第八章血液与成分制备和保存一

1、血液及血液成分的制备和保存血液及血液成分的制备和保存临床检验学教研室临床检验学教研室 曾涛曾涛TELmail: Chapter 82022-4-182承担课题承担课题 国家自然科学基金国家自然科学基金, Kin17 在非小细胞肺癌中的表达、作用及分在非小细胞肺癌中的表达、作用及分子机制研究子机制研究, 批准号批准号81201831, 经费经费23万元，万元，2013.012015.12； 广东省自然科学基金广东省自然科学基金，Kin17对乳腺癌细胞致瘤性的影响及其分对乳腺癌细胞致瘤性的影响及其分子机制研究，编号子机制研究，编号S2012040006310，1万元，万元

2、，2012.102014.10； 广东省医学科学技术研究基金广东省医学科学技术研究基金，Kin17在肺癌中的表达及其与患在肺癌中的表达及其与患者预后关系的研究，编号者预后关系的研究，编号B2012266，1万元，万元，2012.012013.12； 广东医学院科研基金项目广东医学院科研基金项目， Kin17在肺癌中的表达、作用及其在肺癌中的表达、作用及其分子机制研究，编号分子机制研究，编号B2011021, 经费经费10万元，万元，2012.062014.06； 广东医学院大学生创新实验项目广东医学院大学生创新实验项目, Kin17在肺癌中的表达及其与在肺癌中的表达及其与患者预后关系的研究患者

3、预后关系的研究, 2011ZYDC005 , 0.15万元万元,2011.092012.122022-4-183OUTLINE 全血输注与成分血输注的优缺点全血输注与成分血输注的优缺点 全血制备和保存全血制备和保存 血液成分制备和保存血液成分制备和保存 概述 红细胞制备和保存 粒细胞制备和保存 血小板制备和保存 冰冻血浆、冷沉淀、血浆制品制备和保存2022-4-184临床用血的流程：临床用血的流程：献血者献血者血站血站医疗机构医疗机构患者患者2022-4-185临床使用的血液制品临床使用的血液制品 全血全血：将血液采入含有保养液的血袋中，不作任何加工。将血液采入含有保养液的血袋中，不作任何加工

4、。 血液成分血液成分/ /成分血成分血（Blood componantBlood componant）：）：指用物理或化指用物理或化学的方法，将采集的全血中的各种有效成分分离出来，分学的方法，将采集的全血中的各种有效成分分离出来，分别制成高浓度、高纯度、临床疗效好的单一血液成分制品别制成高浓度、高纯度、临床疗效好的单一血液成分制品如红细胞、血小板、血浆等。如红细胞、血小板、血浆等。2022-4-186国内外血液输注概况国内外血液输注概况 上海上海: : 红细胞红细胞 37.01%37.01%血小板血小板 20.22%20.22% 血血 浆浆 36.02% 36.02% 冷沉淀冷沉淀 4.11%

5、4.11% 白细胞白细胞 0.61%0.61%全全 血血 2.03%2.03% 日本：日本： 红细胞红细胞 29.26%29.26%血小板血小板 40.77%40.77% 血血 浆浆 28.09% 28.09% 全全 血血 1.88%1.88% 美国：美国： 红细胞红细胞 42.89%42.89%血小板血小板 39.96%39.96% 血血 浆浆 11.96%11.96%冷沉淀冷沉淀 4.69%4.69% 全全 血血 0.5%0.5%2022-4-1873 3606083830 02020404060608080100100 % % 高高HDIHDI 中中HDIHDI 低低HDIHDI全血输注

6、的现状全血输注的现状2022-4-188全血输注输注减少的原因全血输注输注减少的原因 全血并不全：全血并不全：目前的血液保养液和保存温度目前的血液保养液和保存温度44是是针对存储红细胞而设计的，其他的成分（粒细胞、针对存储红细胞而设计的，其他的成分（粒细胞、血小板、凝血因子特别是血小板、凝血因子特别是和和）都未在最佳环境）都未在最佳环境下保存，很快丧失其应有的生理功能；下保存，很快丧失其应有的生理功能； 血液成分在全血中的浓度不高：血液成分在全血中的浓度不高：治疗效果不佳；治疗效果不佳； 血液成分在全血中的不纯而产生副作用：血液成分在全血中的不纯而产生副作用：增加患者增加患者的代谢负担和心脏负

