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文档简介

1、会计学121微生物的实验室培养优教共微生物的实验室培养优教共39张张第一页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入霉 菌细 菌第1页/共38页第二页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入酵母菌放线菌第2页/共38页第三页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入 上图都是一些常见的微生物,微生物是结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物,与人类关系密切。人工的培养和分离,使得我们更进一步认识微生物。 今天我们就来学习如何培养和分离大肠杆菌!第3页/共38页第四页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入1.通过阅读教材,结合观看培养基的相关素材,认识有关培养基的基础知识。 2.

2、通过观看无菌操作视频,结合教师详细讲解,能够掌握无菌操作技术。 3.通过观看实验视频,结合实际实验操作,能够完成纯化大肠杆菌的操作。第4页/共38页第五页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入微生物1培养基2无菌技术31 1基础知识基础知识第5页/共38页第六页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入微生物11.特点:结构都相当简单,个体多数十分微小,通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到,有的甚至没有细胞结构,且体内一般不含有叶绿素,不能进行光合作用。第6页/共38页第七页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入2.微生物包括五类病 毒细 菌放线菌真 菌原生动物第7页/共38页第八页,编辑

3、于星期五:十四点 二十分。新课导入培养基培养基2 培养基(培养液)是由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。第8页/共38页第九页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入固体培养基 液体培养基 半固体培养基1.1.培养基的类型培养基的类型成分区别:琼脂第9页/共38页第十页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入2.培养基的用途液体培养基:增菌、工业生产固体培养基:纯化(分离),鉴定、活菌计数、保藏菌种半固体培养基:动力检测第10页/共38页第十一页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入3.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方大肠杆菌配方 酵母提取物:0.25g 蛋白胨

4、:0.5g Nacl:0.5g 琼脂:1g 水:50ml第11页/共38页第十二页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入4.培养基内所含的基本物质一般营养物质水、碳源、氮源、无机盐其他物质pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需,而自身不能合成的化合物)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。 第12页/共38页第十三页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入无菌技术31.无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。 无菌操作是培养微生物成功的关键!第13页/共38页第十四页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入(1)消毒定义:2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 (2)灭

5、菌的定义:是指杀灭病原微生物的方法。 是指杀灭或清除环境中一切微生物(包括芽胞、孢子)的方法第14页/共38页第十五页,编辑于星期五:十四点 二十分。(1)(1)消毒的方法:消毒的方法:常用的消毒与灭菌的方法常用的消毒与灭菌的方法1 1、煮沸消毒法煮沸消毒法:100:100煮沸煮沸5-6min5-6min;2 2、巴氏消毒法巴氏消毒法:70-7570-75下煮下煮30min30min或或 8080下煮下煮15min15min;3 3、化学药剂消毒法化学药剂消毒法: :用用75%75%酒精、新洁尔酒精、新洁尔 灭等进行皮肤消毒灭等进行皮肤消毒; ;氯气消毒水源;氯气消毒水源;4 4、紫外线消毒紫

6、外线消毒;第15页/共38页第十六页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入1.灼烧灭菌(2)(2)常用灭菌的方法常用灭菌的方法第16页/共38页第十七页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入2.干热灭菌:160-170 下加热1-2h。3.高压蒸气灭菌:100kPa、121 下维持15-30min.第17页/共38页第十八页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入制备培养基制备培养基1纯化大肠杆菌纯化大肠杆菌2实验操作实验操作2 2第18页/共38页第十九页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入制备牛肉膏蛋白胨培养基1第19页/共38页第二十页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入倒平

7、板操作2灭菌后的培养基在无菌操作台上倒入4个培养皿中,倒后立即置于水平位置上,轻轻晃动,使培养基铺满平皿底部,待凝,使之形成平面。第20页/共38页第二十一页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入 1.培养基灭菌后,需要冷却到50 左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度? 答:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。第21页/共38页第二十二页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入 2.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么? 答:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的

8、培养基上滋生,因此最好不要用这个平板培养微生物。第22页/共38页第二十三页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入二 纯化大肠杆菌1.1.平板划线法:平板划线法: 1)灼烧接种环; 2)接种环冷却后,蘸取带菌培养物; 3)在近火焰处,让带菌接种环在固体培养基上划线。第23页/共38页第二十四页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入1 1.线条不重叠 2 2-3.从上次的末端开始,交叉23条线3 4 4.最后的划线不能与第一区相连。第24页/共38页第二十五页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入 注意事项:1.接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次。2.划线首尾不能相接。3

9、.划线后,培养皿倒置培养1224h。第25页/共38页第二十六页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入分离后,一个菌体便会形成一个菌落,这是消除污染杂菌的通用方法,也是用于筛选菌株的最简便方法之一。第26页/共38页第二十七页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入2.2.稀释涂布平板法稀释涂布平板法稀释操作第27页/共38页第二十八页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入 注意:移液管需要经过灭菌。操作时,试管口和移液管离火焰12cm处.第28页/共38页第二十九页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入大肠杆菌分离后保存51.临时保藏:接种到固体斜面培养基,菌落长成后置于4冰箱保存。2

10、.长期保存:甘油冷冻管藏法第29页/共38页第三十页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入(一)培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温12 d后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。实验操作成果评价实验操作成果评价3 3第30页/共38页第三十一页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入(二)接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致,并符合大肠杆菌菌落的特点,则说明接种操作是符合要求的;如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中,无菌操作还未达到要求,需要分析原因,再次练习。第31页/共38页第三十二页,编辑于星期五:十四

11、点 二十分。新课导入(三)是否进行了及时细致的观察与记录 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同,及时观察记录的同学会发现这一点,并能观察到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生良好的科学态度与习惯。第32页/共38页第三十三页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入微生物的实验室培养培养基培养基的类型培养基的营养物质无菌技术实验室常用的消毒方法实验室常用的灭菌方法制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算、称量、溶化、灭菌、倒平板纯化大肠杆菌平板划线法稀释涂布法结果分析与评价课题延伸第33页/共38页第三十四页,编辑于星期五:十四点 二十分。1关微生物营养物质的叙述中,正确的是

12、( )A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量D第34页/共38页第三十五页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入解析:A、B选项的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源;有的碳源可同时是氮源;有的碳源同时是能源;有的碳源同时是氮源,也是能源。对于C选项,除水以外的无机物种类繁多,功能也多样。对于D选项,无机氮源提供能量的情况还是存在的,如NH3可为硝化细菌提供能量和氮源。第35页/共38页第三十六页,编辑于星期五:十四点 二十分。新课导入2下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是( )A.防止杂菌污染 B.接种前菌种要进行灭菌C.培养基和发酵设备都必须灭菌 D.灭菌必须在接种前B第36页/共38页第三十七页,编辑于星期五:十四点 二十分。新

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