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文档简介
1、南华大学医学院机能学实验中心目的与要求目的与要求o 掌握掌握Straud离体工作蛙心的灌流方法离体工作蛙心的灌流方法 o 观察钠、钾、钙三种离子与肾上腺素、异丙观察钠、钾、钙三种离子与肾上腺素、异丙肾上腺素、去甲肾上腺素、肾上腺素、去甲肾上腺素、 乙酰胆碱、乙酰胆碱、 强强心甙、氨茶碱等对离体心脏的作用心甙、氨茶碱等对离体心脏的作用 重点和难点重点和难点重点重点o Straud离体工作蛙心的制备与灌流方法离体工作蛙心的制备与灌流方法 o BL-420生物信息记录系统检测记录心肌收缩生物信息记录系统检测记录心肌收缩张力曲线张力曲线 难点难点o 0.65%NaCl对心肌收缩张力曲线影响的机对心肌收
2、缩张力曲线影响的机制制 o 乙酰胆碱对心肌收缩张力曲线影响的机制乙酰胆碱对心肌收缩张力曲线影响的机制 课前提问课前提问o 离体工作蛙心如何制备离体工作蛙心如何制备o 肾上腺素、肾上腺素、 乙酰胆碱、乙酰胆碱、 强心甙、氨茶碱这强心甙、氨茶碱这几种药物中能增强心脏收缩张力的是哪几个?几种药物中能增强心脏收缩张力的是哪几个?其作用机制是什么其作用机制是什么实验方法与步骤实验方法与步骤1、离体蛙心的制备、离体蛙心的制备AB2、连接仪器,记录心脏收缩张力曲线、连接仪器,记录心脏收缩张力曲线实验方法与步骤实验方法与步骤3、加药,观察心脏收缩张力曲线变化、加药,观察心脏收缩张力曲线变化正常正常 0.65%
3、NaCl 3%CaCl2 1%KCl 1:10000肾上腺素溶液肾上腺素溶液 1:100000的的Ach 1:10000异丙肾上腺素异丙肾上腺素 25:100000的毒的毒K 25:10000氨茶碱氨茶碱 实验方法与步骤实验方法与步骤注意事项注意事项(1) 制备蛙心标本时,勿伤及静脉窦制备蛙心标本时,勿伤及静脉窦(2) 上述各实验项目,一旦出现变化就应立即用新上述各实验项目,一旦出现变化就应立即用新鲜任氏液换洗,以免心肌受损,必须待心功能恢复鲜任氏液换洗,以免心肌受损,必须待心功能恢复正常后方能进行下一步实验正常后方能进行下一步实验(3) 蛙心插管液面应保持恒定,以免影响结果蛙心插管液面应保持
4、恒定,以免影响结果(4) 滴加药品和换取新鲜任氏液须及时标记,以便滴加药品和换取新鲜任氏液须及时标记,以便观察分析观察分析(5) 吸新鲜任氏液和吸蛙心插管内废液的滴管应区吸新鲜任氏液和吸蛙心插管内废液的滴管应区分专用,不可混淆使用,以免影响实验结果分专用,不可混淆使用,以免影响实验结果(6) 药物作用不明显时,可适量增加,密切观察药药物作用不明显时,可适量增加,密切观察药物剂量添加后的实验结果物剂量添加后的实验结果 分析讨论分析讨论1、0.65%NaCl 0.65%NaCl灌流灌流 细胞外液细胞外液Ca2+ 心肌细胞动作电位期间心肌细胞动作电位期间 Ca2+ 内流内流 心肌细胞胞浆心肌细胞胞浆
