水体污染的毒性试验

1、1.急性毒性试验急性毒性试验：测定一种毒物在不同浓度时，测定一种毒物在不同浓度时， 24h、48h、96h小时期间的相对致死性。小时期间的相对致死性。毒性试验毒性试验：在适当控制的条件下，把受试生物放在适当控制的条件下，把受试生物放在不同浓度的已知或未知读物内，观察记录生物在不同浓度的已知或未知读物内，观察记录生物的各种反应。的各种反应。LC50：某毒物在限定时间内使某毒物在限定时间内使50%的受试生物个体的受试生物个体死亡的浓度死亡的浓度2.慢性毒性试验慢性毒性试验：水生生物长时间暴露在低浓度水生生物长时间暴露在低浓度毒物下所产生的可观察的生物效应。毒物下所产生的可观察的生物效应。测试项目测

2、试项目生长情况生长情况存活时间存活时间幼体产生数量幼体产生数量孵化过程孵化过程畸变的类型和百分比畸变的类型和百分比试验时间试验时间藻类和原生动物：几小时藻类和原生动物：几小时-几天几天小无脊椎动物：几星期小无脊椎动物：几星期大型无脊椎动物和鱼类：几个大型无脊椎动物和鱼类：几个月月几年几年（体长和体重）（体长和体重）3.生物积累试验：生物积累试验：生物积累：指某些毒物的浓度在生物组生物积累：指某些毒物的浓度在生物组织内可积累到比周围水体的毒物浓度高织内可积累到比周围水体的毒物浓度高出许多倍。出许多倍。生物积累生物积累生物浓缩生物浓缩：生物放大生物放大：生物直接从水中摄取生物直接从水中摄取毒物毒物

3、生物通过食物连摄生物通过食物连摄取毒物取毒物生物积累的试验方法：生物积累的试验方法：（1）用浓缩因子测定生物浓缩）用浓缩因子测定生物浓缩BCF=平衡时的组织浓度平衡时的组织浓度/水中浓度水中浓度生物半衰期生物半衰期：生物组织内毒物的浓度下降到生物组织内毒物的浓度下降到它的一半所需的时间。它的一半所需的时间。（2）用放射性同位素标记法测定生物放大）用放射性同位素标记法测定生物放大例如：藻类例如：藻类 蚤蚤 鱼鱼一、试验方法一、试验方法（1）静水式试验）静水式试验（2）更新式静水试验（换水试验）更新式静水试验（换水试验） （3）流水式试验）流水式试验（4）现场试验）现场试验项目八项目八 鱼类急性毒

4、性试验鱼类急性毒性试验项目八项目八 鱼类急性毒性试验鱼类急性毒性试验二、试验鱼选择、收集和驯养二、试验鱼选择、收集和驯养 （1）当地水体中生活的种类；）当地水体中生活的种类；（2）对污染物比较敏感；）对污染物比较敏感；（3）能在实验条件下饲养，来源丰富，个体）能在实验条件下饲养，来源丰富，个体 健康。健康。鲤鱼、鲫鱼、金鱼鲤鱼、鲫鱼、金鱼1.试验鱼的选择试验鱼的选择 2. 实验鱼的大小和数目实验鱼的大小和数目要求：同批、同种、同龄要求：同批、同种、同龄大小一致，在大小一致，在7厘米以下（金鱼厘米以下（金鱼3厘米）厘米）数目：每浓度组数目：每浓度组7-10尾尾1升水升水/g鱼鱼3. 实验鱼的驯养

5、实验鱼的驯养驯养驯养7天天驯养用水与试验用水要一致驯养用水与试验用水要一致鱼的死亡率不能超过鱼的死亡率不能超过10%23升水升水/g鱼鱼暂养暂养12天天三、试验条件三、试验条件1.试验容器和容积试验容器和容积容器：玻璃容器：玻璃大小按大小按23升水升水/g 鱼鱼容器高度：容器高度：3035cm试验液的深度应尽可能保持一致，且不能试验液的深度应尽可能保持一致，且不能小于小于15cm例如：直径例如：直径2535cm，高，高3050cm的圆玻璃缸的圆玻璃缸长长31cm，宽，宽24cm，高，高35cm的标本缸的标本缸容积容积30升以上的大白瓷桶升以上的大白瓷桶2. DO：不能低于：不能低于4mg/L3

6、. 水温：水温：2125 4.光照光照: 1216h5. 试验用水试验用水:未污染的自然的河水或湖水，需未污染的自然的河水或湖水，需过滤去悬浮物，过滤去悬浮物，或用标准稀释水或用标准稀释水 。如用自来。如用自来水，要暴气。水，要暴气。水的硬度水的硬度: 19250mg/L (以以CaCO3计计) ； pH：6.08.5四、试验步骤四、试验步骤1. 预备试验预备试验目的目的:(1) 确定正式试验的浓度范围；确定正式试验的浓度范围；（2）初步观察鱼的中毒表现和选择观）初步观察鱼的中毒表现和选择观 察指标；察指标；（3）检验规定的试验条件是否合适。）检验规定的试验条件是否合适。5尾尾/浓度浓度489

