洁净室人员行为规范洁净室的清洁及消毒

1、洁净室人员行为规范洁净室人员行为规范洁净室的清洁及消毒洁净室的清洁及消毒洁净室的清洁及消毒 洁净室的设计特点 洁净室的污染来源 污染的控制 清洁计划 洁净室清洁三原则 消毒剂的选择 清洁程序 洁净室的验证及监测1、厂房的设计洁净室的特点表面光滑、易于清洁、无死角；不同洁净度级别的房间有足够的压差；天花板密封；100级区无地漏、其它区域地漏应液封；设置更衣室；更衣室安装过滤器；更衣室的洁净度级别与高级别的房间相同；门设计成连锁；HVAC系统有报警装置；气流流型有效。 2、洁净室污染的来源2.1污染物特性活性尘埃、非活性尘埃的污染2.1.1尘埃的特性02m ：漂浮在空气中2100m ：随空气流动，

2、降落缓慢100m ：降落在表面上粒子动力学2.1.2活性尘埃的特性活性尘埃的大小1mm10m1m10m病毒细菌红细胞原生生物2.1.2活性尘埃的特性 细菌：0.25m 细菌 酵母菌：约5m 霉菌：10m 几个m 湿度 温度生长因素 营养素 氧气 PH2.1.2活性尘埃的特性 生长曲线生长曲线潜伏期指数生长期稳定期下降期 水和水溶液水和水溶液 自然原材料（动植物来源）自然原材料（动植物来源） 常见微常见微 食物食物 生物的生物的 木制材料木制材料 存在环存在环 人和动物上人和动物上/ /内（皮肤、口腔内（皮肤、口腔/ /喉部、肠喉部、肠 道）道） 境境 空气空气 地面地面 衣服衣服常见微生物的存

3、在环境常见微生物的存在环境2.2污染物的来源2.2.1污染物的来源-外部空气人和工业活动 空气中，地面行驶的车辆占5.7%的灰尘 采石、炼钢、水泥制造和面粉等生产的工业性粉尘占34% 燃烧如汽车尾气、火力发电厂排出的烟尘、木材燃烧的烟雾占57% 自然现象：风、火山喷发、海啸等 动植物：花粉、腐败物、孢子、微生物、头发、皮肤未经任何处理的外部空气510811010 particles0.1m/m32.2.2污染物的来源-物品原材料水其它物品等2.2.3污染物的来源-设备、厂房设备 金属粒子 氧化物其他污染物2.2.4污染物的来源-工作人员人员引起的污染占洁净室污染的80%；生产工具和设备：15%

4、；洁净室本身和过滤器缺陷：5%；身着工作服人员，剧烈活动 106 particles0.1m/second， 2105/second for particles of 0.5m着装和行为合适粒子减少至10到100。2.2.4污染物的来源-工作人员服装皮肤头发嘴巴和鼻子化妆品咳嗽：700 000尘粒喷嚏：1 400 000尘粒1分钟交谈：15 00020 000尘粒2.2.4污染物的来源-工作人员来自皮肤的粒子 皮屑 成年男性 10万1000万粒子/分钟 10g/天 3.5kg/年2.3洁净室分级药品生产洁净室的空气洁净度等级洁净度级别尘埃最大允许个数（个/）微生物最大允许数0.5m5m浮游菌（

5、个/）沉降菌（个/皿）100级350005110 000级35 0002 000100 3100 000级3500 00020 00050010300 000级10 500 00060 00015各种分类的关系Usual class (0.5m/f3Federal standard 中国 GMP1998ISO 14 644-1(0.01)/1(0.1)/211.5/3102.5/41003.510051 0004.5/610 0005.510 0007100 0006.5100 00081 000 000/9/300 000/3、洁净室污染的控制污染的控制 3原则预防外来污染物的进入连续地消除

