第八章肝胆疾病的生物化学检验

1、卫生部卫生部“十二五十二五” 规划教材规划教材 全国高等医药教材建设研究会规划教材全国高等医药教材建设研究会规划教材皖南医学院 章 尧教学目标和要求教学目标和要求 掌握： 黄疸的发生机制和各型黄疸的代谢特点及实验室鉴别诊 断要点；肝胆疾病实验室主要生化检查指标以及在肝胆 疾病诊断和鉴别诊断中的临床应用及其评价。熟悉： 肝脏主要生物化学功能及其在肝细胞损伤时的代谢变 化；胆汁酸代谢及在肝胆疾病诊断中的应用。了解： 肝脏功能实验室检查项目筛选的原则。 2教学内容教学内容一、一、肝脏的主要生物化学功能肝脏的主要生物化学功能o1. 合成与分泌功能合成与分泌功能o2. 加工与储存功能加工与储存功能o3.

2、 生物转化功能生物转化功能o4. 激素的灭活激素的灭活4 第一节第一节 肝脏主要生化功能及其代谢紊乱肝脏主要生化功能及其代谢紊乱二、二、肝胆疾病的主要代谢紊乱肝胆疾病的主要代谢紊乱 （一）蛋白质代谢异常（一）蛋白质代谢异常o急性肝损害时，血浆蛋白质浓度变化不大；o慢性肝病时 -血浆清蛋白降低，-球蛋白升高，出现清蛋 白与球蛋白（A/G）的比值降低，甚至倒置。 -血浆尿素水平呈低值。 -血氨增高。 -支链氨基酸和芳香族氨基酸的比值下降。5o磷酸戊糖途径和糖酵解途径相对增强，血中丙酮酸含量可显著上升o严重肝病时糖有氧氧化及三羧酸循环运转失常o血糖浓度难以维持正常水平o糖耐糖曲线异常，可呈低平型、高

3、峰型、高坡型等异常曲线 o血清半乳糖浓度增高 （二）（二）糖代谢异常糖代谢异常 6（三）脂类代谢异常（三）脂类代谢异常o脂类消化吸收不良 o肝内脂肪氧化分解降低或脂肪合成增多或磷脂合成障 碍，不能有效合成脂蛋白输出，脂肪在肝细胞内沉积 而形成脂肪肝o糖代谢异常，脂肪动员增加，导致酮血症o血浆胆固醇酯/胆固醇的比值下降o血浆脂蛋白电泳谱异常，出现低密度脂蛋白（LDL） 积累o可出现异常的脂蛋白X（Lp-X） 7（四）胆红素代谢紊乱（四）胆红素代谢紊乱 1.胆红素胆红素(bilirubin)来源与生成来源与生成体内的铁卟啉化合物体内的铁卟啉化合物血红蛋白、肌红蛋白、细胞血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素

4、、过氧化氢酶及过氧化物酶。色素、过氧化氢酶及过氧化物酶。胆红素来源胆红素来源1）衰老的RBC破坏、降解2）无效红细胞生成3）非血红蛋白的血红素蛋白质（细胞色素、过氧化物酶、肌红蛋白等）分解主流胆红素（80%）分流胆红素（20%）8 衰老的衰老的RBC网状内皮系统肝、脾、骨髓（微粒体、胞液）Hb珠蛋白血红素氨基酸胆绿素CO和铁血红素加单氧酶O2、NADPH 胆红素胆红素a胆绿素还原酶胆红素的性质：胆红素的性质： 亲脂疏水，对大脑具有毒性作用亲脂疏水，对大脑具有毒性作用9NNNNHOOCFe2+HOOC2O2NADPH+H+NADP+CO +H2OFe3+HNHNPNPHNOONADPH+H+NA

5、DP+HNHNPPHNOOHH血 红 素胆 绿 素胆 红 素血 红 素 加 氧 酶胆 绿 素 还 原 酶HN胆红素的生成过程胆红素的生成过程10NN HNNOCOOOHCOHHOHHC10胆红素空间结构示意图胆红素空间结构示意图112胆红素转运胆红素转运 胆红素清蛋白复合体（主要）胆红素清蛋白复合体（主要）胆红素胆红素 1-球蛋白（少部分）球蛋白（少部分）运输形式运输形式竞争结合剂竞争结合剂-如磺胺药，水杨酸，胆汁酸等如磺胺药，水杨酸，胆汁酸等意义意义增加胆红素在血浆中的溶解度，便于运输。增加胆红素在血浆中的溶解度，便于运输。限制胆红素自由通过生物膜产生毒性作用限制胆红素自由通过生物膜产生毒性

