培养液中酵母菌数量动态变化

1、培养液中酵母菌数培养液中酵母菌数量的动态变化量的动态变化（必修（必修3 P68）酵母菌出芽生殖酵母菌出芽生殖酵母菌的新陈代谢类型：兼性厌氧型酵母菌的新陈代谢类型：兼性厌氧型无氧呼吸无氧呼吸C6H12O66H2O6O2 6CO212H2O能量能量酶酶有氧呼吸有氧呼吸C6H12O6 2C2H5OH2CO2能量能量酶酶一、实验目的一、实验目的v1 1通过探究培养液中酵母菌种群数量的变化，通过探究培养液中酵母菌种群数量的变化，尝试尝试建构建构种群增长的种群增长的数学模型数学模型。v2 2用数学模型用数学模型解释解释种群数量的变化。种群数量的变化。v3 3学会使用学会使用血球计数板血球计数板进行计数。进

2、行计数。二、实验原理二、实验原理1 1、酵母菌可以用、酵母菌可以用液体培养基液体培养基来培养，培养液中的酵母菌来培养，培养液中的酵母菌种群的增长情况与种群的增长情况与培养液中的成分、空间、培养液中的成分、空间、PHPH、温度、温度等等因素有关，我们可以根据培养液中的因素有关，我们可以根据培养液中的酵母菌数量和时间酵母菌数量和时间为坐标轴做为坐标轴做曲线曲线，从而掌握酵母菌种群数量的变化情况。，从而掌握酵母菌种群数量的变化情况。2 2、利用血球计数板在、利用血球计数板在显微镜下显微镜下直接计数是一种常用的细直接计数是一种常用的细胞计数法，这种方法可以胞计数法，这种方法可以直接直接测定样品中全部的

3、细胞数测定样品中全部的细胞数目，所以一般用于单细胞微生物数量的测定，由于目，所以一般用于单细胞微生物数量的测定，由于血球血球计数板上的计数室计数板上的计数室盖上盖玻片后的容积是一定的，所以盖上盖玻片后的容积是一定的，所以可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞的总数。细胞的总数。 是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。中间的平台较宽，其中四条下凹的槽，构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面，刻有一个方格间又被一短横槽隔为

4、两半，每半边上面，刻有一个方格网。网。 XB-K-25 XB-K-25为计数为计数板的型号和规格，板的型号和规格，表示此计数板分表示此计数板分2525个中格；个中格； 0.1mm 0.1mm为盖上盖为盖上盖玻片后计数室的玻片后计数室的高；高； 1/400mm 1/400mm2 2表示表示计数室面积是计数室面积是1mm1mm2 2，分，分400400个小个小格，每小格面积格，每小格面积是是1/400 mm1/400 mm2 2。 血细胞计数板的使用原理血细胞计数板的使用原理方格网方格网方格网上刻有方格网上刻有9 9个大方格，其中个大方格，其中只有中间的一个只有中间的一个大方格为计数室，大方格为计

5、数室，供微生物计数用。供微生物计数用。这一大方格的长这一大方格的长和宽各为和宽各为1mm1mm，深度为深度为0.1mm0.1mm，其体积为其体积为0.1mm30.1mm3。每个大方格中有每个大方格中有1616个中格个中格或或2525个中格个中格计数室通常有两种规计数室通常有两种规格。格。 一种是大方格内一种是大方格内分为分为1616中格，每一中中格，每一中格又分为格又分为2525小格；小格； 另一种是大方格另一种是大方格内分为内分为2525中格，每一中格，每一中格又分为中格又分为1616小格。小格。 25*16规格的，通常数规格的，通常数五五个个中方格的总菌数（中方格的总菌数（五点取样五点取样

6、），），然后求得每个小方格的平均值，然后求得每个小方格的平均值，再乘上再乘上400，就得出一个大方格，就得出一个大方格中的总菌数，然后再换算成中的总菌数，然后再换算成10ml菌液中的总菌数。菌液中的总菌数。16*25数数四四个中方格（对角线）个中方格（对角线）每每1ml1ml菌液中所含的酵母菌个数：菌液中所含的酵母菌个数：酵母细胞数酵母细胞数/ml=80/ml=80小格内酵母细胞个数小格内酵母细胞个数/80/804 4000010104 4稀释倍数（稀释倍数（25251616）酵母细胞数酵母细胞数/ml=100/ml=100小格内酵母细胞个数小格内酵母细胞个数/100/100400400101