6、产生的污染限制污染的产预防外来污染物的进入空气过滤正压气锁灭菌和净化连续地消除污染流速流型层流限制污染产生工作服行为和姿势设备和厂房的设计清洁和消毒3.1预防污染物的进入3.1.1空气过滤初效过滤器 初阻力3mm水柱 计数效率（对0.3m的尘埃）20% 主要对象是10m的尘埃 用于新风过滤3.1.1空气过滤中效过滤器 初阻力10mm水柱 计数效率（对0.3m的尘埃）20%90% 主要对象是110m的尘埃 用于高效过滤器之前3.1.1空气过滤亚高效过滤器 初阻力15mm水柱 计数效率（对0.3m的尘埃）90%90.9% 主要对象是 5m的尘埃3.1.1空气过滤高效过滤器 初阻力25mm水柱 计数

7、效率（对0.3m的尘埃）99.97% 主要对象是 1m的尘埃 对细菌的穿透率为0.0001%，对病毒的穿透率为0.0036%，所以，通过高效过滤器的空气可视为无菌。3.1.2正压保持房间正压 洁净室级别不同的相邻房间之间的静压差5Pa 洁净室与室外大气的静压差10Pa 空气由洁净级别较高的房间向较低的房间流动3.1.3气锁 2个功能预防污染物的进入人流、物流不破坏压差3.1.4灭菌/净化 灭菌种类湿热灭菌干热灭菌射线环氧乙烷无菌过滤3.2连续地消除产生的污染流量考虑输入的过滤空气量与房间的体积唤起次数 20次/hour(10 000级) 15次/hour(100 000级）流型 必须持续地排除

8、被污染的空气预防涡流 层流水平层流垂直层流安全柜安全柜（NF X 44-201）Type 前面部分敞开 空气流入安全柜以保护操作者和环境安全柜安全柜（NF X 44-201）Type 负压，前面部分敞开 保护 操作者 环境 生物风险低或中等 也保护产品 在操作和操作者之间产生一道屏障 保护操作，空气单向向下流动 安装高效过滤器保护环境安全柜安全柜（NF X 44-201）Type 完全密封 戴手套操作 新空气经过高效过滤 空气出口安装高效过滤器 负压 保护操作者和环境3.3限制污染的产生3.3.1人员 着装保护药品不被人员的污染无菌服，维护良好并正确穿戴 无破缝，无污迹 系好衣扣 无头发或衣服

9、外漏3.3.1人员 100 000级区的着装盖住头发和胡须10万级专用工作服专用鞋或鞋套3.3.1人员 10 000级区的着装罩住头发和胡须紧袖口高领工作衣、裤或连体工作服专用鞋或鞋套材料不产生尘粒无私人衣服3.3.1人员 100级区着装兜帽口罩无尘灭菌手套灭菌工作鞋材料不脱落尘粒无私人衣服每次进入更换灭菌工作服3.3.1人员 更衣SOP书面描述严格执行3.3.1人员更衣程序换鞋脱衣洗手戴帽戴口罩穿洁净工作服镜前检查着装洗手戴工作手套戴保护镜消毒手套进入洁净室3.3.2行为和姿势 在无菌区的工作必需人员方可进入无菌区不快速移动避免不必要的移动避免从层流区附近走过，至少离开1米所有掉在地面上的物

10、品均应认为已被污染接触物品前应对手套消毒不要触摸口罩揉鼻子 去更衣室 揉鼻子 更换手套和口罩3.3.2行为和姿势 在洁净区的工作不要坐着不要靠住肘部不要在层流下面的工作台上休息3.3.2行为和姿势 在洁净区的工作休息时，站着 手臂顺着身体下垂 不要把双手放在臀部休息时，坐着 双手放在膝盖上 不要交叉双手或双脚3.3.2行为和姿势 在洁净区的工作必要时才讲话不要通过气锁讲话使用电话3.3.2行为和姿势 在洁净室的行为正确的行为（续） 搬运物料时，总是将手放在其底部； 搬运物料时总是放在腰部以上位置以减少污染； 总是戴上口罩以减少来自口腔的污染； 机械和设备的维修保养必须有规律地进行； 洁净室和洁

