酶促反应动力学

1、酶促反应动力学生化试验设计温度对唾液淀粉酶活性的影响温度对唾液淀粉酶活性的影响实验设计实验设计1.全部试管均加相同的PBS和Nacl是为了营造共同的环境，减少误差 2.加入碘的量比淀粉少是为了避免因碘 的量太大而掩饰溶液颜色的变化过程 3，加入的酶的量比淀粉少是因为避免酶的浓度太高而导致反应太快，计时的误差变大同时在试管1 3 51 3 5中取1ml1ml溶液到白瓷比色板中进行颜色比较，定性观察温度对酶的活性的影响3分钟后同时在2 4 6试管中取1ml溶液，同时加到相应的试管中，并开始记录时间2分钟后当每只试管的颜色变为无色时，记录下相应试管的反应时间根据时间的长短，来判断温度对酶活性的影响琥

2、珀酸脱氢酶的竞争性抑制实验设计琥珀酸脱氢酶是哪个代谢途径中的酶，该酶位于细胞的什琥珀酸脱氢酶是哪个代谢途径中的酶，该酶位于细胞的什么部位？催化什么化学反应？么部位？催化什么化学反应？什么是什么是竞争性抑制？本次试验中选择的抑制剂是什么？如竞争性抑制？本次试验中选择的抑制剂是什么？如何设计实验方案检测该酶被抑制的程度？何设计实验方案检测该酶被抑制的程度？实验原理竞争性抑制是指竞争性抑制是指分子结构与底物相似分子结构与底物相似的抑制剂的抑制剂，可与底物可与底物竞争性竞争性的的结合酶的结合酶的活性中心活性中心，抑制酶的活性。竞争性抑制，抑制酶的活性。竞争性抑制剂的抑制程度取决于抑制剂与酶的亲和力及于

3、底物的相对剂的抑制程度取决于抑制剂与酶的亲和力及于底物的相对比例。比例。草酸草酸与与琥珀酸琥珀酸分子结构相似，是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑分子结构相似，是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂。琥珀酸脱氢酶催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸。在体制剂。琥珀酸脱氢酶催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸。在体内琥珀酸脱下的内琥珀酸脱下的2个个H经电子传递链传递，最后与氧结合生经电子传递链传递，最后与氧结合生成水，并释放能量。在体外则可用甲稀兰作为受成水，并释放能量。在体外则可用甲稀兰作为受H体，甲体，甲稀兰接受琥珀酸脱下的稀兰接受琥珀酸脱下的2个个H而被还原为甲白，而被还原为甲白，由蓝色变为由蓝色变为无色无色。在。在甲稀兰含量一定

4、甲稀兰含量一定的条件下，的条件下，蓝色消退的快慢程度蓝色消退的快慢程度可指示琥珀酸脱氢可指示琥珀酸脱氢酶的活性酶的活性。因此，可以依据蓝色消退的因此，可以依据蓝色消退的时间来判断该酶活性被抑制的程度。时间来判断该酶活性被抑制的程度。实验器材与试剂器材器材:小白鼠，研钵，手术剪，手术镊子，小白鼠，研钵，手术剪，手术镊子，2ml移液管，移液管，10ml离心管，低速离心机离心管，低速离心机试剂试剂 :pH7.4磷酸缓冲液磷酸缓冲液 0.25%琥珀酸钠溶液琥珀酸钠溶液 0.5%草酸钠溶液草酸钠溶液 0.01%甲稀兰溶液甲稀兰溶液 生理盐水生理盐水实验步骤1、肝糜液的制备： 用颈椎脱臼法处死小白鼠，立即剖腹将肝脏全部取出，用生理盐水洗净肝脏，充分研碎至糊状，然后分批加入少量磷酸缓冲液，边加边磨，总共加入7ml，搅拌后离心约5分钟（3000rpm）,将上清液倒入另一试管钟备用，此即为含有琥珀酸脱氢酶的肝糜液2、另取五支试管编号，按表操作3