7、04 4稀释倍数（稀释倍数（16162525）例例1 1、检测员将、检测员将1 mL1 mL水样稀释水样稀释1010倍后，用抽样检倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量，已知每个计数测的方法检测每毫升蓝藻的数量，已知每个计数室由室由25251616400400个小格组成，容纳液体的总体个小格组成，容纳液体的总体积为积为0 01 mm31 mm3。现观察到图中该计数室所示现观察到图中该计数室所示a a、b b、c c、d d、e 5e 5个中格个中格8080个小格内共有蓝藻个小格内共有蓝藻n n个，则上述水样个，则上述水样中约有蓝藻中约有蓝藻 个个mLmL。（参考答案：（参考答案：5n5n1

8、0105 5 ）1 1镜检计数室。镜检计数室。在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污物，则需清洗，吹干后才能进行计数；物，则需清洗，吹干后才能进行计数； 血细胞计数板使用的方法步骤血细胞计数板使用的方法步骤2 2加样品。加样品。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，玻片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻滴于盖玻片边缘，让培养液自行缓缓渗入片边缘，让培养液自行缓缓渗入，一次性充满计数一次性充满计数室，防止产生气泡，室，防止产生气泡，充入细胞悬液的量以不超过

9、计充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与盖玻片之间的矩形边缘为宜。多余培养数室台面与盖玻片之间的矩形边缘为宜。多余培养液可用滤纸吸去；液可用滤纸吸去；3 3计数计数稍待片刻（约稍待片刻（约5min5min），待酵母菌细胞全部沉降），待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后，将计数板放在载物台的中央，到计数室底部后，将计数板放在载物台的中央，先在低倍镜下找到计数室所在位置后，再转换先在低倍镜下找到计数室所在位置后，再转换高倍镜观察、计数并记录。高倍镜观察、计数并记录。三、实验探究过程三、实验探究过程（一）提出问题：（一）提出问题： 培养一种酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？培养一种酵母菌种群的数量是怎

10、样随时间变化的？（二）作出假设：（二）作出假设：环境中的资源和空间有限的条件下，酵母菌种群的数量呈环境中的资源和空间有限的条件下，酵母菌种群的数量呈S S型增长。型增长。（三）设计实验（三）设计实验v全班同学全班同学分成甲、乙、丙等若干实验组分成甲、乙、丙等若干实验组。v分别用分别用等量等量培养液，在培养液，在相同适宜相同适宜环境中培养环境中培养等量等量酵母菌。酵母菌。v每天每天用血球计数板，采用抽样检测的方法用血球计数板，采用抽样检测的方法计数一个小方格计数一个小方格内内的酵母菌数量并作记录，的酵母菌数量并作记录，连续连续7 7天。天。v7 7天后，各组向全班汇报本小组天后，各组向全班汇报本

11、小组7 7天的数据，算出每一天数据天的数据，算出每一天数据的全班的全班平均值平均值，根据平均值画出酵母菌种群数量的，根据平均值画出酵母菌种群数量的增长曲线增长曲线。（四）实验过程（四）实验过程v1 1、材料用具：、材料用具： 探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血球计数板（球计数板（1mm1mm1mm1mm0 01mm1mm方格）、滴管、显微镜等。方格）、滴管、显微镜等。v2 2、方法步骤和记录：、方法步骤和记录：（1 1）取相同试管若干支，分别加入）取相同试管若干支，分别加入5ml5ml肉汤培养液，塞上棉塞。肉汤培养液

12、，塞上棉塞。（2 2）用高压锅进行高压蒸汽灭菌后冷却至室温，标记甲、乙、丙等）用高压锅进行高压蒸汽灭菌后冷却至室温，标记甲、乙、丙等（3 3）将酵母菌母液分别加入试管各）将酵母菌母液分别加入试管各5ml5ml，摇匀后用血球计数板计数，摇匀后用血球计数板计数起始酵母液个数，做好记录。起始酵母液个数，做好记录。（4 4）将各试管送进恒温箱，）将各试管送进恒温箱，2525下培养下培养7 7天。天。v3 3、现象观察、现象观察 每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察菌个数，并作记录，连续观察7 7天。天。培