7、6h找出最高的全存活浓度和最低的全死亡浓度找出最高的全存活浓度和最低的全死亡浓度浓度范围要大些，如浓度范围要大些，如1000、100、10、1、0.lmg/L 2. 试验浓度的选择试验浓度的选择根据预备试验选择出的浓度范围，中间按等根据预备试验选择出的浓度范围，中间按等比级数或等对数间距插入比级数或等对数间距插入35个中间浓度。个中间浓度。浓度的单位：浓度的单位：mg/L、百分比、百分比每个浓度做每个浓度做3个平行个平行CKCK死亡率小于死亡率小于10%时，实验才被承认。时，实验才被承认。3. 试验液的配制方法试验液的配制方法母液母液丙酮、吐温丙酮、吐温溶剂溶剂CK:CK:助溶剂含量应为试验组

8、使用助溶剂的最高浓度，助溶剂含量应为试验组使用助溶剂的最高浓度，且不得超过且不得超过 100mg/L或或0.1mL/L 4. 正式试验正式试验1.07.510.05.63.2CK 低低 高高试验开始后的试验开始后的3h、6h观察记录中毒症状观察记录中毒症状在在24h、48h、72h和和96h记录死亡鱼数记录死亡鱼数5. 极限试验极限试验 可以进行浓度为可以进行浓度为100mg/L的极限试验。如极的极限试验。如极限试验结果表明限试验结果表明LC50100mg/L。可直接给出。可直接给出试验结果及评价：试验结果及评价：LC50100mg/L，属于低毒。，属于低毒。 1. LC50计算计算五、数据处

9、理与报告五、数据处理与报告 对数浓度对数浓度（1）直线内插法）直线内插法（1）直线内插法）直线内插法10 20 30 40 50 60 70 80 90 1001065432废水百分率浓度（对数尺度）24h死亡率LC505.2%96h死亡率LC504.4%试验鱼死亡百分数（2）概率单位目测法）概率单位目测法a. 将浓度换算成对数浓度，死亡率换算成概率单将浓度换算成对数浓度，死亡率换算成概率单位，死亡率为位，死亡率为100%和和0时不列入计算时不列入计算b. b. 依据上述资料绘制点图，纵轴为概率单位，横依据上述资料绘制点图，纵轴为概率单位，横轴为浓度对数轴为浓度对数c. 顺着各点的分布趋势用直

10、尺作出一条最接近各点顺着各点的分布趋势用直尺作出一条最接近各点的直线的直线d. 从纵轴概率单位为从纵轴概率单位为“5”处引一条水平线与直处引一条水平线与直线相交，再从交点做垂线与横轴相交，即可线相交，再从交点做垂线与横轴相交，即可LC50的对数值，此值的反对数就是的对数值，此值的反对数就是LC50(3)(3)直线回归法直线回归法 ya+bx x-浓度的对数浓度的对数;y-死亡率转换成的概率单位死亡率转换成的概率单位 222)()( xxKxyxyxa22)()( xxKyxxyKbK-浓度的组数（死亡率为浓度的组数（死亡率为0和和100%的浓度不计在内）的浓度不计在内） y=1.6901+10

11、.5607x50%死亡率的概率单位死亡率的概率单位y=5,代入上式得：代入上式得：x0.6335 LC504.30 LC50的的95%可信限可信限=1g-1（x 1.96）Ns22S=b1N-供试的动物总数（死亡率为供试的动物总数（死亡率为0和和100%的组不计在内）的组不计在内） 2. 结果评价结果评价 96h LC50（mg/L） 100 毒性分级毒性分级 极高毒极高毒 高毒高毒 中毒中毒 低毒低毒3.编写报告编写报告 六、鱼类急性毒性试验结果的应用六、鱼类急性毒性试验结果的应用 (一一) 安全浓度的推导安全浓度的推导 安全浓度安全浓度: :就是在污染物的持续作用下，鱼类可以正常存活、就是

12、在污染物的持续作用下，鱼类可以正常存活、生长、繁殖的最高毒物浓度生长、繁殖的最高毒物浓度 在全生活周期的慢性毒性试验中对生物不产生影响的浓度在全生活周期的慢性毒性试验中对生物不产生影响的浓度。 3505050)48/24(3 . 024hLChLChLC安全浓度安全浓度= 安全浓度安全浓度= 2505050)48/24(3 . 048hLChLChLC安全浓度安全浓度=96LC50（0.10.01） 不易分解的取不易分解的取0.010.05；容易分解的取；容易分解的取0.050.1 (二二) 实际应用实际应用 推算出废水的允许排放量和排放速率推算出废水的允许排放量和排放速率 作为废水处理效果的鉴定指标作为废水处理效果的鉴定指标 可以利用鱼类毒性试验作为指标，检查地面水源是否已受污可以利用鱼类毒性试验作为指标，检查地面水源是否已受污染染 作为判定水质卫生标准的一项指标作为判定水质卫生标准的一项指标 找出水体污染的主要污染源和主要污染物找出水体污染的主要污染源和主要污染物 测定和评价化学物质和工业废水的毒性测定和评价化学物质和工业废水的毒性 测定不同种