7、担，引发心力衰竭、肺水肿甚的代谢负担和心脏负担，引发心力衰竭、肺水肿甚至死亡；而且容易产生同种免疫，不良反应多。至死亡；而且容易产生同种免疫，不良反应多。2022-4-189成分输血优点成分输血优点 浓度高、疗效好；浓度高、疗效好； 容量小、纯度高、使用安全，不良反应少；容量小、纯度高、使用安全，不良反应少； 后续处理程序可以减少输血传播疾病的发生；后续处理程序可以减少输血传播疾病的发生； 可满足血液成分的最佳保存条件，保存时间最长；可满足血液成分的最佳保存条件，保存时间最长； 一血多用，节约血液资源；一血多用，节约血液资源； 血小板血小板2022-4-1810成份血输注的比例逐渐升高成份血输

8、注的比例逐渐升高 美国在美国在2020世纪世纪7070年代初成分输血量只占总输血量的年代初成分输血量只占总输血量的50%50%，8888年至今已升至年至今已升至98%98%以上；以上； 加拿大已达加拿大已达90%90%； 法国法国92.9%92.9%； 日本日本7575年占年占35%35%，20022002年亦达年亦达95%95%以上；以上； 台湾台湾7979年只占年只占2%2%到到9999年提高到年提高到90%90%以上；以上； 我国我国19981998年年19.019.0，部分省市达，部分省市达9090以上。以上。2022-4-1811 全血全血：将血液采入含有保养液：将血液采入含有保养液

9、的血袋中，不作任何加工；的血袋中，不作任何加工； 我国已广泛使用密闭式无菌塑我国已广泛使用密闭式无菌塑料血袋采集系统；料血袋采集系统； 1u=200ml1u=200ml第一部分、全血制备和保存第一部分、全血制备和保存2022-4-1812全血采集注意事项全血采集注意事项 严格无菌操作，穿刺部位需彻底消毒；严格无菌操作，穿刺部位需彻底消毒； 采集的血液应无凝块、无溶血、无乳糜，采血量应为采集的血液应无凝块、无溶血、无乳糜，采血量应为标示量的标示量的10%10%； 采血速度：采血速度：200ml 3min200ml 3min内采完，内采完，400ml 6min400ml 6min内采完；内采完；

10、采血中血流不畅，不能用于制备血小板浓缩物采血中血流不畅，不能用于制备血小板浓缩物; ;2022-4-1813全血的保存和运输全血的保存和运输 保存条件保存条件不分离血小板：不分离血小板：4422保存。保存。分离血小板：在分离血小板：在20202424条件保存至分离成分。条件保存至分离成分。 运输运输：发往临床时，温度：发往临床时，温度2 21010，最长时间不超过，最长时间不超过2424小时。小时。 随着储存时间的延长，全血中的有效成分（随着储存时间的延长，全血中的有效成分（2,3-DPG2,3-DPG、ATPATP、血小板等）会逐渐减少或失活，而一些有害成分（氨血小板等）会逐渐减少或失活，而

11、一些有害成分（氨、游离游离血红蛋白血红蛋白、钾等）又会逐渐增加。钾等）又会逐渐增加。2022-4-1814ACD-AACD-BCPDCP2DCPDA-1CPDA-2枸橼酸钠22.013.226.326.326.326.3枸橼酸8.04.83.273.273.273.27葡萄糖24.514.725.551.131.844.6磷酸二氢钠2.222.222.222.22腺嘌呤0.2750.550比率1.5:102.5:101.4:10 1.4:101.4:101.4:10保存天数212121213542血液保存液配方（血液保存液配方（g/L）与保存时间）与保存时间抗凝抗凝防氧化防氧化供能供能减缓减缓

12、2,3-DPG下降下降促进促进ATP合成合成2022-4-18152022-4-1816第二部分、血液成分的制备第二部分、血液成分的制备 狭义狭义：指使用物理方法提取并在临床使用的血液成分，：指使用物理方法提取并在临床使用的血液成分，如血细胞成分、血浆、冷沉淀等，称为血液制剂；如血细胞成分、血浆、冷沉淀等，称为血液制剂； 广义广义：指采用精细的物理或化学方法对血液成分进一步：指采用精细的物理或化学方法对血液成分进一步地提炼精制而得到的高度浓缩地提炼精制而得到的高度浓缩、纯化的血液成分制品，纯化的血液成分制品，如血浆衍生物如血浆衍生物、血浆蛋白制品（、血浆蛋白制品（白蛋白、免疫球蛋白、白蛋白、免