6、作用123. 胆红素在肝细胞内转变胆红素在肝细胞内转变1 1）摄取）摄取-胆红素可以自由双向通透肝血窦肝细胞膜表面胆红素可以自由双向通透肝血窦肝细胞膜表面 进入肝细胞。进入肝细胞。肝细胞摄取胆红素的有效性取决于肝细胞膜上特异的载体蛋白肝细胞内两种受体蛋白两种受体蛋白-Y蛋白和Z蛋白以“胆红素Y蛋白”(胆红素Z蛋白)形式送至内质网。这是一个耗能的可逆的过程。 肝内运输132）转化）转化o部位：部位：滑面内网质滑面内网质o反应：反应：结合反应结合反应（主要结合物为（主要结合物为UDPGA）o酶：酶： 葡萄糖醛酸基转移酶。葡萄糖醛酸基转移酶。o产物：产物：主要为双葡萄糖醛酸胆红素，另有少量单葡萄主要

7、为双葡萄糖醛酸胆红素，另有少量单葡萄 糖醛酸胆红素、硫酸胆红素，统称为糖醛酸胆红素、硫酸胆红素，统称为结合胆红素。结合胆红素。o目的：目的：既有利于胆红素随胆汁排泄，又限制其通过生既有利于胆红素随胆汁排泄，又限制其通过生 物膜而起到解毒作用。物膜而起到解毒作用。14胆红素葡糖醛酸一酯胆红素葡糖醛酸一酯 + UDP -葡糖醛酸葡糖醛酸UDP-葡糖醛酸葡糖醛酸基转移酶基转移酶胆红素葡糖醛酸二酯胆红素葡糖醛酸二酯 + UDP （90 95%） 胆红素胆红素 + UDP -葡糖醛酸葡糖醛酸胆红素葡糖醛酸一酯胆红素葡糖醛酸一酯 + UDP （510%）UDP-葡糖醛酸葡糖醛酸基转移酶基转移酶 葡糖醛酸胆

8、红素的生成葡糖醛酸胆红素的生成15HNHNHNHNOOHHCH2CH2CH2COOCH2COOHOHHOHHOHHOOCHHOHOHOHHOHHHOHHCOOHHH 胆红素葡糖醛酸二酯的结构胆红素葡糖醛酸二酯的结构C10163）排泄）排泄o结合胆红素通过毛细胆管膜上的主动转结合胆红素通过毛细胆管膜上的主动转运载体，从肝细胞毛细胆管排泄入胆汁运载体，从肝细胞毛细胆管排泄入胆汁中，再随胆汁排入肠道。中，再随胆汁排入肠道。o转运形式：逆浓度梯度的能量依赖的主转运形式：逆浓度梯度的能量依赖的主动转运过程。动转运过程。174.4.胆红素在肠管中的变化及其肠肝循环胆红素在肠管中的变化及其肠肝循环 结合胆红

9、素结合胆红素胆素原胆素原 - -葡萄糖醛酸苷酶葡萄糖醛酸苷酶葡萄糖醛酸葡萄糖醛酸还原还原胆素胆素氧化氧化胆素原：中胆素原，粪胆素原，胆素原：中胆素原，粪胆素原，d -d -尿胆素原尿胆素原胆胆 素：素：i - i -尿胆素，粪胆素，尿胆素，粪胆素， d -d -尿胆素尿胆素游离胆红素游离胆红素19NHNPPNHOOHHH胆 红 素HH+8Hd-尿 胆 素 原+8HHNHNHNPPNHOOHHHHNNHNPPNHOOHHHHNHHHHHHHHH中 胆 素 原 （ i-尿 胆 素 原 ）d-尿 胆 素HNHNPPNHOOHHHHNHHHHHHHHH粪 胆 素 原 （ l-尿 胆 素 原 ）+4H2

10、H2H中 胆 素 （ i-尿 胆 素 ）粪 胆 素 （ l-尿 胆 素 ）HH2H胆素原与胆素的生成反应胆素原与胆素的生成反应20胆素原的肠肝循环胆素原的肠肝循环胆素原肠肝循环的胆素原肠肝循环的概念概念肠道中有少量的胆素原可被肠粘膜细胞重肠道中有少量的胆素原可被肠粘膜细胞重吸收，经门静脉入肝，其中大部分再随胆汁排吸收，经门静脉入肝，其中大部分再随胆汁排入肠道，形成胆素原的入肠道，形成胆素原的肠肝循环肠肝循环(bilinogen enterohepatic circulation)。21胆素原肠肝循环的过程胆素原肠肝循环的过程血 红 蛋 白珠 蛋 白血 红 素NADPH+H+NADP+胆 绿 素

