生理学试验学习教案

1、会计学1生理学试验生理学试验(shyn)第一页，共31页。第一章 总论(zn ln)、目的和要求目的：1.正确使用仪器设备，初步掌握基本操作技术(jsh)；2.巩固生理学基本理论;3.培养观察、比较、分析和综合的能力以及独立思考、解决实际问题的能力;4.为其它实验课程打下基础要求：实验前：预习 复习 预测 实验时：认真听讲 按步骤操作 人人动手 仔细观察 勤于思考 爱护动物和设备实验后：清洁实验用品 收集实验资料 按时交实验报告第1页/共31页第二页，共31页。第一章 总论(zn ln)二、实验结果的处理1.定量资料，如高低、长短、快慢、轻重(qngzhng)、多少等，以法定计量单位和数值予以

2、表达。2.在可以记录到曲线的实验项目中，在曲线上标写图注，如度量标尺及单位、刺激开始和终止的标志、时间标志等。 第2页/共31页第三页，共31页。第一章 总论(zn ln)三实验报告1. 【实验者姓名、班级及学号】2. 【实验日期及室温】 3. 【实验题目】4. 【实验目的】 5. 【实验原理】 6. 【实验对象(动物)】 7. 【器材和药品】 8. 【方法与步骤】 9. 【实验结果及分析】 10. 【讨论】 讨论是重点内容。实验中环境条件、动物个体、药物剂量等差异，可能出现各种误差(wch)及非预期性的结果，应客观分析其产生的原因，尽可能提出个人有价值的见解。 11. 【结论】一种概括性、原

3、则性、理论性的简明总结，不要再具体罗列结果。有的实验结果不能明确地推导出某种理论性的结论，也可以不写结论。 撰写实验报告时要强调独立思考和进行创造性的理论思维训练，切忌互相抄袭和盲 目引用书本既定结论。 第3页/共31页第四页，共31页。第一章 总论(zn ln)四实验室规则(guz) 第4页/共31页第五页，共31页。第二章 常用(chn yn)仪器 一、 BL-420生物机能实验系统（一）概述1、用途和组成：BL-420生物机能实验系统是配置(pizh)在微机上的4通道生物信号采集、放大、显示、记录与处理系统。组成：（1）、微机（2）、BL-420系统硬件（3）、TM_WAVE生物信号采集

4、与分析软件：可同时显示4通道从生物体内或离体器官中探测到的生物电信号或张力、压力等生物非电信号的波形，并可对实验数据进行存贮、分析及打印，从而对生物机体在不同的生理或药理实验条件下所发生的机能变化加以记录与分析。 其他实验附件则可根据实验需要进行配置(pizh)，比如，血压换能器、张力换能器、呼吸换能器、各种引导电极及刺激电极等。 第5页/共31页第六页，共31页。第二章 常用(chn yn)仪器 2、BL-420系统(xtng)原理 生物(shngw)电信号生物非电信号传感器引入生物机能信号数字信号波形显示、存贮、处理和分析放大、滤波模数转换第6页/共31页第七页，共31页。第二章 常用(c

5、hn yn)仪器 （二）、BL-420F系统操作1、BL-420F系统前面板说明(shumng)CH1、CH2、CH3、CH4：生物信号输入接口（可连接引导电极、压力传感器、 张力传感器等）全导联心电输入口(ECG): 用于输入全导联心电信号记滴/触发输入：触发输入接口用于在刺激触发方式下，外部触发器通过这个输入 口触发系统采样刺激输出：刺激输出接口（旁边标注方波标识）监听输出：监听输出口（旁边标注喇叭标识）第7页/共31页第八页，共31页。第二章 常用(chn yn)仪器 2、软件(run jin)启动3、软件(run jin)主界面第8页/共31页第九页，共31页。第二章 常用(chn y

6、n)仪器 4、开始实验（1）、从 “输入信号”菜单中设定，然后选择 “开始”命令按钮； 当您为某个输入通道选择了一种输入 信号类型之后，这个实验通道的相应 参数就被设定好了，这些参数包括(boku)： 采样率、增益、时间常数、滤波、扫 描速度等。第9页/共31页第十页，共31页。第二章 常用(chn yn)仪器 （2）、从“实验项目”菜单中选择，在每一组分类实验项目中又包含有若干个具体的实验模块。选择一个具体实验模块后，系统自动完成(wn chng)相关的软硬件参数设置，直接开始实验。第10页/共31页第十一页，共31页。第二章 常用(chn yn)仪器 5、暂停、停止实验6、打开存贮的数据文

