实验93 紫外分光光度法测定水果(或蔬菜)中的维生素C含量

1、1/10在线答疑：在线答疑： 大大学学通通用用化化学学实实验验技技术术紫外分光光度法测定水果（或紫外分光光度法测定水果（或蔬菜）中的维生素蔬菜）中的维生素C C含量含量实验实验93 93 紫外分光光度法测定水果紫外分光光度法测定水果（或蔬菜）中的（或蔬菜）中的维生素维生素C C含量含量93.1 93.1 实验目的实验目的 (1) (1) 掌握紫外分光光度计的工作原理及使用方法。掌握紫外分光光度计的工作原理及使用方法。 (2) (2) 掌握掌握水果（或蔬菜）中的水果（或蔬菜）中的维生素维生素C C含量的含量的测定方测定方法。法。 2/10在线答疑：在线答疑： 大大学学通通用用化化学学实实验验技技

2、术术紫外分光光度法测定水果（或紫外分光光度法测定水果（或蔬菜）中的维生素蔬菜）中的维生素C C含量含量93.2 93.2 实验原理实验原理 紫外快速测定维生素紫外快速测定维生素C C法，是根据维生素法，是根据维生素C C具有对具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，于紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，于243 nm243 nm处测定处测定样品液与碱处理样品液两者消光值之差，通过查标准样品液与碱处理样品液两者消光值之差，通过查标准曲线，即可计算样品中维生素曲线，即可计算样品中维生素C C的含量。的含量。3/10在线答疑：在线答疑： 大大学学通通用用化化学学实实验验技技术术紫外分光光度法测定水果（或紫

3、外分光光度法测定水果（或蔬菜）中的维生素蔬菜）中的维生素C C含量含量（一）标准曲线的制作（一）标准曲线的制作1 1抗坏血酸标准溶液的配制：用分析天平准确称取抗坏血酸标准溶液的配制：用分析天平准确称取抗坏血酸抗坏血酸10 mg10 mg，加，加2 mL 10%2 mL 10%盐酸，加蒸馏水定容至盐酸，加蒸馏水定容至100 100 mLmL，混匀。此抗坏血酸溶液的浓度为，混匀。此抗坏血酸溶液的浓度为100 g100 gmLmL-1-1。93.3 93.3 操作步骤操作步骤4/10在线答疑：在线答疑： 大大学学通通用用化化学学实实验验技技术术紫外分光光度法测定水果（或紫外分光光度法测定水果（或蔬菜

4、）中的维生素蔬菜）中的维生素C C含量含量 2. 2. 标准曲线的绘制标准曲线的绘制12345678标准抗坏血酸溶液加入体标准抗坏血酸溶液加入体积积/mL/mL0.10.20.30.40.50.60.81.09.99.89.79.69.59.49.29.0总体积总体积/mL/mL10.010.010.010.010.010.010.010.0抗坏血酸溶液浓度抗坏血酸溶液浓度/(gmL/(gmL-1-1）1.02.03.04.05.06.08.010.05/10在线答疑：在线答疑： 大大学学通通用用化化学学实实验验技技术术紫外分光光度法测定水果（或紫外分光光度法测定水果（或蔬菜）中的维生素蔬菜）

5、中的维生素C C含量含量 3 3消光值的测定：以蒸馏水为空白，在消光值的测定：以蒸馏水为空白，在243 nm243 nm处处测定标准系列抗坏血酸溶液的消光值，以抗坏血酸的含测定标准系列抗坏血酸溶液的消光值，以抗坏血酸的含量（量（gg）为横坐标，以相应的消光值为纵坐标作标准）为横坐标，以相应的消光值为纵坐标作标准曲线。曲线。6/10在线答疑：在线答疑： 大大学学通通用用化化学学实实验验技技术术紫外分光光度法测定水果（或紫外分光光度法测定水果（或蔬菜）中的维生素蔬菜）中的维生素C C含量含量 （二）样品的测定（二）样品的测定 1 1样品的提取：将果蔬样品洗净、擦干、切碎、混匀。样品的提取：将果蔬样