11、胆 红 素2O2 H2OFe3+CONADPH+H+NADP+胆 红 素 -清 蛋 白 复 合 物胆 红 素配 体 蛋 白胆 红 素 -配 体 蛋 白 复 合 物葡 糖 醛 酸 胆 红 素U D P G AUDP内 质 网胞 液肝 细 胞单 核 -吞 噬 细 胞血 液肠 管葡 糖 醛 酸 胆 红 素葡 糖 醛 酸胆 红 素胆 素 原胆 素 原 （ 少 量 ）胆 素粪 便肾小 部 分大 部 分胆 素 原O2O2胆 素尿（10% 20%）2% 5%22胆红素代谢通路胆红素代谢通路235. 胆红素代谢紊乱与黄疸胆红素代谢紊乱与黄疸 1） 黄疸的概念：黄疸的概念： 凡能引起胆红素生成过多、或肝细胞对胆

12、红素的摄凡能引起胆红素生成过多、或肝细胞对胆红素的摄取、结合和排泄过程发生障碍等因素均可使血中胆红素增取、结合和排泄过程发生障碍等因素均可使血中胆红素增高，而出现高胆红素血症高，而出现高胆红素血症(hyperbilirubinemia)。胆红素是。胆红素是金黄色色素，当血清中浓度高时，则可扩散入组织，组织金黄色色素，当血清中浓度高时，则可扩散入组织，组织被染黄，称为黄疸（被染黄，称为黄疸（jaundice） 。o隐性黄疸：隐性黄疸： 34.2 mol/L，外观看不出。，外观看不出。o显性黄疸：显性黄疸：34.2 mol/L，有黄染的现象。，有黄染的现象。242） 黄疸的类型黄疸的类型o根据肉眼

13、可否见到黄染现象分为： -显性黄疸和隐性黄疸。o根据发病原因可分为： -溶血性、肝细胞性和梗阻性黄疸。o根据病变部位可分为： -肝前性、肝性和肝后性黄疸。o根据血中升高的胆红素的类型分为： -高未结合胆红素性黄疸及高结合胆红素性黄疸。 253 3）黄疸的成因与发生机制）黄疸的成因与发生机制 o胆红素形成过多o肝细胞处理胆红素的能力下降 o胆红素在肝外的排泄障碍 26（1 1）胆红素形成过多）胆红素形成过多-溶血性黄疸溶血性黄疸o成因n溶血性：先天性的红细胞膜、血型 不合输血、脾亢等溶血。n非溶血性 ：如恶性贫血、珠蛋白生 成障碍等无效造血。 27o代谢特点代谢特点n血中未结合胆红素含量增高；总

14、胆红素升高，结合胆 红素仅为总胆红素的20%。n未结合胆红素不能由肾小球滤过，故尿中无胆红素排 出。 n肝最大限度地处理和排泄胆红素，因而肠道中形成的 胆素原增多，粪便排出的胆素原也增多，粪便颜色加 深。 n尿中排出的胆素原也相应增加，胆红素阴性。 -高未结合胆红素血症28o成因n胆红素摄取障碍 n胆红素结合障碍 n胆红素转运障碍n胆红素排泄障碍 （2）肝细胞处理能力下降）肝细胞处理能力下降-肝细胞性黄疸肝细胞性黄疸 临床上可见于新生儿生理性黄疸，肝内胆汁淤滞、感染、化学试剂、毒物、肿瘤等导致的肝病以及先天性遗传缺陷如Gilbert综合征、Crigler-Najjar综合征等。 29o代谢特点

15、代谢特点n血中两种胆红素含量都增高。总胆红素升高，结合胆 红素占总胆红素的35%以上。n结合胆红素可由肾小球滤过，尿中出现胆红素。 n结合胆红素在肝内生成减少，粪便颜色变浅。 n尿中胆素原含量变化不定。一方面是从肠吸收的胆素原 不能有效地随胆汁排出，使血中胆素原增加，尿中胆 素原增加；另一方面是肝实质性损伤及炎症、肿胀等 造成肝、胆管阻塞，结合胆红素不能排入肠道，尿中 胆素原减少。 -高未结合和结合胆红素血症30（3 3）胆红素排泄障碍）胆红素排泄障碍-阻塞性黄疸阻塞性黄疸o成因n胆道梗阻致胆红素排泄 障碍。如胆结石、胆道 蛔虫或肿瘤压迫以及 Dubin-Johnson综合征 等所致的胆道梗阻

16、 31o代谢特点代谢特点n血中结合胆红素含量增高，总胆红素升高，结合胆红 素占总胆红素的50%以上。 n结合胆红素能被肾小球滤过，尿中出现胆红素。 n胆红素不易或不能随胆汁排入肠道，因而肠腔胆素原 很少或缺失，粪便颜色变浅或呈灰白色。 n尿中排出的胆素原也相应变少，胆红素阳性。 -高结合胆红素血症32新生儿生理性黄疸的成因（新生儿生理性黄疸的成因（icterus neonatorum） o生下后，血液内原来过多的红细胞被破坏，未结合胆红素生成过多。o肝细胞内载体蛋白Y蛋白少，肝细胞摄取未结合胆红素的能力不足。o肝细胞内胆红素葡萄糖醛酸基转移酶生成不足，结合胆红素生成少。o肝细胞胆汁分泌器发育不

