间充质干细胞在移植免疫中的应用

1、间质干细胞在移植排斥中的应用间质干细胞在移植排斥中的应用及其相关机制的初步探讨及其相关机制的初步探讨研究研究背景背景移植移植目前治疗终末期疾病的有效手段研究研究背景背景尿毒症尿毒症120,000例例肾移植肾移植6000 例例急性排斥急性排斥20%50%研究研究背景背景肾移植后肾移植后急性排斥急性排斥：他克莫司：他克莫司研究研究背景背景5年存活率年存活率51%74%神经毒性神经毒性肾毒性肾毒性研究研究背景背景白血病白血病40,000例例造血干细胞移植GVHDGVHD30%65%GVHD（graft-versus-host disease）：）：移植物抗宿主病移植物抗宿主病研究研究背景背景15%研

2、究研究背景背景 激素激素 免疫免疫抑制剂抑制剂aGVHDaGVHDcGVHDcGVHD 激素激素 抵抗性？抵抗性？GVHDGVHD研究研究背景背景MSC（mesenchymal stem cell）：间质干细胞低免疫原性低免疫原性 自我更新自我更新容易获取容易获取免疫调节功能免疫调节功能快速体外扩增快速体外扩增 多向分化潜能多向分化潜能MSC研究研究背景背景Clinical TrailClinical Trail238238项项前期研究前期研究 研究研究目的目的探讨MSCs治疗的安全性 有效性MSCsMSCs联合低剂量他克莫司对联合低剂量他克莫司对肾移植后患者的影响肾移植后患者的影响第第一一部

3、分部分患者入选标准 性别性别年龄年龄诊断诊断供者供者组织匹配组织匹配实验组实验组1男35CG女4/62男39CG男4/63男51CG男4/64男26CG女4/65男24CG男4/66男27CG男4/6对照组对照组1女47CG男4/62男31CG男4/63男30CG男4/64男24CG女4/65女34CG女4/66男23CG男4/6CG: 慢性肾小球肾炎chronic glomerulonephritis实验组对照组他克莫司0.04-0.05mg/kgMSCs 5106移植肾动脉MMF 17-20mg/kg强的松0.26-0.3mg/kg他克莫司0.07-0.08mg/kg1月后外周静脉MSCs

4、 2106/kg移植时移植后方法方法 传染病的检测传染病的检测 培养过程中细菌、真菌的检测培养过程中细菌、真菌的检测 支原体污染的检测支原体污染的检测 内毒素的检测内毒素的检测MSCs制备 MSCs质量控制 表面标志细胞形态分化潜能 肾移植成功 对照组出现1例急性排斥 结果 结果 血清肌酐移植前、移植后外周血淋巴细胞T, B 和NK细胞比例 实验组实验组对照组对照组0 03M 3M 6M 6M 0 03M 3M 6M 6M T%T%76.9810.1372.0018.1967.5017.3381.425.4283.017.5666.9021.84CD4CD4+ +T%T%52.1616.684

5、7.4219.0560.3812.6747.9421.1742.7318.4263.2619.84CD8CD8+ +T%T%34.335.7636.987.8934.5316.3944.1016.8546.5615.4731.9723.12Treg%Treg%3.162.304.472.27*3.082.033.373.311.450.97*3.203.60B%B%9.525.0916.6513.06*8.538.497.894.884.803.21*3.831.28CD27CD27+ +B%B%25.698.5432.8511.4723.395.4949.5821.9638.1917.652

6、6.968.94NK%NK%7.246.245.835.337.304.793.572.504.773.325.091.52 结果 * * p0.05 p0.05实验组对照组移植前移植后3月移植后6月移植前移植后3月移植后6月IFN-IFN-13.225.6020.1512.978.142.6916.6310.6213.196.489.423.61TNF-TNF-2.981.795.532.174.311.952.271.212.421.923.382.34 结果 移植前后炎性因子的变化 结果 移植前后抑炎因子的变化移植前移植后3个月移植后6个月实验组对照组移植前移植后3月移植后6月移植前移植

7、后3月移植后6月IL-4IL-41.401.232.031.712.321.121.261.221.361.283.171.27IL-10IL-103.041.374.302.075.201.173.332.832.921.464.311.88移植前移植后3月移植后6月实验组17.5812.2530.0318.6137.9727.65对照组21.695.3127.4513.5817.351.47实验组对照组实验组实验组对照组对照组0 03M 3M 6M 6M 0 03M 3M 6M 6M B%B%9.525.0916.6513.06*8.538.497.894.884.803.21*3.831

8、.28 结果 CD19CD19+ +B B细胞细胞CD19CD19+ +B B细胞细胞MSCsMSCs+CD19+CD19+ +B B 结果 MSCs对CD19+B细胞凋亡的影响 结果 MSCs对CD19+B细胞增殖的影响MSCsMSCs在慢性移植物抗宿主病中的应用在慢性移植物抗宿主病中的应用 第第二二部分部分前期研究前期研究患者入组患者入组 p 2009年6月至2011年9月在南方医科大学南方医院及中山大 学附属孙逸仙纪念医院p 异基因造血干细胞移植超过6个月p 国立卫生研究院（NIH）的共识标准p -级的广泛性cGVHDp 通过常规的二联或三联免疫抑制方案治疗2个月后病情无好 转或持续进展

9、MSCsMSCsMSCs免疫表型免疫表型免疫表型免疫表型临床症状及实验室检查临床症状及实验室检查 2323名激素抵抗性慢性名激素抵抗性慢性GVHDGVHD患者患者0 month2 month1 month3 month4 monthMSCs治疗前器官评分及治疗后反应MSCsMSCs治疗后器官反应治疗后器官反应CR：完全缓解 PR：部分缓解 NR：无缓解结结 果果p 1名患者死于真菌性肺炎名患者死于真菌性肺炎p 4名患者在名患者在MSCs输注输注6个月内复发个月内复发p 19名患者表现出完全缓解（名患者表现出完全缓解（CR）或部分缓解（）或部分缓解（PR）MSCsMSCs治疗前后治疗前后cGVHDcGVHD患者外周血患者外周血T T淋巴细胞淋巴细胞亚群的变化亚群的变化*P0.05 *P0.01MSCsMSCs治疗前后治疗前后cGVHDcGVHD患者外周血患者外周血B B淋巴细胞淋巴细胞亚群的变化亚群的变化*P0.05 *P0.01p 肾移植患者应用MSCs联合低剂量的免疫抑制剂是安全的，无 毒副作用，未增加急性排斥的风险。p MSCs可能是通过抑制CD19+B细胞的凋亡和促进CD19+B细胞的增殖增