13、疫球蛋白、凝血因子浓缩物等凝血因子浓缩物等），称为血液制品。），称为血液制品。2022-4-1817血液产品血液产品人血液成份分类人血液成份分类血液制剂血液制剂全血全血成分血成分血红细胞红细胞粒细胞粒细胞血浆血浆血小板血小板冷沉淀冷沉淀血浆制品：血浆制品：造血干细胞造血干细胞凝血因子凝血因子VIIIVIII白蛋白白蛋白免疫球蛋白免疫球蛋白凝血酶原复合物凝血酶原复合物纤维蛋白原纤维蛋白原2022-4-1818血液成分的制备原理血液成分的制备原理物理方法物理方法：通过密度梯度离心、过滤等方法将血液：通过密度梯度离心、过滤等方法将血液分离成纯度较高的单一成分。分离成纯度较高的单一成分。血小板密度为血

14、小板密度为1.030-1.0601.030-1.060，体积为，体积为16161010-15-15/L/L；淋巴细胞密度为淋巴细胞密度为1.050-1.0781.050-1.078，体积为，体积为2302301010-15-15/L/L；中性粒细胞密度为中性粒细胞密度为1.080-1.0951.080-1.095，体积为，体积为4504501010-15-15/L/L；红细胞密度为红细胞密度为1.090-1.1111.090-1.111，体积为，体积为87871010-15-15/L/L；血浆密度为血浆密度为1.025-1.0301.025-1.030。化学方法化学方法：低温乙醇法，：低温乙醇

15、法，19461946年由年由CohnCohn和他的同事和他的同事发明的，现被一些血液制品企业采用。发明的，现被一些血液制品企业采用。2022-4-1819血液成分的制备原理血液成分的制备原理2022-4-1820血液成分的制备方法血液成分的制备方法手工法手工法：用多联袋采集全血，利用血液低温离心机离心、过：用多联袋采集全血，利用血液低温离心机离心、过滤后，将血液的不同成分分离出来。（红细胞、血浆、血小滤后，将血液的不同成分分离出来。（红细胞、血浆、血小板、白细胞）板、白细胞） 采血袋：依照用途不同，可分为单联袋、二联袋、三联采血袋：依照用途不同，可分为单联袋、二联袋、三联袋、四联袋以及双二联袋

16、等；用三通管并联起来，其规格分袋、四联袋以及双二联袋等；用三通管并联起来，其规格分为采血为采血200200400ml400ml不等。用塑料联袋采集血液，使血液成分不等。用塑料联袋采集血液，使血液成分可以在密闭无菌的条件下进行分离。可以在密闭无菌的条件下进行分离。单采机法单采机法：直接用血细胞分离机采集各种成分。（血小板）：直接用血细胞分离机采集各种成分。（血小板）2022-4-1821大容量冷冻离心机大容量冷冻离心机2022-4-18222022-4-1823血细胞单采机血细胞单采机2022-4-1824血液成分单采机的血液成分单采机的种类及工作原理种类及工作原理 离心式：用于分离细胞，如血小

17、板、造血干细胞离心式：用于分离细胞，如血小板、造血干细胞 膜过滤式（血浆）：膜过滤式（血浆）：血液进入单采机后，全血在一定压力下流经一特定孔径大小的滤膜，比滤膜孔径小得血浆穿过滤膜进入滤液，未能穿越过膜孔的血细胞部分回输给献血者，以此使血液不同成分分离。 吸附式（血浆）：吸附式（血浆）：该类机具有特异性吸附柱。当患者血液流经此柱时，可以吸附病理性抗体、蛋白质抗原和免疫复合物，经净化的血液则回输给患者。2022-4-1825离心式血细胞分离机离心式血细胞分离机 原理：机器内部有一个离心分离杯，全血通过管道原理：机器内部有一个离心分离杯，全血通过管道进入分离杯后在一定转速下旋转，通过离心力的作进入