17、完善，对肝胆汁分泌的潜力不大。o母乳中含有孕二醇，对葡萄糖醛酸基转移酶有抑制作用。 334 4）黄疸的实验室检查）黄疸的实验室检查o胆红素代谢实验 （见表1）o血清酶学检查 o血脂分析 o血液学检查 （见表2）34表表1 三种类型黄疸的实验室鉴别诊断三种类型黄疸的实验室鉴别诊断指指标标正正常常溶血性黄疸溶血性黄疸肝细胞性黄疸肝细胞性黄疸阻塞性黄疸阻塞性黄疸血清胆红素血清胆红素总量总量 1mg/dl 1mg/dl 1mg/dl 1mg/dl结合胆红素结合胆红素0 0.8mg/dl 游离胆红素游离胆红素 1mg/dl 尿三胆尿三胆尿胆红素尿胆红素+ + + +尿胆素原尿胆素原少量少量 不一定不一定

18、 尿胆素尿胆素少量少量 不一定不一定 粪便颜色粪便颜色正常正常深深变浅或正常变浅或正常完全阻塞时陶土色完全阻塞时陶土色35 项 目 肝细胞性黄疸 梗阻性黄疸血清蛋白电泳图谱 Alb减少，球蛋白 球蛋白明显脂蛋白X 多为阴性 明显血清酶学 ALT 肝炎急性期 正常或增高 ALP 正常或轻度增高 明显升高 LAP 可增高 明显升高 -GT 可增高 明显升高其他方面 凝血酶原时间 延长，VitK不能纠正 延长，VitK可以纠正 胆固醇 降低，尤其CHE明显降低 增高 CA/CDCA 1 1 表表2 肝细胞性黄疸和梗阻性黄疸实验室鉴别诊断肝细胞性黄疸和梗阻性黄疸实验室鉴别诊断36（四）胆汁酸代谢及其异

19、常（四）胆汁酸代谢及其异常 1.1.胆汁酸的类型胆汁酸的类型 o按结构分按结构分o按来源分按来源分游离胆汁酸游离胆汁酸(free bile acid)-CA,CDCA,DCA,LCA结合胆汁酸结合胆汁酸(conjugated bile acid)-与甘氨酸或牛磺与甘氨酸或牛磺酸结合酸结合初级胆汁酸初级胆汁酸(primary bile acid)-CA,CDCA次级胆汁酸次级胆汁酸(secondary bile acid)-DCA,LCA37初级胆汁酸初级胆汁酸概念：概念：是肝细胞以胆固醇为原料直接合成的胆汁酸类型：类型：胆酸(CA)、鹅脱氧胆酸(CDCA)及相应结合型胆汁酸。部位：部位：肝细胞

20、的胞液和微粒体中原料：原料：胆固醇胆固醇转化成胆汁酸是其在体内代谢的主要去路胆固醇转化成胆汁酸是其在体内代谢的主要去路38次级胆汁酸次级胆汁酸概念：概念：在肠道细菌作用下初级胆汁酸在肠道细菌作用下初级胆汁酸 7-羟羟 基脱氧后生成的胆汁酸基脱氧后生成的胆汁酸类型：类型：脱氧胆酸脱氧胆酸(DCA) 、石胆酸石胆酸(LCA)及相及相 应结合型胆汁酸应结合型胆汁酸部位：部位：小肠下段和大肠小肠下段和大肠392.胆汁酸代谢胆汁酸代谢7羟化酶12羟化酶胆固醇7羟胆固醇 7羟4胆固烯3酮7，12二羟4胆固烯3酮脱氧胆酸（3，7二羟胆固烷酸，CDCA ） 胆酸（3，7，12 三羟胆固烷酸，CA） 还原、侧链

21、修饰氧化异构1） 初级胆汁酸形成初级胆汁酸形成402） 次级胆汁酸形成次级胆汁酸形成7-脱羟酶脱羟酶HCOOHOHOHOH3127胆酸胆酸HCOOHOHO H3127脱氧胆酸脱氧胆酸初级胆汁酸初级胆汁酸次级胆汁酸次级胆汁酸41初级胆汁酸初级胆汁酸HCOOHOHO H3127鹅脱氧胆酸鹅脱氧胆酸HCOOHOH3127石胆酸石胆酸次级胆汁酸次级胆汁酸7脱羟酶脱羟酶42o概念：概念：胆汁酸随胆汁排入肠腔后，通过重吸收经门静脉又回到肝，在肝内转变为结合型胆汁酸，经胆道再次排入肠腔的过程。o意义：意义：将有限的胆汁酸反复利用以满足人体对胆汁酸的生理需要，促进脂类的消化吸收。3. 胆汁酸肠肝循环胆汁酸肠肝