11、净室内物品的清洁是很重要的； 操作人员必须始终保持其工作区清洁和整齐。3.3.2行为和姿势 在洁净室的行为良好的行为很关键，记住： 穿着正确； 移动正确； 行动正确； 工作正确。3.3.2行为和姿势 在洁净室的行为不正确的行为 不要因为不正确的着装而散播身体的粒子； 不要因为没有手套的手接触表面和物料而引起交叉污染； 不要在洁净室内脱去洁净室工作服； 不要用手指擦头发或身体其他部位； 不要在患感冒或其他疾病期间进洁净室工作；3.3.2行为和姿势 在洁净室的行为不正确的行为 不要在洁净室吃、喝、抽烟或读报等； 不要在洁净室内戴首饰和手表； 不要在洁净室使用错误的擦布或清洁物料； 不要在洁净室快速

12、地走、移动、转身； 不要从前面走进操作者并隔着工作台讲话；3.3.2行为和姿势 在洁净室的行为不正确的行为 不要靠在工作台、产品或其他物料上； 不要把手、手臂和手肘放在工作台上休息； 不要搬运物料的顶部； 不要在工作台上滑动物品； 不要再使用掉在地上的工具和物品。3.3.3 设备100级和其他区域之间无连续的传送带；维护和维修在洁净室外进行；维修后进行清洁、消毒或灭菌；生产用水的制备和分配符合要求；注射用水在80或65 以上保温循环。3.3.3 设备设备设计符合要求；经过验证；按计划进行维护；批准后使用。4、清洁计划第一阶段清洁空气管道；对洁净区进行粗清洁（可见的尘粒）；最初的更衣程序。第二阶

13、段安装HEPA过滤器；精清洁；平衡HVAC系统。第三阶段精清洁；建立并开始监测程序；完善更衣程序；HVAC系统已经平衡第四阶段精清洁：根据监测结果完善或常规化 ；环境监测；更衣程序常规化。第五阶段验证；常规清洁程序；环境监测。清洁计划从开始到第五阶段结束大约需要23个月；从第二阶段到第三阶段的进度决定于空调厂家；从第四到第五阶段大约需要46周。5、洁净室清洁三原则洁净室清洁三原则原则一：总是用灭菌的纯化水或注射用水和新鲜过滤得清洁剂：所有过滤的清洁剂必须盛装在清洁并灭过菌的容器中，并正确贴签；把预先过滤的清洁剂存放在洁净室中可减小污染的风险。洁净室清洁三原则原则二：总是使用清洁的清洁工具和物料

14、以避免将污染物带入洁净室：不锈钢表面较好，塑料表面易划痕并滞留尘粒和微生物；不要使用带木柄的清洁工具，因其易脱落尘粒；毛刷易断且滞留微生物，不宜使用；拖布和抹布应用与洁净室相适应并不易产生脱落纤维的物料制成；抹布应粘附尘土和细菌，且只使用一次；洁净室使用的真空吸尘器应安装HEPA过滤器并定期测试。洁净室清洁三原则原则三：清洁过程中不得增加洁净室的污染物：按照SOP要求，使用正确的清洁工具和物料，避免产生任何污染；正确的清洁顺序；正确的行为。6、消毒剂的选择消毒剂的选择清洁剂消毒剂的选择消毒液的配制及使用常用的消毒剂的特性影响消毒效果的因素清洁剂清洁剂：市售家用洗洁精或其他适宜的清洁剂。要求：

15、无毒、无腐蚀性 溶解脏物 降低表面张力浓度：按说明书要求浓度配制消毒剂的用途抑制细菌杀灭细菌抑制真菌杀灭真菌杀灭病毒杀灭芽孢消毒剂的作用机理破坏RNA/DNA：氯化物，过氧化氢，甲醛；使蛋白质变性：乙醇，戊二醛，石炭酸；裂解细菌细胞膜：季铵盐类；与酶结合：洗必泰。对消毒剂的敏感性G+细菌 敏感G-细菌 真菌和酵母菌 胞膜病毒细菌芽孢 无胞膜病毒 不敏感常用的消毒剂（1）高效消毒剂：能杀灭细菌芽孢和真菌孢子在内的各种微生物。 含氯或碘的消毒剂； 过氧化物：过氧化氢、过氧乙酸； 醛类：甲醛、戊二醛； 臭氧； 环氧乙烷。常用的消毒剂（2）中效消毒剂：可杀灭除细菌芽孢以外的各种微生物。 醇类：乙醇、异