7、件（数据反演）（三）、BL-420系统软件其他重要功能介绍1、定标2、数据处理与测量3、添加文字标记(bioj)：实验标记(bioj)编辑框位于顶部窗口。顶部窗口由4部分组成，他们分别是：当前选择通道的光标测量数据显示区，刺激按钮，特殊实验标记(bioj)编辑以及采样率选择按钮。 第11页/共31页第十二页，共31页。第二章 常用(chn yn)仪器 添加(tin ji)文字标记方法:（1）从实验标记组合框中选择一组系统预先设定好的标记组；（2）在实验标记编辑组合框中直接输入任意的文字标记（不要超过30个字），按 “Enter”键确认。 在需要添加(tin ji)标记的波形处单击鼠标左键。第1

8、2页/共31页第十三页，共31页。第二章 常用(chn yn)仪器 4、分时复用区 在主界面右边包含有一个分时复用区，区域内包含有五个分时复用区域：控制参数调节区显示参数调节区通用信息显示区专用信息显示区 刺激参数调节区 通过(tnggu)分时复用区底部的切换按钮进行切换。第13页/共31页第十四页，共31页。第二章 常用(chn yn)仪器 分时复用区中的控制参数调节区是设置硬件参数以及调节扫描速度的区域，非常重要。对应(duyng)于每一个通道有一个控制参数调节区 。第14页/共31页第十五页，共31页。第二章 常用(chn yn)仪器 5、刺激器刺激参数调节区中各参数的意义： 延时：刺激

9、脉冲发出之前的初始延时（范围：06s，单位：ms）。波间隔：双刺激或串刺激中两个脉冲波之间的时间(shjin)间隔（范围：06s，单位：ms）。延时2：在连续刺激中，连续刺激脉冲之间的时间(shjin)间隔，可与延时相等，也可以不等 （范围：06s，单位：ms），在显示中，该参数将被换算为频率。波宽：刺激脉冲的宽度（范围：02000ms，单位：ms）。强度1：单刺激、串刺激中的刺激脉冲强度，或双刺激中第一个刺激脉冲的强度（范围 0100V，单位：V）。当刺激模式为电流刺激时，表示第一个刺激脉冲的电流 强度（范围020mA，单位：mA）。强度2：双刺激中第二个刺激脉冲的强度（范围0100V，单位

10、：V）。当刺激模式为电 流刺激时，表示第二个刺激脉冲的电流强度（范围020mA，单位：mA）。第15页/共31页第十六页，共31页。第二章 常用(chn yn)仪器 刺激参数区由上至下分为3个部分：基本信息、程控信息、波形(b xn)编辑 。第16页/共31页第十七页，共31页。第二章 常用(chn yn)仪器 6、数据共享：将实验数据应用于Word、Excel中等。 数据提取是指从原始实验数据中以某种形式（如图形、BL-420格式数据、通用文本格式数据等）提取出一段或多段数据，它是数据共享的基础(jch)。数据提取方式包括：（1）数据导出：将一段反演实验波形的原始数据以文本形式提取出来，并存

11、入到文本文件中，这样便于其他应用程序，如SPSS，SAS应用。（2）数据剪辑：将一段或多段反演实验波形的原始采样数据按BL-420的数据格式提取出来，并存入到BL-420格式文件中。这样可以有效地降低冗余数据。（3）图形剪辑：将从通道显示窗口中选择的一段波形连同数据一起以图形的方式发送到Windows操作系统的一个公共数据区内，以便将这块图形粘贴到BL-420E+软件的剪辑窗口中或任何可以显示图形的Window应用软件如Word、Excel或画图中。 （4）区间测量数据结果的导出：导出处理后的结果数据。当使用区间测量进行数据测量时，区间测量的结果将直接写入到Excel文件中，同时，这些数据也以