22、循环43胆汁酸肠肝循环的过胆汁酸肠肝循环的过程程444.胆汁酸代谢异常胆汁酸代谢异常 o肝胆疾病时的代谢异常o肠道疾病时的代谢异常 o高脂蛋白血症时的代谢异常o胆汁酸代谢遗传性缺陷 45肝胆疾病与肝胆疾病与TBA1. 肝胆疾病患者，血清胆汁酸水平无区别升高肝胆疾病患者，血清胆汁酸水平无区别升高2. 对肝功能评估具有较高的诊断灵敏度，可作为检测慢性肝对肝功能评估具有较高的诊断灵敏度，可作为检测慢性肝 炎中肝损伤的一个敏感指标，用来区分活动性与非活动性炎中肝损伤的一个敏感指标，用来区分活动性与非活动性 肝炎。肝炎。 3. TBA检测可用来区别高胆红素血症和胆汁淤积检测可用来区别高胆红素血症和胆汁淤

23、积4. CA/CDCA比值可作为胆道梗阻性病变和肝实质细胞性病比值可作为胆道梗阻性病变和肝实质细胞性病 变的鉴别指标。比值，见于胆道梗阻性病变；反之，变的鉴别指标。比值，见于胆道梗阻性病变；反之， 见于肝实质细胞性病变。见于肝实质细胞性病变。46肠道疾病与肠道疾病与TBA 在小肠疾病时，可引起胆汁酸代谢异常，如回肠切除、炎症或分流（如造漏）等，因胆汁酸的肠肝循环受阻，胆汁酸回到肝脏的量减少，血清胆汁酸水平降低；同时，由于胆汁酸返回肝脏减少，反馈抑制减弱，致肝脏胆汁酸的合成加速，血清胆固醇浓度减低。可见血清胆汁酸水平降低是回肠功能紊乱的一个反映。47高脂蛋白血症与胆汁酸代谢高脂蛋白血症与胆汁酸代

24、谢 o胆汁酸的生成是内源性胆固醇的主要代谢去路，而胆汁酸的合成又依赖自身的负反馈调控。 o肝细胞依靠胆汁酸的乳化及其形成的混合微团作用而随胆汁分泌排泄胆固醇，因此胆汁酸的合成和分泌必然影响胆固醇的排泄。 o胆汁酸协助食物胆固醇的吸收，而吸收的胆固醇可直接 调控肠壁细胞及肝细胞内胆固醇的合成。 因此，高脂蛋白血症时的代谢紊乱必然涉及胆汁酸的代谢异常。48一、血清蛋白质血清蛋白质 急性肝炎 肝硬化 慢活肝 胆汁性肝硬化 阻黄 肝癌 白蛋白 N或 N或 球蛋白 N或 N N 1 2 N N N N N肝病时的血清蛋白质异常备注： 表示降低， 表示上升， N 表示正常49 第二节第二节 肝胆疾病生物化

25、学检测指标肝胆疾病生物化学检测指标 二、血氨o检测方法n可分为直接法和间接法。直接法指不 需从全血中分离氨，包括酶法和氨电 极法；间接法指先从全血中分离出氨 再进行测定，包括微量扩散法、离子 交换法。还有较新的干化学法。目前 应用较多的是谷氨酸脱氢酶速率法。 50o参考区间 18 72mol/L（酶法）o临床意义n主要用于肝昏迷的监测和处理。n高血氨有神经毒性，容易引起肝性脑病。n可用于儿童Reye综合征的诊断。n血氨降低见于低蛋白饮食、贫血。51三、血清总胆红素、结合胆红素及非结合胆红素血清总胆红素、结合胆红素及非结合胆红素 o检测方法 血清胆红素及其组分测定分为重氮盐法、胆 红素氧化酶法、

26、高效液相色谱法、导数分光光度 法、直接分光光度法及干片分光光度法等。其中 重氮盐改良J-G（Jendrassik and Grof method，J- G）法和胆红素氧化酶法是临床最常用的方法。 52血清总胆红素（STB）： 新生儿 01d 34103mol/L 12d 103171mol/L 35d 68137mol/L 成人 3.417.1mol/L 结合胆红素（CB）： 06.8mol/L 未结合胆红素（UCB）：1.710.2mol/L参考区间参考区间53o临床意义临床意义 n判断有无黄疸、黄疸程度及演变过程n根据黄疸程度推断黄疸病因 n根据胆红素升高程度判断黄疸类型 n根据结合胆红素

