仔猪副伤寒活疫苗ppt课件

1、仔猪副伤寒活疫苗仔猪副伤寒活疫苗C500株株消费操作细那么消费操作细那么2019年11月 本品系运用免疫原性良好的猪霍乱沙门氏菌弱毒株，接种适宜培育基培育，收获培育物参与适当稳定剂，经真空冷冻枯燥制成。本品用于预防仔猪副伤寒活疫苗。 1、菌种 1.1疫苗消费用菌种为猪霍乱沙门氏菌C500弱毒株，原种购于中国兽药检查所，经扩繁后由质检部鉴定、保管、供应。 1.2菌种规范 1.2.1 C500弱毒株应符合以下规范 1.2.1.1 形状和生化特性 本菌为革兰氏阴性小杆菌，生化特性应符合细菌分类学中本菌的特性。 1.2.1.2 培育特性 在普通琼脂平板上，37培育18-22小时，菌落为圆形、边缘整齐、

2、突起、半透明、略潮湿的光滑型。 1.2.1.3 血清学特性 普通琼脂新颖培育物用玻片凝集检查法，对沙门氏菌属O7因子血清出现凝集反响。 1.2.1.4 特异性 在含1%的醋酸铊的普通肉汤中呈均匀浑浊生长，用新颖普通琼脂培育物与0.2%吖啶黄溶液做玻片凝集实验应不出现凝集反响。 1.2.1.5 平安性 用pH7.4-7.6的普通肉汤或蛋白胨水，将培育24-48小时的普通琼脂斜面培育物洗下并作活菌计数，注射以下动物应符合规范。 小白鼠 18-22g30-35日龄的小白鼠10只，各皮下注射0.2ml，含活菌数1亿，察看21日，至少应存活9只。 家兔 体重1.5-2.0kg的家兔5只，各皮下注射1ml

3、，含活菌数100亿，察看21日应存活。 仔猪 用体重15kg以上的安康易感断奶仔猪4头，各静脉注射1ml，含活菌数30亿，察看1个月应存活。 1.3 冻干菌种2-8保管期为10年。 2、疫苗制造及半废品检验 2.1 消费用菌种的制备 2.1.1 一级种子繁衍和鉴定 冻干种子用普通肉汤稀释或经普通肉汤后，接种普通琼脂平板，37培育18-20小时，察看菌落形状，菌落为圆形、边缘整齐、突起、半透明、略潮湿的光滑型。 选取中等偏大的菌落5-10个，混合后接种于普通琼脂斜面假设干只，37培育24小时，经纯粹检验合格，并用0.2%吖啶黄溶液做玻片凝集实验应合格，作为一级种子。在2-8保管期不超越1个月，在

4、此期间可以移植1-2次，在培育基上继代不超越5代。 2.1.2 二级种子繁衍 取一级种子接种于普通琼脂或普通肉汤，37培育24小时，经纯粹检验合格后，即可作为消费种子，在2-8保管期不超越2日。 2.2 制苗用培育基制备 2.2.1 资料 牛肉 要求应采购新颖的精牛肉，3-5岁，前后腿、胸部，尽量少含脂肪、肌腱、筋膜等。 鱼蛋白胨 1.5% 胰蛋白胨 0.5% 氯化钠 0.5% 氢氧化钠 水 2.2.2制备方法 将新颖的精牛肉去掉脂肪、筋膜等绞碎，纯化水低温浸泡24小时，100煮沸2小时，补足失去的水分，冷却静止沉淀24小时，抽取上清液，参与鱼蛋白胨、胰蛋白胨、氯化钠溶化，用氢氧化钠溶液调整p

5、H值至7.8，煮沸20分钟，降温静止沉淀。 3.1条件预备 3.1.1 根据菌液制备所需物品及设备条件，进展全面预备。 3.1.2 按运用时间，提早做好对发酵罐空消任务，包括罐体、空气过滤系统、各个进出料口，确保灭菌无死角。将预备好的各种物品提早移入干净任务间待用。 3.1.3在任务开场前3040min，按净化级别要求调整送风量，到达干净级别要求。 3.1.4提早一天对发酵罐进展全面灭菌，并坚持发酵罐正压。 3.2 进料及培育基灭菌进料及培育基灭菌 将配制好的培育基经过管道打入发酵将配制好的培育基经过管道打入发酵罐，参与消泡剂猪油，然后对进罐，参与消泡剂猪油，然后对进料管道进展清洗、灭菌，封锁

6、进料阀料管道进展清洗、灭菌，封锁进料阀门，对培育基及一切的进出口、空气门，对培育基及一切的进出口、空气过滤系统进展灭菌，当温度到达过滤系统进展灭菌，当温度到达90和和100时，分别经上面空气进管和下时，分别经上面空气进管和下面放料口向罐内通入蒸汽面放料口向罐内通入蒸汽1分钟左右，分钟左右，罐内罐内116坚持坚持40分钟，其他位置分钟，其他位置121坚持坚持40分钟。分钟。 灭菌终了后马上夹层通冷水进展降温并及时补充无菌空气坚持罐内正压。当温度降至40时，封锁冷水管道停顿降温，通无菌空气坚持罐内正压，翻开自动控温系统的阀门和开关，温度控制在37。 3.3 接种 在火焰维护下，衔接种子瓶和发酵罐接

7、种口，翻开发酵罐出气阀关小发酵罐进气阀使罐内压力接近于0，确认无误后翻开接种阀门，利用正压空气将二级种子按1%-2%的接种量接种于普通肉汤中，然后按2.5%参与40%灭菌葡萄糖溶液。 3.4 发酵培育发酵培育 接种后先小气量通入无菌空气接种后先小气量通入无菌空气2h，然，然后逐渐加大通气量，每后逐渐加大通气量，每2h添加通气量，添加通气量，培育后期每小时测定一次培育后期每小时测定一次pH，当，当pH上上升到升到7.8时参与时参与40%葡萄糖溶液葡萄糖溶液2000ml调整调整pH，培育，培育1820小时，当菌数将小时，当菌数将要到达最顶峰时停顿培育收获菌液，要到达最顶峰时停顿培育收获菌液，将菌液

8、放入灭菌大玻璃瓶中。将菌液放入灭菌大玻璃瓶中。 4、配苗 将事先预备好的冻干维护剂参与收苗瓶中摇匀，维护剂和菌液的比例是1:7，明胶和蔗糖的最终含量分别是1.3%和5%。 配苗完成后马上进展分装和冻干。 本卷须知：本卷须知： 1、培育基是菌苗消费的关键，一定要把握好原、培育基是菌苗消费的关键，一定要把握好原资料的质量。资料的质量。 2、发酵罐灭菌时，应留意千万不要留有死角，、发酵罐灭菌时，应留意千万不要留有死角，通气管道压力应高于罐内压力，不要呵斥培育基通气管道压力应高于罐内压力，不要呵斥培育基倒吸入空气过滤器。倒吸入空气过滤器。 3、通气培育时应仔细仔细，、通气培育时应仔细仔细，10小时后每小时要小时后每小时要测定测定pH值，根据值，根据pH值的变化参与适量的葡萄糖值的变化参与适量的葡萄糖溶液。溶液。 4、留意