16、丙醇； 酚（石炭酸）。低效消毒剂：指能杀灭一般细菌繁殖体、部分真菌和亲脂性病毒。 洗必泰； 新洁尔灭。消毒剂的选择理想的消毒剂 广谱 效果快 既是清洁剂，又是消毒剂 不易受脏物和其他物质的影响 在较宽的浓度范围内有效 无残留 不易产生抗性 对人体无害 对设备无腐蚀性 稳定 价廉这样的消毒剂是不存在的消毒剂选用地面和工作台面的消毒： 季铵盐类化合物 与酚或次氯酸盐交替使用，避免产生耐药性不锈钢表面： 70%乙醇或异丙醇手： 70%乙醇或异丙醇 洗必泰影响消毒效果的因素微生物类型 固有的抗性 无胞膜病毒 芽孢 获得的抗性 细胞膜的改变微生物的数量：数量多，不易杀灭 有更多的有机物 蛋白凝聚影响消毒

17、效果的因素干扰物质 蛋白质和脏物：活性氯、洗必泰、乙醇、醛类和季铵类； 肥皂：洗必泰、季铵类； 硬水：季铵类、碘化物。影响消毒效果的因素PH： 许多消毒剂在一定的PH范围内活性较高 酸性：活性氯化物、石炭酸； 碱性：季铵类、醛类、洗必泰。 一些消毒剂在过低或过高PH时不稳定 低PH：活性氯； 高PH：戊二醛、过氧乙酸、过氧化氢。影响消毒效果的因素温度：一般为温度升高，活性增加。消毒液存放 高效消毒剂失活快，如活性氯溶液，过氧化氢； 低效消毒剂易产生耐药菌株，如假单胞菌属对季铵盐类消毒液易产生耐药菌株。影响消毒效果的因素消毒剂浓度 浓度和消毒效果通常不呈线性关系； 浓度越低，通常效果越差； 太低

18、的浓度会诱导产生抗性； 乙醇在60%80%浓度范围内效果较好。消毒剂的优点-缺点消毒剂优点缺点氯化物价廉，低毒性，广谱，作用随温度升高so而加强温度升高稳定性降低，对有机物敏感，贮存要求高碘化物低剂量高效果，低毒性对眼睛有刺激，有腐蚀性，对某些物品易着色，对有机物敏感甲醛广谱，无腐蚀性有气味，有残留，作用慢过氧化物广谱，在较低温度时杀灭能力强，易洗掉稳定性差季铵类稳定性好，无腐蚀性，对G+细菌、酵母菌和霉菌有效价格贵，对蛋白质敏感，不易洗掉，对G-细菌效果差正确配制和使用消毒液配制前除菌过滤；用灭菌的纯化水或者射用水配制消毒液；按说明书要求的浓度配制消毒液；不要将剩下的消毒液倒入新配制的消毒液

19、中；选择合适的消毒剂，不要照搬；临用新配；不要混合不同种类的消毒液；轮换使用消毒剂。消毒液中有细菌生长的原因使用了不正确的浓度；用被污染的水配制消毒液；脏的容器；不相容的容器；与另一种不相容的消毒剂或清洁剂混合；消毒液放置时间太长；被有机物灭活。7、清洁程序7、清洁程序7.1 洁净室清洁人员的要求7.2 清洁区域的划分及清洁顺序7.3 清洁方法及清洁程序7.1 洁净室清洁人员的要求 清洁(cleaning)：指除去肉眼可见的污染物。 消毒(disinfection)：在表面清洁后用于杀灭多种微生物，使其数量减少到可接受的水平。 灭菌(sterilization)：杀灭所有的微生物。7.1 洁净