27、与总胆红素比值，可协助 鉴别黄疸类型 54三种类型黄疸的实验室鉴别诊断三种类型黄疸的实验室鉴别诊断指指标标正正常常溶血性黄疸溶血性黄疸肝细胞性黄疸肝细胞性黄疸阻塞性黄疸阻塞性黄疸血清胆红素血清胆红素总量总量 1mg/dl 1mg/dl 1mg/dl 1mg/dl结合胆红素结合胆红素0 0.8mg/dl 游离胆红素游离胆红素 1mg/dl 尿三胆尿三胆尿胆红素尿胆红素+ + + +尿胆素原尿胆素原少量少量 不一定不一定 尿胆素尿胆素少量少量 不一定不一定 粪便颜色粪便颜色正常正常深深变浅或正常变浅或正常完全阻塞时陶土色完全阻塞时陶土色55四、血清总胆汁酸及结合胆酸血清总胆汁酸及结合胆酸 o 检测

28、方法 常用的测定方法有高效液相色谱法、放射免疫分析法、酶免疫分析法。酶法中又可分为酶荧光法、 酶比色法和酶循环法。其中酶比色法可用于手工操 作，亦可用于自动分析，应用较广。酶循环法有其 高敏感度，高特异性特点，故成为目前推荐检测血清总胆汁酸的方法。 56o参考区间n 总胆汁酸：4.92.38mol/L，n 餐后2h TBA为：8.222.91mol/L（酶法） 57o临床意义临床意义 n反映肝细胞损害的一个敏感指标，不仅用于临 床诊断，而且还能反映病情和估计疾病预后。 n病理性增高见于肝细胞损害（急慢性肝炎、肝 硬化等）、胆道梗阻（肝内外胆管梗阻）、门 脉分流等。 nCA/CDCA比值可作为胆

29、道梗阻性病变和肝实质 细胞性病变的鉴别指标。比值，见于胆道 梗阻性病变；反之，见于肝实质细胞性病变。58五、血清酶类五、血清酶类（一）血清转氨酶及其同工酶（一）血清转氨酶及其同工酶 o原理n转氨酶的测定方法有许多种，其 中以赖氏法最常用，由于此法操 作简便、经济，一些小型实验室 仍在使用。目前，国内外实验室 多采用连续监测法进行测定。 59ALT速率法测定中酶偶联反应式为： L-丙氨酸 + -酮戊二酸 L-谷氨酸 + L-丙酮酸 丙酮酸 + NADH + H+ L-乳酸 + NAD+LDALT60AST速率法测定中酶偶联反应式为： L-门冬氨酸 +-酮戊二酸 草酰乙酸 +NADH + H+L-

30、苹果酸 + NAD+ 草酰乙酸 + L-谷氨酸ASTMD上述偶联反应中，NADH的氧化速率与标本中酶活性呈正比，可在340nm检测吸光度下降速率。根据线性反应期吸光度下降速率(-A/min)，计算出ALT、AST的活力单位。61参考区间参考区间 连续监测法： ALT：男性：540UL； 女性： 535UL（37） AST：840UL（37） 62临床意义临床意义 o肝损伤的一项很灵敏的指标。急性肝损害时，血清ALT水平可在 临床症状（如黄疸）出现之前就急剧升高，且ALTAST。oDeRitis比值，即AST/ALT之比。急性肝炎是时DeRitis比值1， 肝硬化时DeRitis比值2，肝癌时D

31、eRitis比值3。 o重症肝炎时由，血中ALT逐渐下降，而胆红素却进行性升高，出 现所谓“酶胆分离”现象，o胆道梗阻时，ALT中度升高，梗阻缓解后12周即可恢复正常。 AST亦可升高。 o慢性肝炎特别是肝硬化时，AST升高程度超过ALT。63 疾病疾病 ALT AST AST/ALT 病毒性肝炎 1.0 重症肝炎 增高程度常超过ALT 1.0 肝硬化 变化不定， 同ALT，但增高程度 1.0 常轻度增高 常超过ALT 梗阻性黄疸 变化不定，常不超过 同ALT 不定, 1.0 5倍正常上限 急性心肌梗死 正常或轻度升高 明显升高 1.0 心肌炎 正常或轻度升高 急性期可轻度升高 1.0ALT和

32、AST在疾病时的变化随不同病期和严重程度而异，常明显升高，可达10100倍正常上限同ALT，但程度没有ALT明显，恢复到正常早于ALT64不超过20倍正常上限，出现 “肝疸分离”（二）血清碱性磷酸酶及其同工酶（二）血清碱性磷酸酶及其同工酶 o检测方法 ALP的测定方法有多种，概括有两大类， 即化学法和连续监测法。常用的化学法有 鲍氏法、金氏法和皮氏法。磷酸苯二钠比 色法（King-Amstrong法）曾在我国应用较 广。目前国内应用较多的方法为连续监测 法。 65参考区间参考区间o测定温度37：n男性：112岁 500U/L 1215岁 750 U/L 25岁以上 40 150 U/Ln女性：

