地中海贫血15个突变位点（16种突变类型）, 分别为：【IVS-II-654(C-T)、-28(A-G)、-29(A-G)、CD14/15（+G）、CD17(A-T)、CD27/28（+C）、E(G-A) 、CD41/42 (-TTCT)、CD43(G-T)、CD71/72(+A)、IVS-I-1(G-T, G-A)、 IVS-I-5(G-C)、Cap(-AAAC)、Int（T-G）、CD31(-C)】。第9页/共33页v EDTA或枸橼酸钠抗凝全血样本v 羊水样本v 滤纸血斑（采集卡）样本v 绒毛膜样本第10页/共33页

6、第11页/共33页41-42N17N654N71-72N-28NeN41-42M17M654M71-72M-28MeM43M14-15MIVSI-1MIVSI-5M-29MCapMNPCSNQSN3.7WSMIntMSEACSMQSM4.231M27-28M注：NP指染色体上基因的正常对照；-28M、-29M均以28N为正常对照；14-15M、17M以17N为正常对照；41-42M、43M以41-42N为正常对照；QSM、 WSM以QSN为正常对照； EM,654M,71-72M, CSM 分别以EN, 654N, 71-72N，CSN为正常对照；IVS-1M, IVS1-5M、31M、Cap

7、M、IntM、 27-28M未设正常对照。第12页/共33页 -SEA/ N /N-SEA/-4.2 N/N/ QS N /N-SEA / QS N/N/ 41-42/N/ 41-42/41-42 / 41-42/ 654 -SEA/ 41-42 /N第13页/共33页 第14页/共33页人群筛查夫妻双方血常规结果MCV小于82fl免费地贫基因检测v 项目去年8月启动，11月开始送样，迄今为止，已经有近3500对夫妇接受了免费的地贫基因检测，其中38%的家庭需要进行遗传咨询以及产前检测跟踪。v 发现了稀有的HK型地贫以及稀有型别的地贫， 数据还在进一步整理中。第15页/共33页第16页/共33

8、页第17页/共33页第18页/共33页第19页/共33页葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症是最常见的一种遗传性酶缺乏病,俗称蚕豆病。我国是本病的高发区之一，主要分布在长江以南各省，以海南、广东、广西、云南、贵州、四川等省为高。G6PD缺乏症发病原因是由于G6PD基因突变，导致该酶活性降低，红细胞不能抵抗氧化损伤而遭受破坏，引起溶血性贫血。临床表现为慢性非球形细胞溶血性贫血、蚕豆病、药物性溶血、新生儿黄疸及某些感染性溶血。 本试剂盒针对人外周血样本，用于检测中国人常见的13个G6PD基因突变位点。可以对G6PD缺陷相关疾病进行辅助诊断，指导临床药物使用，指导饮食生活习惯，预防溶血的发生。为

9、优生优育提供疾病的遗传特性分析，预测胎儿患病风险；可用于新生儿G6PD筛查和辅助诊断，预防新生儿黄疸。第20页/共33页95N392N493N592N871N95M392M493M592M871M1004N1024N1311N1360N1376/1381N1004M1024M1311M1360M1376M1381M1387/1388N1387M1388M-注：上表中95N, 392N, 493N, 592N, 871N, 1004N, 1024N, 1311N, 1360N分别为相应位点95M, 392M, 493M, 592M, 871M, 1004M, 1024M, 1311M, 1360

10、M的正常对照。 1376/1381N为1376M，1381M的正常对照， 1387/1388N为1387M和1388M的正常对照。第21页/共33页正常样本 95M 杂合子95M 纯合子392M 杂合子392M 纯合子1388M 杂合子第22页/共33页耳聋是一种严重影响人类生活质量的常见先天性疾病，它可以由单一基因突变或不同基因的复合突变引起，也可由环境因素（如医疗因素，环境暴露，创伤，药物等）或基因和环境两者共同作用而致。在中国，先天耳聋的发病率约占中国聋人的50%，而遗传聋约占先天聋的85%，其大多数为常染色体隐性遗传。我国遗传性耳聋患者所涉及的主要是线粒体DNA（mtDNA）、SLC2

11、6A4、GJB2和GJB3四种基因的突变。其中，mtDNA基因突变主要包括1494M、1555M、7445M和12201M；SLC26A4基因突变主要包括IVS-M、1229M、2168M；GJB2基因突变主要包括35M、155M、176M、235M和299M；GJB3突变主要以538M为主。本试剂盒针对人外周血样本，用于检测中国人常见的4个耳聋相关基因（GJB2, GJB3, SLC26A4和12S rRNA）的13个突变热点。每个样品需做A组和B组、两个多重PCR反应。可用于耳聋患者的病因诊断、遗传咨询、产前诊断和新生儿听力筛查，还可以帮助和提醒医生慎重使用特定种类的抗生素以避免造成携带基

12、因突变的儿童致聋。 第23页/共33页第24页/共33页Biotin35N155N176N235N299N-35M155M176M235M299M1494N1555N7445NG3538NIVS7NS2168N1494M1555M7445MG3538MIVS7MS2168MS1229NS1229MS12201NS12201M正常样本 1494M纯合子1555M纯合子第25页/共33页第26页/共33页基因类型基因类型基因产物基因产物临床类型临床类型临床表现临床表现+/A、0/A能合成适量的链静止性及轻型地贫贫血不明显或轻度贫血+/ +变异型纯合子链部分合成中间型地贫介于重型和轻型之间（不需输血）+/+、0/0、 +/0链几乎不能合成链合成相对增加Hb F和Hb A2增加重型地贫地中海贫血面容溶血性贫血（需输血）+ 0第27页/共33页基因类型基因类型基因产物基因产物临床类型临床类型临床表现临床表现+/A、0/A能合成适量的链静止性及轻型地贫贫血不明显或轻度贫血+/ +变异型纯合子链部分合成中间型地贫介于重型和轻型之间（不需输血）+/+、0