12、resultn.txt（n代表通道号）文件名存贮为标准的Windows文本文件。第17页/共31页第十八页，共31页。第二章 常用(chn yn)仪器 二、换能器 换能器又称传感器，是指将机体生理活动的非电信号(xnho)转换成与之有确定函数关系的电信号(xnho)的装置。1、压力换能器适用范围：测量血压、心内压、颅内压、胸腔内压、胃肠内压、眼内压等。原理：将压力的变化转换为电阻率的变化。使用：将换能器与主机接好后，启动并预热1020min。2、张力换能器适用范围：记录肌肉收缩曲线。原理：将张力信号(xnho)转换成电信号(xnho)输入。使用方法：（1）换能器的安装方向（2）用毕后，从架上将

13、换能器卸下，但不要用超负荷力拆卸第18页/共31页第十九页，共31页。第二章 常用(chn yn)仪器 三、生理学实验常用器械与用途(yngt)1.蛙类手术器械剪刀：粗剪刀、眼科剪镊子 ：眼科镊金属探针： 用于破坏蛙脑和脊髓玻璃分针： 用于分离神经和血管等组织 锌铜弓： 用于刺激神经肌肉标本，检查其兴奋性蛙板： 15cm20cm的软质木板，板中央放置一玻璃片。制备蛙类标本时应在清洁的玻璃板上操作。木板用于蛙的固定，可用图钉或大头针将蛙腿钉在木板上蛙钉培养皿第19页/共31页第二十页，共31页。第二章 常用(chn yn)仪器 2.哺乳类手术器械（1）手术刀（2）剪刀 （3）镊子(ni zi)

14、（4）止血钳（5）动脉夹 （6）气管插管 （7）血管插管 第20页/共31页第二十一页，共31页。第三章 实验(shyn)动物基本操作技术 （一）常用实验动物 （二）动物实验基本技术（三）实验动物常用手术方法(fngf) （四）实验动物的采血方法(fngf)（五）实验动物的给药途径和方法(fngf)（六）实验动物的处死方法(fngf)第21页/共31页第二十二页，共31页。第四章 各论 实验一 蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本制备【目的】练习并掌握具有正常兴奋收缩功能的蛙类坐骨神经腓肠肌标本的制备。【原理】蛙类的某些基本生命活动和生理功能与哺乳类动物有相似之处而且(r qi)其离体组织的生活条件比较简单

15、，易于控制和掌握。来源也较丰富，因此在生理学实验，尤其是细胞生理学的某些实验中，常用蛙或蟾蜍的坐骨神经腓肠肌标本来观察神经肌肉的兴奋性、刺激与反应的规律及肌肉收缩的特点等。【实验对象】蟾蜍。【器材与药品】蛙类手术器械、纱布、手术丝线、滴管、任氏液。第22页/共31页第二十三页，共31页。第四章 各论 【方法与步骤】1破坏脑和脊髓： 用粗剪剪去蟾蜍的上颌及头部，然后捣毁脊髓，蟾蜍的四肢松软、呼吸运动消失，表明脑脊髓已被完全破坏。2剪除躯干上部及内脏：在骶髂关节水平以上0.51cm处剪断脊柱，沿脊柱两侧剪开腹壁，使其头与内脏自然下垂，沿两侧剪除其头部及内脏，仅留下肢、骶骨、脊柱及由脊柱发出的坐骨神

16、经。3去皮：左手捏住脊柱的断端（注意不要接触神经），右手捏住皮肤的边缘，向下剥掉全部后肢的皮肤，将标本置于盛有任氏液的培养皿中。4. 分离两后肢：将蟾蜍置于蛙板上，用粗剪刀沿正中线将脊柱分为两半再从耻骨联合中央剪开，使两腿完全分开。将标本浸入盛有任氏液的培养皿中。5. 游离坐骨神经：取一后肢放于蛙板的玻璃板上，两端用蛙钉在蛙板上固定。用玻璃分针沿脊柱内侧游离坐骨神经，并于近脊柱处穿线结扎。再向下循坐骨神经沟游离出坐骨神经大腿部分，然后从脊柱根部将坐骨神经剪断，手执细线将神经轻轻提起，剪断其所有的小分支，并将神经一直游离至腘窝。6制备坐骨神经小腿标本：将游离干净的坐骨神经搭于腓肠肌上，在膝关节周