20、室清洁人员的要求洁净室清洁人员 洁净室工作人员应具备的两个特点： 能胜任工作 能与同伴的配合 所有清洁人员首先必须经过培训以了解洁净室基本原则，如： 为什么洁净室是必须的？ 为什么污染是很危险的？ 洁净室是如何工作的？ 为什么说洁净室更衣是必要的？7.1 洁净室清洁人员的要求 洁净室清洁人员 培训还应包括正确的洁净室程序： 良好的人员卫生的重要性 如何正确的穿着工作服 为什么移动应慢、轻？ 洁净室内行为不正确可能导致什么结果？ 培训必须包括： 专门的清洁及消毒技术 为什么始终都应按照清洁SOP进行操作？ 清洁、消毒和最终产品之间的关系 洁净室行为中应该做的和不应该做的 培训必须使所有清洁人员完

21、全明白洁净室的污染必须清除并不允许再次引入。7.2 清洁区域的划分及清洁顺序清洁对象正压区域清洁顺序负压区域清洁顺序洁净室清洁顺序清洁对象外环境系统 建筑物周围环境 外墙面及玻璃窗内环境系统 非洁净区 技术夹层地面、设备、管道； 各楼层走廊、地面、门窗、天花板； 电梯、楼梯； 各办公室； 洗手间、更衣间清洁对象内环境系统 洁净区 100级房间； 10 000级房间； 100 000级房间； 300 000级房间； 气锁、传递窗； 人流、物流通道； 洗手池。清洁对象内环境系统 洁净区内各种设备及管道 生物安全柜； 冰箱、水浴箱； 灭菌器、干烤箱； 生物反应罐； 洗瓶机、烘干机； 分装机、压盖机；

22、 接入洁净室的各类管道；正压区域清洁顺序 洁净室 气锁 走廊 气锁 无级别区 压力+ 压力+ 压力+ 压力+ 压力0 清洁消毒顺序：ABCDEABCDE负压区域清洁洁净室 气锁 走廊 气锁 走廊 气锁压力- 压力- 压力- 压力- 压力+ 压力+清洁消毒顺序：FEDCABABCDEF洁净室内清洁消毒顺序天花板、墙壁、与墙壁连接的物体、管道、台面、设备、地面；从上往下，由里到外清洁；不要在已清洁过的地面上走动。7.3 清洁方法及清洁程序清洁方法真空吸尘清洁 真空吸尘器仅对大粒子有效干擦 干擦可能脱落粒子，通常仅用于擦干潮湿表面潮湿擦拭 大多数清洁和除污必须通过湿或潮湿擦拭来完成清洁程序及技术总是

23、将一定数量的清洁剂加入到水中，不要将水加入到清洁剂中；总是以重叠的长直线方向擦拭，而不要做转圈的刮擦动作；总是从最干净的区域向最脏的区域清洁；总是从按气流方向由过滤器向外、向下清洁；每擦一次都应将抹布折叠，露出干净的一面；清洁液应倒在抹布上，而不应到或喷在待清洁的表面；清洁程序及技术清洁时应特别注意不要损伤HEPA滤器或其他敏感的设备；粗的污物通常用装有HEPA的吸尘器从所有区域除去；然后用粘有适宜清洁剂的湿或潮湿的抹布擦或拖布拖；只有在已清洁过的表面上才能进行消毒；清洁控制板及元件时，所有电源均应关闭；清洁程序及技术除非特许，清洁液决不允许流入设备；所有的清洁液在用后须倒掉；清洁人员的正确行

24、为在洁净室中是至关重要的；所有的清洁活动必须记录在清洁工作日志上。标准清洁操作程序(SOP)应包括的内容1、目的2、范围 清洁的房间3、参考 GMP 验证文件 技术文件标准清洁操作程序(SOP)应包括的内容4、职责 谁来做？ 做什么？5、材料 洁具 清洁剂 消毒剂6、程序 每个步骤标准清洁操作程序(SOP)应包括的内容7、取样与检测 取样计划 取样方案 测试方法 样品标示于运输 可接受的标准8、频率 清洁 检测标准清洁操作程序(SOP)应包括的内容9、记录 卡 标签10、不符合的处理清洁频率取决于对洁净室尘粒和微生物监测的结果（空气、表面）；符合GMP要求；理论天花板以下的墙面，清洁频率应高于