33、112岁 500U/L 15岁以上 40150 U/L66临床意义临床意义 o肝胆疾病 阻塞性黄疸、急性或慢性 黄疸性肝炎、肝癌等患者血清ALP均 有不同程度的增高。o骨骼疾病 由于骨的损伤或疾病使成 骨细胞内所含高浓度的ALP释放进入 血液中，引起血清ALP活性增高。o营养不良、严重贫血、重金属中毒等 ALP也有不同程度的升高 。 67（三）血清（三）血清-谷氨酰基转肽酶及其同工酶谷氨酰基转肽酶及其同工酶o检测方法检测方法 目前国内外多采用连续监测法测定血 清-GT活性。IFCC参考方法采用L- -谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺作为底 物，以甘氨酰甘氨酸（双甘肽）作为-谷氨酰基的受体。68o参

34、考区间参考区间n 测定温度37，健康人群：n男性：1150U/Ln女性：732U/L69临床意义临床意义 o -GT是肝胆疾病检出阳性率最高的酶，主要用 于胆汁淤滞及肝占位性病变的诊断。 n肝内外阻塞性黄疸患者血清-GT均显着升高，其幅度 与阻塞程度呈正相关 n病毒性和肝硬化患者-GT亦可呈中度升高，但不及阻 塞性黄疸明显。 n-GT显着性升高是酒精性肝病的重要特征n肝癌患者-GT活性显着升高，动态观察可监测疗效、 判断预后。n-GT同工酶分为-GT1、-GT2、-GT3和-GT4四种。70（四）血清（四）血清5，-核苷酸酶核苷酸酶o检测方法检测方法 5，-NT的检测方法有多种，目前应用较 多

35、的为连续监测法。 一磷酸腺苷+H2O NH3+-酮戊二酸+ NADH在波长340nm处监测吸光度下降速率，计算出5，-NT活性。5，-NT腺苷+Pi腺苷+H2O腺苷脱氨酶次腺苷+NH3谷氨酸脱氢酶L-谷氨酸+NAD+71o参考区间参考区间 健康成年人血清 5，-NT活性为011U/L72临床意义临床意义 o5，-NT活性增高常见于各种肝胆疾病，且与病情严重程度呈正相关。 o5， -NT是诊断肝肿瘤及消化道肿瘤的非常灵敏的酶学指标，可提高AFP阴性肝癌的检出率。 o能协助判断ALP升高是肝胆系统疾病还是骨骼系统疾病，在骨骼系统疾病中一般不升高。o有助于鉴别诊断肝细胞性黄疸和阻塞性黄疸，后者5，-

36、NT明显高于前者。 73（五）（五）-L-岩藻糖苷酶岩藻糖苷酶o检测方法 血清AFU检测有荧光法和比色法两类。前者灵敏度高，但需要专门的仪器设备，临床难以常规运用；后者适用于手工法，根据所选用底物不同，可将比色法改为速率法。o参考区间： 27.112.8U/L（速率法）74oAFU是原发性肝癌的诊断标志物。 oAFU和AFP联合应用，可提高原发性肝癌 的阳性诊断率。o慢性肝炎和肝硬化患者血清AFU也增加， 但一般仅轻度升高。o用于岩藻糖苷蓄积病的诊断 临床意义临床意义 75（六）单胺氧化酶（六）单胺氧化酶o检测方法检测方法n 目前的检测方法有比色法、荧光法和生物发 光法。o参考区间参考区间 1

37、240 U/ml 76o临床意义临床意义 n肝硬化时，MAO活性明显升高。 n某些肝外疾病如糖尿病、系统硬化症等MAO测定也可升高。 77（七）脯氨酰羟化酶（七）脯氨酰羟化酶o检测方法 可采用RIA和EIA法o参考区间 39.511.87g/L。78o临床意义临床意义 n肝脏纤维化的诊断 肝硬化和吸血虫性肝纤 维化，PH活性明显增高；而转移性肝癌、急 性肝炎、轻型慢性肝炎，PH大多正常。n肝脏病变随访及预后诊断 79六、胶原及其片段六、胶原及其片段（一）（一）型前胶原氨基末端肽测定型前胶原氨基末端肽测定o检测方法检测方法 n目前临床上型前胶原氨基末端肽的测定多采 用放射免疫（EIA）的方法。o