6、品洗净、擦干、切碎、混匀。称取称取5.00 g5.00 g于研体中，加入于研体中，加入2 25 mL 1%5 mL 1% HClHCl，匀浆，转移到，匀浆，转移到25 mL25 mL容量瓶中，稀释至刻度。若提取液澄清透明，则可直接容量瓶中，稀释至刻度。若提取液澄清透明，则可直接取样测定，若有浑浊现象，可通过离心（取样测定，若有浑浊现象，可通过离心（10000 g, 10 min10000 g, 10 min）来消除。来消除。 2 2样品的测定：取样品的测定：取0.10.10.2 mL0.2 mL提取液，放入盛有提取液，放入盛有0.20.20.4 mL 10%0.4 mL 10%盐酸的盐酸的10

7、 mL10 mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度后摇容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度后摇匀。以蒸馏水为空白，在匀。以蒸馏水为空白，在243 nm243 nm处测定其消光值。处测定其消光值。 3 3待测碱处理液的制备：分别吸取待测碱处理液的制备：分别吸取0.10.10.2 mL0.2 mL提取液，提取液，2 mL2 mL蒸馏水和蒸馏水和0.60.60.8 mL 1 mol0.8 mL 1 molL L-1-1 NaOHNaOH溶液依次放入溶液依次放入10 10 mLmL容量瓶中，混匀，容量瓶中，混匀，15min15min后加入后加入0.60.60.8 mL 10%0.8 mL 10% HClHCl，混，

8、混匀，并定容至刻度。以蒸馏水为空白。在匀，并定容至刻度。以蒸馏水为空白。在243 nm243 nm处测定其消处测定其消光值。光值。7/10在线答疑：在线答疑： 大大学学通通用用化化学学实实验验技技术术紫外分光光度法测定水果（或紫外分光光度法测定水果（或蔬菜）中的维生素蔬菜）中的维生素C C含量含量4 4由待测样品与待测碱处理样品的消光值之差和由待测样品与待测碱处理样品的消光值之差和标准曲线，即可计算出样品中维生素标准曲线，即可计算出样品中维生素C C的含量。的含量。5 5也可直接以待测碱处理液为空白，测出待测液也可直接以待测碱处理液为空白，测出待测液的消光值，通过查标准曲线，计算出样品的维生素

9、的消光值，通过查标准曲线，计算出样品的维生素C C的的含量。含量。8/10在线答疑：在线答疑： 大大学学通通用用化化学学实实验验技技术术紫外分光光度法测定水果（或紫外分光光度法测定水果（或蔬菜）中的维生素蔬菜）中的维生素C C含量含量93.4 93.4 计算计算 V V总总维生素维生素C C的含量（的含量（g/gg/g）= = V V1 1W W总总式中：式中：从标准曲线上查得的抗坏血酸的含量从标准曲线上查得的抗坏血酸的含量（gg）V V1 1测消光值时吸取样品溶液的体积（测消光值时吸取样品溶液的体积（mLmL）V V总总样品定容体积（样品定容体积（mLmL）W W总总称样重量（称样重量（g

10、g）9/10在线答疑：在线答疑： 大大学学通通用用化化学学实实验验技技术术紫外分光光度法测定水果（或紫外分光光度法测定水果（或蔬菜）中的维生素蔬菜）中的维生素C C含量含量93.5 93.5 问题讨论问题讨论（）除了本实验中的方法外，抗坏血酸还有哪些（）除了本实验中的方法外，抗坏血酸还有哪些测定方法测定方法? ? 10/10在线答疑：在线答疑： 大大学学通通用用化化学学实实验验技技术术紫外分光光度法测定水果（或紫外分光光度法测定水果（或蔬菜）中的维生素蔬菜）中的维生素C C含量含量 （1 1）除了本实验中的方法外，抗坏血酸还有哪些测定方法）除了本实验中的方法外，抗坏血酸还有哪些测定方法? ? 答：一、氧化还原法答：一、氧化还原法 1. 1. 直接碘量法直接碘量法 2. 2,6-2. 2,6-二氯酚靛酚滴定法二氯酚靛酚滴定法 二、分光光度法二、分光光度法 1. 1. 紫外快速测定法紫外快速测定法 2. 2,4-2. 2,4-二硝基苯肼