17、围剪掉全部大腿肌肉，并用粗剪刀将附着在股骨上的组织刮干净，然后在股骨的中部剪去上段股骨。7制备坐骨神经腓肠肌标本：将上述坐骨神经小腿标本在跟腱处穿线结扎后剪断跟腱。游离腓肠肌至膝关节处，然后沿膝关节将小腿其余部分剪掉。8检查标本的兴奋性：用经任氏液湿润的铜锌弓迅速接触坐骨神经，如腓肠肌发生明显的收缩(shu su)，表明标本的兴奋性良好，即可将标本置于盛有干净任氏液的培养皿中待用。 第23页/共31页第二十四页，共31页。第四章 各论 【注意事项】1.破坏脑和脊髓时，不要(byo)将蟾蜍头部对着自己和别人的面部，以防蟾酥溅入眼内。2.标本制备过程中尽可能避免损伤神经，不可用力牵拉或用金属器械钳

18、夹神经。3.随时滴加任氏液保持神经湿润，并将暂时不用的标本置于任氏液中备用。 第24页/共31页第二十五页，共31页。第四章 各论 实验二 阈刺激、阈上刺激与最大刺激【目的】在保持足够的刺激时间(脉冲波宽)不变的条件下，观察对蟾蜍坐骨神经的刺激强度(脉冲振幅)与腓肠肌收缩之间的关系。【原理】一条神经是由许多兴奋性不同的神经纤维所组成，保持足够的刺激时间不变，刚能引起其中兴奋性较高的神经纤维产生兴奋，表现为受这些神经纤维支配的肌纤维发生收缩，此时的刺激强度即为这些神经纤维的阈强度，具有此强度的刺激叫阈刺激。随着刺激强度的不断增加，有较多的神经纤维兴奋，肌肉的收缩反应也相应逐步增大，强度超过阈值的

19、刺激叫阈上刺激，当阈上刺激强度增大到某一值时，神经中所有纤维均兴奋、此时肌肉作最大的收缩，再继续增强刺激强度，肌肉收缩反应不再继续增大。具有引起肌肉最大收缩的最小刺激强度的刺激称为最大刺激。【实验对象】蟾蜍。【器材与药品(yopn)】蛙类手术器械、纱布、手术丝线、滴管、任氏液、BL-420生物机能实验系统、肌槽、张力换能器、铁支架、双凹夹。第25页/共31页第二十六页，共31页。第四章 各论 【方法与步骤】1.制备坐骨神经腓肠肌标本。2.固定标本：将坐骨神经腓肠肌标本的股骨残端固定于肌槽的小孔内，将坐骨神经置于肌槽的刺激(cj)电极上，使坐骨神经腓肠肌标本固定于肌槽。腓肠肌跟腱的结扎线与张力换

20、能器的应变片相连，将张力换能器固定于铁支架的双凹夹上。3.仪器连接：（1）张力换能器的插头插入生物信号记录分析系统的信号输入插座，打开计算机启动生物信号记录处理系统，点击菜单“实验项目”下“肌肉神经实验”，选定“刺激(cj)强度与反应关系”，根据实验需要选择参数，实验方式选择“程控”。（2）肌槽上的刺激(cj)电极的插头插入生物信号记录分析系统的刺激(cj)输出插孔。【实验项目】改变刺激(cj)强度，记录肌肉的收缩张力曲线。1.阈刺激(cj)：用弱刺激(cj)开始肌肉无收缩反应，随着刺激(cj)强度的加大，当刺激(cj)刚能引起腓肠肌收缩的刺激(cj)强度为阈强度（阈值），强度达到阈值的刺激(

21、cj)为阈刺激(cj)。2.最大刺激(cj)：刺激(cj)强度逐步增大，肌肉收缩幅度随之加大，直到五个收缩幅度不再随刺激(cj)强度的增大而升高，刚使收缩曲线达到最高幅度的最小刺激(cj)强度的刺激(cj)，即为最大刺激(cj)。第26页/共31页第二十七页，共31页。第四章 各论 【实验结果及分析(fnx)】画图、标注【讨论】【结论】第27页/共31页第二十八页，共31页。第四章 各论 实验三 骨骼肌的单收缩、复合收缩和强直收缩【目的】在保持刺激强度不变的条件(tiojin)下，观察对蟾蜍坐骨神经的刺激频率与腓肠肌收缩形式之间间的关系。【原理】刺激的频率不同，肌肉收缩的形式也不相同。用频率不同而强度相同的阈上刺