25、理论天花板以上的墙面；分装区域每一批分装后都应及时进行清洁；所有清洁区域的地面、桌面、设备表面、门把手每天至少清洁一次；孵箱、冰柜、层流柜内部的清洁应由操作人员负责，而非清洁部门。清洁频率举例级别频率内容部位大清洁10010 000100 0001个月1个月6个月清洁、消毒清洁、消毒清洁、消毒所有部位所有部位所有部位小清洁10010 000100 000每天清洁废物贮器、工作台面、设备表面、窗、栏、门、地面等8、洁净室的清洁验证及监测洁净室的清洁及消毒验证的主要步骤确定关键点；在每天结束清洁后的分析结果；分析上午的测试结果；是否符合法规要求；必要时改进清洁程序；建立内部标准。确定关键点靠近产品

26、的地方；与产品接触的表面；与产品接触的物品周围的表面；气流流型；活动频繁的地方；其他分析每天工作结束清洁后的测试结果取得采样点分布图；绘制每个采样点测试结果的柱状图；核对其均匀性 根据采样点； 根据采样日期。分析上午工作开始前的测试结果取得采样点分布图；绘制每个采样点测试结果的柱状图；核对其均匀性 根据采样点； 根据采样日期是否符合法规要求统计分析，核对结果位于限度之内： 工作结束清洁后； 上午工作开始前。定义内部标准工作结束清洁后的标准；上午工作开始前的标准；统计分析 X+3SD为最大值 X=平均值； SD= (X1-X) 2+(Xn-X)2 n-1 建立清洁动态图，便于对不同时间的定义；建

27、立警戒水平和行动水平： 警戒水平：X+2SD； 行动水平：X+3SD。进行验证测试清洁后尽快进行；上午工作前；每个测试至少进行30次。结论每次上午测试结果符合内部标准；每次工作结束清洁后测试结果符合内部标准；验证通过。结论如果上午测试结果不符合要求，验证未通过。如果上午测试结果符合要求，但是下午测试结果不符合，应进行调查。如果找到原因，并采取纠正措施，可能通过验证。如果未找到原因，将不可能通过验证。环境监测微生物检测尘粒监测警戒和行动水平调查和报告环境监测目的 减少经济损失，起到预防作用； 法规要求。微生物监测对整个生产区进行常规监测取样 关键区 非关键区：监测频率可低于关键区监测方法 室内空

28、气：悬浮菌、沉降菌 地板、墙面、台面和设备表面：接触平皿，试纸法微生物监测微生物的鉴别 通常见到的细菌还是偶然发现 与培养基无菌灌装和产品无菌试验阳性的微生物是否有关培育的温度和时间培养基灵敏度试验培养基无菌试验如何监测空气中的微生物？定量检测浮游菌 离心式采样器：常用，手提式非定量检测沉降菌 90mm培养皿，30min(GB 50243-97) 90mm培养皿，4h(EU GMP)如何监测表面的微生物？试纸法：藻酸钙试纸，25cm2接触平皿法： 55mm直径(EU GMP) 2433cm2(USP 1116)ATP法：快速，敏感性低尘粒监测监测可能影响产品质量的环境和设备监测与产品接触的压缩

29、空气和其他气体如氮气、二氧化碳等方法：粒子计数采样点数采样量GB 50243-97室内净面积 (m2)空气洁净度100级及高于100级1000级10000级100000级102322210432220862240161342100403210320080632064001601264013100040031610032200080063320063GB 50243-97每次采样的最少采样量空气洁净度级别粒径（m）0.10.20.30.55.011785198566102.838.519.856.61002.832.835.6610002.838.510000132.838.5100000322.838.5环境监测结果分析： G+球菌：人 G+芽胞杆菌：清洁、空气 G-杆菌：水、不良卫生、耐药菌株