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文档简介

1、根底生物学技术实验 丁曦钰 141140015C1丁彦霞 谢鸿鑫 周浩天 2021-10-12光学显微镜的使用及动物组织切片观察丁曦钰 141140015一、 实验目的1、 了解显微镜的工作原理,学习光学显微镜的使用。2、 根本组织切片的观察与记录。3、 实验报告的书写要求。4、 生物量级、生物系统及生物类别。二、 实验原理1. 光学显微镜的工作原理:标本经物镜和管镜放大后,形成倒立的实像:实像经目镜 再次放大后,形成放大的虚像。2. 光学显微镜的使用:先将低倍物镜的位置固定好,然后放置标本片,转动反光镜,调好光线,将物镜提高,向下调至看到标本,再用细调对准焦距进行观察。除少数显微镜外,聚光镜

2、的位置都要放在最高点。如果视野中出现外界物体的图像,可以将聚光镜稍微下降,图像就可以消失。聚光镜下的虹彩光圈应调到适当的大小,以控制射入光线的量,整理增加明暗差。3. 生物量级:残基氨基酸,核苷酸,脂肪酸,甘油生物大分子亚细胞结构subcellular structure细胞器细胞组织器官系统种群群落生态系统生物圈物理量级:根本粒子夸克,轻子电子自旋反平行质子原子分子物体:生物量级天体星系星云宇宙宇宙膜4. 各胚层细胞发育走向1) 外胚层:神经系统脑、脊髓、脊神经、自主神经、视网膜、内耳、肾上腺髓质,表皮毛发、汗腺、油脂腺、乳腺、晶体、口腔黏膜2) 中胚层:肌肉、骨骼、血液、真皮、心脏血管系统

3、、泌尿生殖系统以及结缔组织固有结缔组织、骨与软骨、血液3) 内胚层:消化系统、呼吸系统的上皮和有关腺体胰,肝、膀胱上皮 5分辨力:能分辨最小间隔的能力,单位距离人眼距目标物25cm处R=Knsin(a2) K是透镜品质,光镜在0.611.0之间,光波波长或电子波长,n是光镜介质折射率,a是镜口角样本对物镜的镜口张角,一般<180度,sina/2<1。 三、 动物与器材1. 实验材料:13张组织标本2. 实验设备:光学显微镜生物显微镜四、 方法与步骤1. 实验分组2. 实验原理讲解3. 实验报告要求介绍4. 使用显微镜进行操作观察1安放显微镜2检查显微镜是否有故障3插入电源4对光,调

4、节亮度5放入组织切片,调焦6低倍镜观察7换高倍镜,调焦,观察,记录5. 气管的假复层纤毛上皮五、 实验结果分析杯状细胞细胞核纤毛六、 实验结论1. 被覆上皮是指覆盖于体表以及各种腔、道、管、囊的内外外表的上皮。贴附于心脏、血管和淋巴管腔面的上皮又称为内皮(endothelium)。贴附于胸膜、腹膜、心包膜处的上皮又称为间皮(mesothelium)。由于内皮、间皮恶变形成的是肉瘤,故在病理学的概念里,常将内皮、间皮与一般的上皮区分开,而在其它语境下,内皮、间皮与一般的上皮均可视为上皮组织的具体形式。2. 假复层纤毛柱状上皮(pseudostratified ciliated columnar

5、epithelium)属于被覆上皮,由柱状细胞、棱形细胞和锥体形细胞组成。细胞高矮不等,细胞核的位置参差不齐,好似有多层,但每个细胞的基底部都附于基膜上,所以称假复层。柱状细胞可达游离面,细胞核的位置较高,细胞向基底部伸入时,胞体逐渐变细;锥体细胞基细胞紧靠基膜,细胞核位置较低于上皮深部,为未分化的细胞,有增殖分化能力,可分化成前述两种细胞。3. 梭形细胞位于柱状和锥体细胞之间,细胞核位于中部,基底部附着于基膜。在柱状细胞的游离面附有能摆动的纤毛,故这种上皮称假复层纤毛柱状上皮,主要分布在鼻粘膜呼吸部、气管、支气管、输卵管。每个纤毛细胞柱状细胞约有三百根纤毛,核卵圆形,位于细胞中部,纤毛向咽侧

6、快速摆动,将粘液以及附于其上的尘粒细菌等推向咽部被咳出,故纤毛细胞对净化吸入空气有极大作用。4. 在假复层纤毛柱状上皮细胞之间有分泌粘液的杯状细胞,其结构与肠道上皮的杯状细胞类似,其顶部细胞质内含有大量粘原颗粒,细胞分泌的黏蛋白为大分子蛋白,与管壁内腺体的分泌物在上皮外表构成一道粘液性屏障,粘附吸入空气中的异物,借助于纤毛有节律性的摆动,将含有灰尘、细菌的粘液排除至喉部,其溶解吸入的SO2、CO等有害气体,也随粘液咳出。此外,粘液还有湿润枯燥空气的作用。七、 问题解答1. 什么是双目显微镜?双目体视显微镜是利用双通道光路,为左右两眼提供一个具有立体感的图像。它实质上是两个单镜筒显微镜并列放置,

7、两个镜筒的光轴构成相当于人们用双目观察一个物体时所形成的视角,以此形成三维空间的立体视觉图像。2. 干预显微镜和荧光显微镜的工作原理?1荧光显微镜可观察细胞中的荧光。当用激发光照射时,细胞发射荧光。这种荧光被称为原发荧光,由细胞中固有的荧光物质比方复原辅酶I(NADH) 发出的。另一种是用荧光染料对细胞中的成分进行特异染色,再经激发光照射。照射后经化学反响使组织中的非荧光物质转变为荧光物质所发的荧光成为诱发荧光。其他的还有免疫荧光等。2微分干预显微镜术是用平面偏振光经棱镜折射后分成两束,于不同时间经过样品的相邻部位,此后又经另一棱镜将此两束光集合,使样品厚度的微小区别形成明暗差异,增强样品反差并具立体感。3. 什么是假复层?假复层柱状纤毛上皮由上下不等、形态不同的细胞组成。所有细胞的基底部都附着在基膜上,但只有高的柱状上皮细胞可达上皮的游离面,其余锥状和梭形细

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