虫草多糖复合物口服液的开发

1、虫草多糖复合物口服液的开发基于食品剂型表达的保健食品加工技术进展及产品质量评价王伟14163070022022-4-12目录概述1研究方法2研究进展3总结42022-4-12概述冬虫夏草(Cordyceps sinensis Berk.Sacc)，子囊菌亚门(Ascomyxotina)麦角菌科(Clavicipitaceae)虫草属(Cordyceps)，其为寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体，属于我国传统名贵中药，因其性味甘平，具有补肺益肾、止血化痰等多种功效。现代科学研究证明，冬虫夏草具有多种药理活性。现在人们多用人工培养的方法获得蛹虫草。 蛹虫草，别名北虫草、北冬虫夏草，与

2、冬虫夏草同属于子囊菌亚门麦角菌科虫草属。现代科学研究表明蛹虫草含有多糖类、虫草酸(D-甘露醇) 、核苷类（主 要含腺苷、尿苷、鸟苷、有虫草素(3-脱氧腺苷)、尿嘧啶和腺嘌呤）、甾醇类，此外还有氨基酸和微量元素等主要成分，与冬虫夏草成份基本相同,单糖组合物通常为以不同的方式摩尔比的葡萄糖（GLU），甘露糖（MAN），和半乳糖（GAL）,此外不同品种虫草的多糖结构组成不同,即使同种虫草也会因培养条件不同和采收时间的差异其多糖组成也不尽相同,2022-4-12虫草多糖生物活性抗肿瘤01降血糖02降血脂03免疫调节04抗氧化05其他作用062022-4-12口服液口服液是将原材料用水或其他溶剂,采用适

3、当的方法提取,经浓缩制成的内服液体剂型 特点2022-4-122022-4-12菌种活化研究方法离心菌丝体制备发酵培养传代培养Sevage 法HPLC冻干灵芝多糖灵芝多糖结构研究GC-MS浓缩乙醇沉淀HIO4氧化粗多糖Smith降解甲基化IR刚果红混合液UV-VISGCNaOH NMR 2022-4-12灵芝多糖含有三螺旋体构型GC-MS 分析灵芝多糖的主要单糖组分为葡萄糖，还有少量的半乳糖、甘露糖、木糖和艾杜糖，IR 及1H NMR 分析多糖为 -构型，HIO4氧化、Smith 降解和甲基化分析表明: 多糖主要为( 13) 糖苷键连接构型，并伴有少量的 16 位支链键连接的结构，灵芝多糖是由

4、 D-葡萄糖单元通过 -( 13) 糖苷键连接葡聚多糖，其主要构型特征为 ( 13) -D-线性连接的骨架结构。“”2022-4-12口服液的制备注意点 蒽酮-硫酸法检测得到多糖含量，做成多糖含量为 5mg/ml 的溶液制作的过程如封口、分装及配液等均需在无菌条件下进行操作低于或等于 0.3%的苯甲酸钠作为防腐剂聚乙烯吡咯烷酮做稳定剂PH 值的范围为 5.0-8.0 分别加入安全性规定内的三个梯度的苯甲酸钠在正常温度下考察 6 个月后，检测其的作用效果,研究加入苯甲酸钠对蛹虫草多糖的影响，检测时同样检测了多糖的含量。分别加入安全性规定内的三个梯度的稳定剂进行考察，并检测其对口服液的影响,同时测

5、定多糖含量。 2022-4-12口服液验证 灵芝口服液一定浓度口服液毒性实验卫生学检验急性毒性实验稳定性检测功效成份检测长期毒性实验血液学指标指纹图谱理化检验微生物检测光照射影响实验温度影响实验加速试验功能学检验免疫活性试验抗氧化试验抗肿瘤试验降血脂试验降血糖试验小白鼠口服组织形态学检查复方血清靶成分蒽酮-硫酸法测量浓度2022-4-12急性毒性及蓄积毒性试验 蓄积系数法Ames 试验微核及精子畸形试验 测量致突变率 亚慢性毒性试验体重测量 血常规测定血清生化测定病理组织形态学检查毒性实验亚急性试验小白鼠饲喂试验,观察动物的一般状况: 体重,行为、饮食、发病及死亡,血常规测定等情况, 若有动物

6、死亡, 及时解剖作病理检查,2022-4-12卫生学检验理化检验蒽酮-硫酸法测量多糖浓度微生物检测细菌总数大肠菌群重金属检验农药残留农药残留添加剂的HPLC检测酵母菌,霉菌感光检验2022-4-12光照射影响实验 蛹虫草多糖口服液：前期实验制备每支 50mg/10ml蛹虫草多糖，分别标记批号为：20150615,20150616,20150617。 用光照强度为 5000Lx的日光灯对供试品进行连续照射，时间为 10 天，每隔5天观察记录澄明度和多糖含量等样品性状的改变情况温度影响实验 将恒温培养箱的温度调至 70，取供试品放于其中，时间为10 天，每隔5 天观察记录澄明度和多糖含量等样品性状

7、的改变情况 加速试验 取供试品放在恒温恒湿稳定箱中，条件如下：温度为 402，相对湿度为70%10%。分别于第 0 、1 、2 、3 、6 个月取样，比较第 1-6 月与第 0 月的澄明度、多糖含量及微生物含量等供试品的性状。理论上满足加速实验结果，则可以确定保质期为 2年。 稳定性检测2022-4-12功能学检验轻基自由基的清除超氧化阴离子的清除还原力测定抗氧化试验抗肿瘤试验建立小鼠肿瘤模型 MTT测定 巨噬细胞吞噬功能的测定抑制肿瘤基因P53表达的检测降血糖试验诱导小鼠产生糖尿病模型,通过灌胃方式给药，来考察该多糖具有降血糖的功效建立小鼠、大鼠高脂血症模型，通过灌胃方式给药，来考察该多糖具有降血脂的功效降血脂试验免疫活性试验巨噬细胞，激活增殖测定淋巴因子测定2022-4-12功效成份检测小白鼠口服一定浓度的口服液药效差色血清色谱法复方定量分析整体动物试验组织器官亚细胞分子生物水平复方血清靶成分配位化学代谢化学分析各种多糖之间的协同和拮抗作用复方的效应有效部位有效成分反馈作用组织形态学检查复方的效应2022-4-12研究进展近年来人们侧重对灵芝的结构分析，活性成分的作用机理的研究，结合现代仪器分析，药