叶绿体中色素的提取和分离

1、【实 验】叶绿体中色素的提取和分离叶绿体中色素的提取和分离 主讲人：赵午平主讲人：赵午平 色素的提取和分离实验一、实验目的v 进行绿叶中色素的提取和分离v 探究绿叶中含有色素种类数目和颜色v 培养合作和严谨的科学精神 色素的提取和分离实验二、实验原理v提取提取：叶绿体色素易溶于无水乙醇（酒精、汽油、苯、石油醚等）等有机溶剂中，可以用无水乙醇提取绿叶中的叶绿体色素。v分离分离：纸层析法 不同的叶绿体色素随层析液在滤纸上扩散速度不同。不同的色素会在扩散过程中分离开来，形成条带。 色素的提取和分离实验三、实验材料【实验材料实验材料】：新鲜新鲜菠菜绿叶菠菜绿叶【实验药品实验药品】：层析液（石油醚：丙酮

2、：苯层析液（石油醚：丙酮：苯=20:2:1=20:2:1），无水乙醇，），无水乙醇，SiOSiO2 2，碳酸钙，碳酸钙【实验用具实验用具】：研钵研钵，药匙，纱布，小烧杯，量筒（，药匙，纱布，小烧杯，量筒（1010mLmL），），玻璃漏斗，干燥滤纸玻璃漏斗，干燥滤纸， 剪刀，试管，毛细吸管，棉塞剪刀，试管，毛细吸管，棉塞, ,天平，天平，铅笔铅笔色素的提取和分离实验提取叶绿体色素v取材取材：取新鲜菠菜叶取新鲜菠菜叶5g5g，撕去叶脉，尽量剪碎，放入研，撕去叶脉，尽量剪碎，放入研钵。钵。v研磨：研磨：向研钵中放入少量向研钵中放入少量石英砂石英砂和和碳酸钙碳酸钙（量约为药匙（量约为药匙的的1/31/

3、3），加入），加入1010mlml无水乙醇无水乙醇，充分、迅速地研磨至匀，充分、迅速地研磨至匀浆状态。浆状态。v过滤：过滤：在小烧杯上放上在小烧杯上放上4 4层纱布，将研磨液倒入小烧杯，层纱布，将研磨液倒入小烧杯，过滤制备得到滤液。过滤制备得到滤液。四、实验步骤 实验步骤实验步骤1. 提取叶绿素提取叶绿素色素的提取和分离实验v制备滤纸条制备滤纸条：将干燥的定性滤纸剪成长与宽略小将干燥的定性滤纸剪成长与宽略小于试管长与宽的滤纸条，将其一端剪去两个角，于试管长与宽的滤纸条，将其一端剪去两个角，并在距这一端并在距这一端1cm1cm处用铅笔划线。处用铅笔划线。v画滤液细线画滤液细线：用毛细吸管吸取少量

4、滤液，用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔沿铅笔线均匀画出细线线均匀画出细线（细而齐）（细而齐）。待滤液干后，。待滤液干后，重复重复画线画线3-43-4次次。分离叶绿体色素四、实验步骤色素的提取和分离实验v固定装置：固定装置：将适量的层析液倒入试管中，将适量的层析液倒入试管中，将画好线的滤纸条将画好线的滤纸条插入层析液中插入层析液中，用棉，用棉塞塞塞紧试管口塞紧试管口。v观察现象观察现象：10min10min后，将滤纸条取出，风干。后，将滤纸条取出，风干。观察色素带及其颜色，作好记录。观察色素带及其颜色，作好记录。分离叶绿体色素四、实验步骤1 1、选材时应注意选择、选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆

5、鲜嫩、色浓绿、无浆汁汁的菠菜叶片。的菠菜叶片。2 2、研磨要、研磨要快快，收集的滤液要用，收集的滤液要用棉塞塞住棉塞塞住，层析时要加盖，尽量减少有机溶剂的挥层析时要加盖，尽量减少有机溶剂的挥发。（无水乙醇和层析液都易挥发、易发。（无水乙醇和层析液都易挥发、易燃且有一定毒性）燃且有一定毒性）3 3、每次点样前要把烧杯中的滤液、每次点样前要把烧杯中的滤液摇匀摇匀。五、注意事项色素的提取和分离实验五、注意事项4 4、尽量避免手上的杂质沾到滤纸条上。、尽量避免手上的杂质沾到滤纸条上。5 5、实验时保持、实验时保持通风，安全通风，安全操作操作6 6、实验注重团队、实验注重团队合作合作，组员们共同完成实验。，组员们共同完成实验。六、实验结果叶绿素的提取与分离七、实验总结最宽（最多）：叶绿素最宽（最多）：叶绿素a最窄（最少）：胡萝卜素最窄（最少）：胡萝卜素相邻距离最近：叶绿相邻距离最近：叶绿素素a和叶绿素和叶绿素b色素在滤纸上自上而下分色素在滤纸上自上而下分布依次为：胡萝卜素、叶布依次为：胡萝卜素、叶黄素、叶绿素黄素、叶绿素a、叶绿素、叶绿素b 叶绿体中的色素能够在滤纸上彼此分离的原因是（ ）A色素提取液中色素已经分层B阳光的照射使不同色素彼此分开C乙醇有使色素溶解并彼此分离的特性D各种色素在滤纸上随层析液扩散的速度不同八、课堂反馈D聚焦高考（2012上