13、养液中酵母菌种群数量7天中的变化记录表 菌数菌数 时间时间（五）实验结论（五）实验结论v1 1、根据表格平均值，以、根据表格平均值，以时间时间为横坐标，为横坐标，酵母菌的酵母菌的数量数量为纵坐标，绘制出培养液中酵母菌种群数量为纵坐标，绘制出培养液中酵母菌种群数量7 7天中的变化曲线（种群增长曲线）。天中的变化曲线（种群增长曲线）。v2 2、培养液酵母菌种群数量随时间呈、培养液酵母菌种群数量随时间呈S S型增长变化。型增长变化。四、实验讨论四、实验讨论v2 2从试管中吸出培养液进行计数之前，建议你将试管轻轻震荡几从试管中吸出培养液进行计数之前，建议你将试管轻轻震荡几次。这是为什么？次。这是为什么

14、？ 使酵母菌在试管里分布均匀，提高计数的代表性和准确性。使酵母菌在试管里分布均匀，提高计数的代表性和准确性。v3 3本探究需要设置对照吗？如果需要，请讨论说明怎样设计；如本探究需要设置对照吗？如果需要，请讨论说明怎样设计；如不需要，请说明理由。不需要，请说明理由。 不需要，该实验在时间上形成前后对照。只要分组重复实验，不需要，该实验在时间上形成前后对照。只要分组重复实验，获得平均数值，求得准确即可。获得平均数值，求得准确即可。v4 4需要做重复实验吗？需要做重复实验吗？ 需要，提高数据的准确性。需要，提高数据的准确性。v5 5怎样记录结果？记录表怎样设计？（见上表）怎样记录结果？记录表怎样设计

15、？（见上表）每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母菌个每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察数，并作记录，连续观察7 7天。天。记录表（见上表）记录表（见上表）v6 6如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取怎样的措如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取怎样的措施？施？ 增加稀释的倍数。增加稀释的倍数。v7 7对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？ 应计数同侧相邻两边上的菌体数，另两边不计数。应计数同侧相邻两边上的菌体数，另两边不计数。 练习：练习：某生物兴趣小组开展探究实

16、验，课题是：某生物兴趣小组开展探究实验，课题是：“培养液中酵母菌种群数量与时间的变化关系培养液中酵母菌种群数量与时间的变化关系”。v实验材料、用具：实验材料、用具： 菌种和无菌培养液、试管、血球计数板（菌种和无菌培养液、试管、血球计数板（2mm2mm2mm2mm方格）、滴管、显微镜等。方格）、滴管、显微镜等。v酵母菌的显微计数方法：酵母菌的显微计数方法： 血球计数板：是带有微小方格刻度的玻璃片，用血球计数板：是带有微小方格刻度的玻璃片，用于在显微镜下对微生物的计数。于在显微镜下对微生物的计数。 将含有酵母菌的培养滴在计数板上，计算一个小将含有酵母菌的培养滴在计数板上，计算一个小方格内的酵母菌数

17、量，再以此为根据，估算试管中方格内的酵母菌数量，再以此为根据，估算试管中的酵母菌总数。连续观察的酵母菌总数。连续观察7d7d，并记录每天的数量。，并记录每天的数量。v根据以上叙述回答下列问题：根据以上叙述回答下列问题：（1 1）根据所学知识，该课题的实验假设是：开始一段时间酵母）根据所学知识，该课题的实验假设是：开始一段时间酵母菌呈菌呈“J J”型增长，随着时间的推移，型增长，随着时间的推移，酵母菌呈，酵母菌呈“S S”型增长。型增长。（2 2）本实验没有设置对照实验，原因是）本实验没有设置对照实验，原因是 。该实验是否需要重复实验？，。该实验是否需要重复实验？，试解释原因。试解释原因。（3 3）在吸取培养液计数前，要轻轻振荡几次试管，原因是）在吸取培养液计数前，要轻轻振荡几次试管，原因是 。该如果一个小方格内酵母菌过多，。该如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取的措施是。难以数清，应当采取的措施是。（4 4）请你设计表格处理实验数据。）请你设计表格处理实验数据。