18、分离杯后在一定转速下旋转，通过离心力的作用，相对密度不同的成分进入不同的分层，所需成用，相对密度不同的成分进入不同的分层，所需成分被保留，其余成分通过管道回输献血者体内。分被保留，其余成分通过管道回输献血者体内。 分分连续流动式：双静脉通路连续流动式：双静脉通路 断续流动离心式：单静脉通路断续流动离心式：单静脉通路2022-4-1826a. 连续流动式血细胞分离机连续流动式血细胞分离机2022-4-1827b. 断续流动离心式血细胞分离机断续流动离心式血细胞分离机2022-4-1828血液及血液成分的贮存温度与时间血液及血液成分的贮存温度与时间（重点）（重点）全血和红细胞制剂：全血和红细胞制剂

19、：26，35天；浓缩血小板：浓缩血小板：2024 ，震荡条件下保存，频率为60次/分，振幅为4cm，5天；浓缩粒细胞：浓缩粒细胞： 2024 ，最多24小时；新鲜冰冻血浆、冷沉淀物新鲜冰冻血浆、冷沉淀物 ：20 ，1年；普通普通冰冻血浆冰冻血浆:20 ，5年；冰冻红细胞：冰冻红细胞：甘油终浓度为40%，-80 可保存3年；低浓度甘油速冻，可保存10年。2022-4-1829血液成分单位的概念血液成分单位的概念名称名称 容量容量 单位单位全血 200ml 1U浓缩RBC 120ml 1U血浆 100/200ml 1U机采血小板 150-200 1U/1治疗量手工分血小板 20-30ml 2U/4

20、00ml全血冷沉淀 20-30ml 1U/200ml全血白细胞 150-200ml 1U/袋2022-4-1830一一. 红细胞制品红细胞制品 浓缩红细胞浓缩红细胞 悬浮红细胞悬浮红细胞 洗涤红细胞洗涤红细胞 冰冻红细胞冰冻红细胞 少白细胞的红细胞少白细胞的红细胞 辐照红细胞辐照红细胞 年轻红细胞年轻红细胞2022-4-18311.1.浓缩红细胞浓缩红细胞 将采集到多联袋内的全血中的大部分血浆，在全封闭的将采集到多联袋内的全血中的大部分血浆，在全封闭的条件下分离出后，剩余的部分所制成的红细胞成分血；条件下分离出后，剩余的部分所制成的红细胞成分血； 浓缩红细胞可以在全血有效保存期内任何时间分离出

21、部浓缩红细胞可以在全血有效保存期内任何时间分离出部分血浆制备而成；分血浆制备而成； 一般用二联袋采集的全血制备浓缩红细胞。一般用二联袋采集的全血制备浓缩红细胞。一只含有抗一只含有抗凝保养液（主袋），还有一只是空袋；凝保养液（主袋），还有一只是空袋； 制备过程：离心（制备过程：离心（ 4422）将部分血浆分入空的转将部分血浆分入空的转移袋内移袋内热合切断塑料袋间的连接管。热合切断塑料袋间的连接管。2022-4-18322022-4-18332. 悬浮红细胞悬浮红细胞（suspended RBC）-又称添加剂红细胞又称添加剂红细胞 将全血中绝大部分将全血中绝大部分(90%)(90%)血浆在全封闭的

22、条件下分离出后，血浆在全封闭的条件下分离出后，向剩余的部分加入红细胞添加剂制成的红细胞成分；向剩余的部分加入红细胞添加剂制成的红细胞成分； 三联袋：一只含有抗凝保存液（主袋），一只含有添加剂，三联袋：一只含有抗凝保存液（主袋），一只含有添加剂，还有一只是空袋；还有一只是空袋； 制备过程：离心（制备过程：离心（ 4422）将部分血浆分入空的转将部分血浆分入空的转移袋内（血浆袋）移袋内（血浆袋）将添加液加入主袋内。将添加液加入主袋内。2022-4-1834AS-1AS-1AS-3AS-3AS-5AS-5葡萄糖葡萄糖2200220011001100900900腺嘌呤腺嘌呤272730303030磷酸

23、二氢钠磷酸二氢钠0 02762760 0甘露醇甘露醇7507500 0525525氯化钠氯化钠900900410410877877枸橼酸钠枸橼酸钠0 05885880 0枸橼酸枸橼酸0 042420 0几种红细胞添加液的组成（几种红细胞添加液的组成（mg/100ml）2022-4-1835悬浮红细胞悬浮红细胞 是目前国内外临床应用最广泛的一种红细胞制剂；是目前国内外临床应用最广泛的一种红细胞制剂； 原因：添加剂延长了红细胞寿命，保存期长；红细原因：添加剂延长了红细胞寿命，保存期长；红细胞被添加剂稀释了，输注更流畅；大部分血浆已移胞被添加剂稀释了，输注更流畅；大部分血浆已移去，不良反应的发生率明

