MicroRNA―223在乳腺癌中的初步研究

1、MicroRNA223在乳腺癌中的初步研究【摘要】目的：初步研究MicroRNA-223在乳腺癌中的相应信息情况。方法：选择2012年到2013年我院女性乳腺癌患者53例，以miR-223为检索词，在miRBase、TargetScan、Pictar三个数据库进行靶基因预测，将预测结果取交集。预测到可信度和准确性较高靶基因。以cDNA为模板，5sRNA为内对照，检测各细胞株miR-223相对表达水平。结果miR-223在各细胞株间的表达具有显著差异(F=84.945，P<0.001)。两两比较显示miR-223在特定细胞中表达最高，且显著高于其他参照细胞中的表达(P=0.001，P=0.

2、002，P=0.010,P=0.005)。差异具有统计学意义。12例病患疾病产生进展，6例病患死亡。miR-223于疾病进展组表达(4.23±0.25)，低于疾病未进展组(4.64±0.58)，其中P=0.025，差异具有统计学意义(p<0.05)o在死亡组相应表达(3.81±0.56)低于未死亡组病患(4.57±0.42)，其中P=0.004，差异具有统计学意义(p<0.05)。结论：MicroRNA-223能够参与乳腺癌肿瘤的发生过程。【关键词】miR-223；乳腺癌；转移【文章编号】1004-7484(2014)05-3327-02Mi

3、croRNAs(miRNAs)是进化保守的非编码单链RNA1。共18-24个核苷酸。由miRNAs基因在细胞核中转录为pri-miRNA,再经Drosha和Pasha加工成单链pre-miRNA。靶mRNA转录是由Ago-RNA诱导沉默复合体阻断2。这种不完全匹配打开了一个miRNA基因对应多个靶基因可能性。本文即对MicroRNA-223于乳腺癌的相关情况进行初步的研究分析，现报道如下：1 资料和方法1.1 选择2012年到2013年我院女性乳腺癌患者53例，年龄在40至82岁间，平均年龄58.2±3.5岁。另取12例健康者标本作为对照，年龄在41至83岁间，平均年龄59.1

4、77;1.3岁。以上各类数据资料差异无统计学意义（p>0.05）。具有可比性。1.2 miR-223靶基因预测及生物信息学分析。以miR-223为检索词，在miRBase、TargetScan、Pictar三个数据库进行靶基因预测，将预测结果取交集，即预测到可信度和准确性较高靶基因。1.3 荧光定量PCR反应。以cDNA为模板，5sRNA为内对照，检测各细胞株miR-223相对表达水平，反应体系混匀后，加反应后逆转录体系10以1,故总反应体系25以1。用Mx3000P定量PCR仪荧光定量PCR反应，检测各模板的Ct值，并进行数据处理，所有样品均重复3次。1.4 统计学分析。采用SPSS1

5、3.0统计软件进行数据分析。荧光定量PCR各种细胞Ct值的比较采用单因素方差分析。2结果2.1 利用荧光定量PCR检测miR-223在乳腺癌细胞株中的表达，以基础细胞为对照(mean±SD：1±0.000)，单因素方差分析显示，miR-223在各细胞株间的表达具有显著差异(F=84.945，P<0.001)。两两比较显示miR-223在特定细胞中表达最高，且显著高于其他参照细胞中的表达(P=0.001，P=0.002，P=0.010，P=0.005)。差异具有统计学意义。2.2 miR-223表达水平和疾病状态关系对于53例乳腺癌患者实施随访，时间为4个月至92个月，

6、平均随访时间为12个月。其中12例病患疾病产生进展，6例病患死亡。miR-223于疾病进展组表达(4.23±0.25)，低于疾病未进展组(4.64±0.58)，其中P=0.025，差异具有统计学意义(p<0.05)。在死亡组相应表达(3.81±0.56)低于未死亡组病患(4.57±0.42)，其中P=0.004，差异具有统计学意义(p<0.05)。见下表-1：3结论miRNAs在乳腺癌侵袭转移过程中有着非常重要的作用。其中一部分miRNAs对乳腺癌转移起促进作用，另外一些则起到抑制作用。Ma等最早发现miRNAs在乳腺癌转移过程中的作用：mi

7、R-10b与乳腺癌的转移性/高度恶性相关，并且能够使非转移性乳腺癌肿瘤细胞获得强劲的浸润和转移能力3。进一步研究表明，miR-10b通过抑制靶基因HoxD10mRNA的翻译，从而增加转移基因RHOC的表达，促进了乳腺癌细胞的转移。随后Tavazzoied等发现miR-335通过作用于转录因子SOX4和tenascinC(一种细胞外基质成分)抑制迁徙和转移4。本文通过对MicroRNA-223的研究证明，FBXO8作为miR-223的靶基因，选择RHOB作为靶基因预测的鉴定。miR-223在特定细胞中表达最高，且显著高于其他参照细胞中的表达，差异具有统计学意义。且在53例乳腺癌患者中有12例病患

8、疾病产生进展，6例病患死亡。miR-223于疾病进展组表达(4.23±0.25)，低于疾病未进展组(4.64±0.58)，其中P=0.025，差异具有统计学意义(p<0.05)。在死亡组相应表达(3.81±0.56)低于未死亡组病患(4.57±0.42)，其中P=0.004，差异具有统计学意义(p<0.05)。综上所述，MicroRNA-223能够参与乳腺癌肿瘤的发生过程。参考文献：1 NicolosoMS，SpizzoR，ShimizuM，RossiS，CalinGA.MicroRNAs-themicrosteeringwheeloftumormetastasisJ.NatureRevCancer，2009，9(3)：293-302.2 ForstemannK，HorwichMD，WeeL，etal.DrosophilamicroRNAsaresortedintofunctionallydistinctargonautecomplexsafterproductionbydicer-1J.Cell，130（32）：287-297.3 FilipowiczW，BhattacharyyaSN，SonenbergN.Mechanismsofpost-transcriptionalregulationbymicroRNAs：