RNA复制子疫苗——读书报告ppt课件

1、RNA复制子疫苗RNA复制子疫苗n产生背景n作用原理n主要载体n根本特点RNA复制子疫苗的产生背景n减毒苗或灭活苗减毒苗或灭活苗: :有比较高的危险性有比较高的危险性n基因工程疫苗：不具感染力，激活免疫的才干基因工程疫苗：不具感染力，激活免疫的才干差。差。nDNADNA疫苗：外源疫苗：外源DNADNA与宿主细胞基因组发生整与宿主细胞基因组发生整合，呵斥恶性转变的潜在危险；由于需求长合，呵斥恶性转变的潜在危险；由于需求长时间低程度表达外来抗原，有诱发本身免疫反时间低程度表达外来抗原，有诱发本身免疫反响的能够，如诱发响的能够，如诱发DNADNA抗体；在灵长类动物抗体；在灵长类动物体内实验结果并不很

2、理想，所需剂量大，免疫体内实验结果并不很理想，所需剂量大，免疫原性低。原性低。作用原理作用原理nRNA复制子载体包含病毒基因组5和3末端的非编码区、非构造蛋白基因编码区(编码复制酶的基因)及被外源基因取代的构造蛋白基因编码区，而这个外源基因是可由亚基因组mRNA启动子控制表达。n表达抗原的RNA复制子可以3种方式递送至体内：构建成质粒DNA，注入体细胞，由细胞RNA聚合酶体内转录成复制子RNA；将RNA复子载体进展体外转录，得到裸RNA，再将其注入体细胞；将复制子RNA包装入病毒样颗粒作用原理nRNA复制子在宿主细胞中利用细胞内的表达系统表达RNA复制酶，RNA复制酶可使RNA复制子高效地复制

3、，并在细胞内产生大量外源抗原基因的mRNA，使外源抗原基因得到高效表达，以诱导细胞免疫和体液免疫应对。n同时RNA复制子的大量复制可导致感染细胞的凋亡，宿主细胞的凋亡有利于免疫系统识别外源抗原。RNA复制子载体nRNARNA复制子载体复制子载体: :披膜病毒科的甲病毒、黄病毒、小披膜病毒科的甲病毒、黄病毒、小RNARNA病毒、杯状病毒及副粘病毒等病毒、杯状病毒及副粘病毒等n涉及的对象涉及的对象: :病毒、肿瘤及细菌毒素等病毒、肿瘤及细菌毒素等RNA复制子疫苗特点n优点：抗原表达效率高；平安性好；免疫效果好；优点：抗原表达效率高；平安性好；免疫效果好； 用途广用途广n缺陷：稳定性差；能够会引起宿

4、主周围细胞凋亡，大缺陷：稳定性差；能够会引起宿主周围细胞凋亡，大 量细胞凋亡能够呵斥炎症反响。量细胞凋亡能够呵斥炎症反响。参考文献nRNA复制子疫苗研讨进展；n杨冬 欧阳松应，n 王云龙 欧阳红生抗原表达效率高nRNARNA复制酶使得复制酶使得RNARNA得到高程度复制，同时抗原基因也得到高程度复制，同时抗原基因也得到高效表达。实际上，在单细胞中得到高效表达。实际上，在单细胞中4 h4 h内有近内有近2 2105105拷贝的拷贝的RNARNA产生，抗原的表达可达总细胞蛋白的产生，抗原的表达可达总细胞蛋白的2525，因此其用量远远低于常规因此其用量远远低于常规DNADNA质粒就能诱导很强的免疫质

5、粒就能诱导很强的免疫应对。有报道显示，纳克程度的自主复制基因疫苗就应对。有报道显示，纳克程度的自主复制基因疫苗就能引发有效的抗体和能引发有效的抗体和CTLCTL细胞反响。细胞反响。平安性好nRNARNA复制子疫苗的表达短暂，且不会呵斥转化。复制子疫苗的表达短暂，且不会呵斥转化。RNARNA复复制于细胞浆内，排除了核的参与，而且由于宿主细胞制于细胞浆内，排除了核的参与，而且由于宿主细胞缺乏内源性的反转录酶，不能够反转录为缺乏内源性的反转录酶，不能够反转录为DNADNA整合到宿整合到宿主基因组。另外，主基因组。另外，RNARNA复制子导致转染细胞的溶解，防复制子导致转染细胞的溶解，防止了有复制才干

6、病毒的产生。因此，止了有复制才干病毒的产生。因此，RNARNA复制子疫苗在复制子疫苗在平安性方面拥有普通平安性方面拥有普通DNADNA疫苗无可比较的优越性。疫苗无可比较的优越性。免疫效果好nRNARNA复制子疫苗可同时诱导全身免疫和黏膜免疫、抗体复制子疫苗可同时诱导全身免疫和黏膜免疫、抗体应对和应对和CTLCTL反响；另外，复制子系统能自主复制，但不反响；另外，复制子系统能自主复制，但不能自行包装为感染性病毒颗粒，可针对多种病原进展能自行包装为感染性病毒颗粒，可针对多种病原进展延续免疫，而不受已有载体病毒抗体的干扰。延续免疫，而不受已有载体病毒抗体的干扰。用途广nRNARNA复制子疫苗可用于防治传染病、肿瘤等多种疾病复制子疫苗可用于防治传染病、肿瘤等多种疾病稳定性差n裸裸RNARNA容易降解，不易保管和运输。假设将容易降解，不易保管和运输。假设将RNARNA包装成包装成病毒样颗粒，或利用其他方法病毒样颗粒，或利用其他方法( (如脂质体如脂质体) )将将RNARNA包