24、显减少。去，不良反应的发生率明显减少。添加液的种类与红细胞保存期限添加液的种类与红细胞保存期限添加液种类添加液种类CPDA-1CPDA-1MAPMAPSAGMSAGMAS-1AS-1 AS-3AS-3 AS-5AS-5红细胞保存红细胞保存期限（天）期限（天）3535353535354242424242422022-4-1836 将全血、浓缩红细胞或悬浮红细胞在无菌条件下将全血、浓缩红细胞或悬浮红细胞在无菌条件下用生理盐水洗涤，并将红细胞悬浮在生理盐水中用生理盐水洗涤，并将红细胞悬浮在生理盐水中所制成的成分血。所制成的成分血。 未超过保存期的红细胞均可洗涤。未超过保存期的红细胞均可洗涤。 比较彻

25、底的去除血浆和白细胞：血浆清除率比较彻底的去除血浆和白细胞：血浆清除率 98%98%；白细胞清除率；白细胞清除率80%80%，红细胞回收率，红细胞回收率70%70%。 保存温度保存温度 ：2 26 6 ，有效期：，有效期：2424小时。小时。3. 洗涤红细胞洗涤红细胞2022-4-1837洗涤红细胞制备方法洗涤红细胞制备方法 盐水联袋式洗涤红细胞：三联、四联盐水联袋式洗涤红细胞：三联、四联 开放式洗涤红细胞开放式洗涤红细胞 机器洗涤红细胞机器洗涤红细胞2022-4-1838开放式洗涤红细胞开放式洗涤红细胞机器洗涤红细胞机器洗涤红细胞2022-4-18394. 冰冻红细胞冰冻红细胞 将保存时间在

26、将保存时间在6 6日内的全血、浓缩红细胞或悬浮红日内的全血、浓缩红细胞或悬浮红细胞中的红细胞分离出来，采用甘油作为冰冻保细胞中的红细胞分离出来，采用甘油作为冰冻保护剂深低温存，根据临床需要再进行解冻、洗涤护剂深低温存，根据临床需要再进行解冻、洗涤去甘油处理的特殊红细胞制剂。去甘油处理的特殊红细胞制剂。 是长期保存红细胞的一种理想方法，主要用于稀是长期保存红细胞的一种理想方法，主要用于稀有血型血液的保存。有血型血液的保存。2022-4-1840冰冻红细胞制备方法冰冻红细胞制备方法 高浓度甘油慢冻法高浓度甘油慢冻法：盐水洗涤法和糖浆洗涤法：盐水洗涤法和糖浆洗涤法40%40%甘油，在甘油，在-80-

27、80保存，保存期为保存，保存期为3 3年。年。 低浓度甘油速冻法低浓度甘油速冻法：28%28%甘油，超低温冰箱保存，保存期为甘油，超低温冰箱保存，保存期为1010年以上。年以上。l 冰冻细胞解冻后在冰冻细胞解冻后在4 422保存，保存，2424小时内输注。小时内输注。2022-4-18415. 年轻红细胞年轻红细胞（了解）（了解） 是一种具有较多的网织红细胞是一种具有较多的网织红细胞、酶活性相对增高酶活性相对增高、平均细胞年龄较小的红细胞成分。平均细胞年龄较小的红细胞成分。 制备方法制备方法 手工法：利用年轻红细胞比老年红细胞体积大，手工法：利用年轻红细胞比老年红细胞体积大，重量轻来离心分离；重量轻来离心分离； 血细胞分离机法：血细胞分离机法： 26，CPD-1保养液保存保养液保存35天。天。2022-4-1842 患者女，患者女，5050岁，因患结肠癌行选择性结肠切除术。岁，因患结肠癌行选择性结肠切除术。手术期间给病人输手术期间给病人输400ml400ml保存保存2424小时之内的新鲜全小时之内的新鲜全血（病人女儿捐献，未辐照）血（病人女儿捐献，未辐照）。患者免疫功能正常，。患者免疫功能正常，未用免疫抑制药。输血后未用免疫抑制药。输血后1111天，出现高热，天，出现高热，1212天全天全身皮肤出现红色斑丘疹，皮疹日益加重，身皮肤出现红色斑丘疹，皮疹日益加重，1414天肝