5、Ca2+ 心肌收缩力收缩心肌收缩力收缩 细胞外液细胞外液Ca2浓度升高浓度升高慢反应细胞慢反应细胞4期自动除期自动除极化速度增加极化速度增加自律性增加自律性增加工作细胞动作电位期工作细胞动作电位期间间Ca2内流增加内流增加肌浆肌浆Ca2浓度增加浓度增加兴奋收缩耦联增强兴奋收缩耦联增强心肌收缩力增强心肌收缩力增强心率增快心率增快2、3%CaCl2分析讨论分析讨论细胞外液细胞外液K浓度升高浓度升高K抑制抑制Ca2内流内流心肌收缩力下降心肌收缩力下降膜内外膜内外K浓度梯度下降浓度梯度下降静息电位绝对值减小静息电位绝对值减小静息电位与阈电位静息电位与阈电位水平的电位差减小水平的电位差减小心肌细胞兴奋性
6、增高心肌细胞兴奋性增高Ca2内流减少内流减少兴奋收缩耦联削弱兴奋收缩耦联削弱3、1%KCl分析讨论分析讨论心肌细胞膜心肌细胞膜1受体结合受体结合Ca2与肌钙蛋白亲与肌钙蛋白亲和力增加,肌浆网和力增加,肌浆网摄钙速度增加摄钙速度增加心肌舒张延长心肌舒张延长细胞膜对细胞膜对Ca2通通透性增加透性增加4期自动除极化速期自动除极化速度增加度增加自律性增加,心率加快自律性增加,心率加快复极期肌浆复极期肌浆Ca2浓浓度降低速度增加度降低速度增加肾上腺素肾上腺素肌浆网对肌浆网对Ca2通透性增加通透性增加动作电位期间动作电位期间Ca2内流性增加内流性增加心肌收缩力增强心肌收缩力增强4、肾上腺素、肾上腺素分析讨
7、论分析讨论心肌细胞膜心肌细胞膜M受体结受体结合合细胞膜对细胞膜对K通通透性增加透性增加自律性降低自律性降低,心率心率减慢减慢细胞膜对细胞膜对Ca2通透性下降通透性下降动作电位期间动作电位期间Ca2内流减少内流减少心肌收缩力降低心肌收缩力降低窦房结细胞最大复窦房结细胞最大复极电位绝对值增大极电位绝对值增大4期期K+外流增加外流增加Ach抑制钙通道抑制钙通道5、Ach分析讨论分析讨论6、异丙肾上腺素:、异丙肾上腺素:激动激动1受体,机制同肾上腺素,心率加快,收缩增强受体,机制同肾上腺素,心率加快,收缩增强7、低钙任氏液:、低钙任氏液:细胞外液钙离子减少,兴奋收缩耦联削弱,心率减慢,细胞外液钙离子减
8、少,兴奋收缩耦联削弱,心率减慢,收缩减弱,模拟心衰收缩减弱,模拟心衰8、毒、毒K : 强心苷类药物,可选择性作用于心肌细胞,可竞强心苷类药物,可选择性作用于心肌细胞,可竞争性抑制心肌细胞膜上的争性抑制心肌细胞膜上的NaKATP酶,使心肌酶,使心肌细胞内细胞内Ca2含量增加,产生正性肌力作用,使心肌收含量增加,产生正性肌力作用,使心肌收缩力增强缩力增强 分析讨论分析讨论9、氨茶碱、氨茶碱 磷酸二酯酶抑制剂,磷酸二酯酶是磷酸二酯酶抑制剂,磷酸二酯酶是cAMP降解酶,抑制此酶可增加细胞内降解酶,抑制此酶可增加细胞内cAMP含量,发挥正性肌力作用含量,发挥正性肌力作用 分析讨论分析讨论结论结论1、0.65%NaCl,1:100 000Ach,低,低钙任氏液可使蛙心频率减慢,心跳幅度减钙任氏液可使蛙心频率减慢,心跳幅度减小;小;2、3%CaCl2,1:10 000肾上腺素,肾上腺素,1:10 000异丙肾上腺素,异丙肾上腺素,25:10 000氨茶氨茶碱可使蛙心频率增快,心跳幅度增大;碱可使蛙心频率增快,心跳幅度增大;3、25:100 000毒毒K可使蛙心频率减慢,可使蛙心频率减慢,心跳幅度增大;心跳幅度增大;4、1%KCl可使蛙心频率增快,心跳幅可使蛙心频率增快,心跳幅度减小度减小 思考题思考题如任氏液中钾离子浓度明显增高,蛙心会处于什么状态?如任氏液中钾离子浓度明显增高,蛙
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