38、参考区间参考区间n正常人的范围为41163ng/ml 80临床意义临床意义 o诊断肝硬化诊断肝硬化 n血清PP的检测是诊断肝纤维化和早期肝硬化的良好指标。o鉴别慢性持续性肝炎与慢性活动性肝炎鉴别慢性持续性肝炎与慢性活动性肝炎 o用药监护及预后判断用药监护及预后判断 o在肺纤维化、骨髓纤维化及某些恶性肿瘤 患者血清PP也增高。 81o检测方法n同血清PP测定方法。o参考区间参考区间n血清cIV NC1片段为（5.31.3）ng/ml（二）（二）型胶原及其片段（型胶原及其片段（7S片段和片段和NC1片段）片段）82o早期诊断肝硬化 n肝纤维化早期血中血中PP、7S和NC1含量均 增高，以7S和NC

39、1为明显。o用药疗效及预后判断 o其它n如甲状腺机能亢进、中晚期糖尿病、硬皮病等。 临床意义临床意义 83七、靛青绿滞留率试验七、靛青绿滞留率试验o检测方法n按患者公斤体重计算靛氰绿剂量，将该溶液静 脉注射，静注后23分钟瞬即达到动态平衡， 约20分钟血中浓度被肝细胞以一级速率消失， 即成指数函数下降。通常在注射后15分钟采血 测定血浆中的靛氰绿滞留量，以此判断患者是 否有肝细胞损害。84o参考区间参考区间 n15min血中滞留率0%10%。年龄大者，滞留率稍增加，每增加5岁，滞留率可增加0.2%0.6%。n血中消失率（K）为0.1680.206。n肝最大移除率（Rmax）正常值为3.181.

40、62mg/（kg.min）。85n诊断肝硬化 肝硬化时，滞留率在21%以上者 占65%，平均为35.5%。n急慢性肝炎的诊断 急慢性肝炎滞留率增加。n可用于判断肝癌患者有无肝硬化存在，这对临 床上制定治疗方案和判断预后具有一定价值。n先天性ICG排泄异常症和Rotor综合症的诊断 n脂肪肝时ICG试验的结果往往正常。 临床意义临床意义 86八、利多卡因试验八、利多卡因试验o检测方法 n静脉注射利多卡因1mg/kg，15min后采 血测 定血清MEGX浓度。MEGX检测可采用荧 光偏振免疫测定法或高效液相色谱法。o参考区间n100 18g/L87临床意义临床意义o评价肝脏的贮备功能 随着肝功能损

41、害的加重，MEGX浓度不断降 低，与定量反映肝硬化不同程度肝功能损害的 Child-Pugh积分相关良好。o在肝移植中的应用 一方面可作为选择供肝的依据，另一方面， 肝移植术后可用于预测移植肝存活期。88一、急性肝损伤急性肝损伤o血清酶 n急性肝损伤的主要实验室指标变化特征是转氨 酶的显著升高，同时伴有血清胆红素的升高。nAST/ALT1，是诊断急性病毒性肝炎的重要 检测指标。n重症肝炎时则是ASTm大量出现于血清中。nALP可升高，但一般不会超过其参考值上限的 3倍 。89 第三节第三节 肝胆疾病主要生物化学检测指标肝胆疾病主要生物化学检测指标 变化的临床应用变化的临床应用o胆红素n急性肝损

42、伤时的血清胆红素与阻塞性黄疸 一致，是以结合胆红素升高为主。n黄疸型肝炎血清直接和间接胆红素均升高 ，但前者高于后者，尿胆红素和尿胆原也 增加。90o血清蛋白质n急性肝炎时，蛋白合成代谢变化不大，血 清蛋白质可在正常范围内。n慢性肝炎中度以上、肝硬化、（亚急性及 慢性）重型肝炎时白蛋白下降，-球蛋白 升高，A/G下降甚至倒置。 91o血浆凝血酶原时间 n血浆PT是急性肝损伤预后最重要的预测指 标，肝病时PT时间长短与肝损害程度呈正 相关。nPT持续延长，多是病情加重及预后不良的 征兆。92二、慢性病毒性肝炎慢性病毒性肝炎o血清酶检测n转氨酶轻度上升（100 200U/L），往往血清 AST/ALT1，若AST/ALT1时，提示慢性 肝炎可能进入活动期。n如果患者有饮酒史，且血清AST为ALT的2倍 以上，则可诊断为酒精性肝炎。n-GT在反映慢性肝细胞损伤及其病变活动时 较转氨酶敏感。93o胆红素n肝细胞慢性受损，血清直接和间接胆红素均不 同程度升高；n重型肝炎患者可出现ALT快速下降，黄疸进行 性加深，胆红素不断升高的“胆酶分离”现象。94o蛋白质n慢性肝炎时，肝细胞合成能力减低，白蛋白明 显降低、A/G比倒置，这是本病的特征。o其他