动物模型的建立与应用

1、： n 免疫缺陷动物免疫缺陷动物常用模型动物简介常用模型动物简介免疫缺陷动物免疫缺陷动物是指由于先天性遗传突变或用人工方法是指由于先天性遗传突变或用人工方法造成一种或多种免疫系统组成成分缺陷的动物造成一种或多种免疫系统组成成分缺陷的动物 免疫缺陷动物的分类免疫缺陷动物的分类F先天性免疫缺陷动物：先天性免疫缺陷动物： T淋巴细胞功能缺陷动物淋巴细胞功能缺陷动物 裸鼠裸鼠 B淋巴细胞功能缺陷动物淋巴细胞功能缺陷动物 CBA/N小鼠小鼠 NK细胞功能缺陷动物细胞功能缺陷动物 Beige小鼠小鼠 联合免疫缺陷小鼠联合免疫缺陷小鼠 SCID小鼠小鼠F获得性免疫缺陷动物模型获得性免疫缺陷动物模型 小鼠小鼠

2、AIDS模型模型 猴猴AIDS模型模型 黑猩猩的黑猩猩的HIV感染模型感染模型 一一 、 裸小鼠裸小鼠3、应用应用二、裸大鼠二、裸大鼠三、性连锁免疫缺陷小鼠三、性连锁免疫缺陷小鼠（X-linked immune deficiency mouse ,XID）四、四、Beige小鼠小鼠五、严重联合免疫缺陷小鼠（五、严重联合免疫缺陷小鼠（Severe combinedimmunodeficient mice，SCID）六、六、Motheaten小鼠小鼠七、人工培育的先天性联合免疫缺陷动物七、人工培育的先天性联合免疫缺陷动物 第二节第二节 人体肿瘤裸鼠移植模型概述人体肿瘤裸鼠移植模型概述 一、人体肿瘤

3、异种移植的历史一、人体肿瘤异种移植的历史二、人体肿瘤裸鼠移植瘤的生物学特征二、人体肿瘤裸鼠移植瘤的生物学特征 (1) 保持原发瘤的病理形态学、染色体特征、肿瘤标记物保持原发瘤的病理形态学、染色体特征、肿瘤标记物 等特点。等特点。 (2) 多数肿瘤呈结节状生长，周围有膜包裹，极少可有局部多数肿瘤呈结节状生长，周围有膜包裹，极少可有局部 侵润和远处转移，其组织形态、超微结构等均保持移植侵润和远处转移，其组织形态、超微结构等均保持移植 前肿瘤的特征。前肿瘤的特征。 (3) 传代的移植瘤能保持肿瘤的机能。如原发肿瘤的分泌特传代的移植瘤能保持肿瘤的机能。如原发肿瘤的分泌特 性。性。AFP，HBsAg，C

4、EA（5）裸鼠对移植瘤的反应）裸鼠对移植瘤的反应 丧失原有间质，而获得小鼠间质丧失原有间质，而获得小鼠间质 当肿瘤生长时，原发肿瘤的间质退化，由宿主产生新的当肿瘤生长时，原发肿瘤的间质退化，由宿主产生新的 移植瘤间质。移植瘤间质。 间质可引起癌组织本身分化程度的差别及发生化生的可间质可引起癌组织本身分化程度的差别及发生化生的可能。如裸鼠的结缔组织可以增生和分化为软骨和骨能。如裸鼠的结缔组织可以增生和分化为软骨和骨Ewing肉瘤可以诱导裸鼠产生新生骨。肉瘤可以诱导裸鼠产生新生骨。（6）裸鼠移植瘤的评估）裸鼠移植瘤的评估 三、裸鼠肿瘤移植模型具有的优点三、裸鼠肿瘤移植模型具有的优点四、裸鼠肿瘤移植

5、模型缺点四、裸鼠肿瘤移植模型缺点第三节、人体肿瘤裸鼠移植瘤模型的建立方法第三节、人体肿瘤裸鼠移植瘤模型的建立方法人体肿瘤裸鼠移植方法人体肿瘤裸鼠移植方法（一）移植肿瘤的常规处理及移植方法：（一）移植肿瘤的常规处理及移植方法：（二）不同移植部位（二）不同移植部位 1、腹水瘤的建立及移植方法：、腹水瘤的建立及移植方法：将实体瘤细胞悬液注入裸鼠腹将实体瘤细胞悬液注入裸鼠腹腔，可形成腹水，用于定量移植，早期为血性后为乳白色，腔，可形成腹水，用于定量移植，早期为血性后为乳白色，若将腹水细胞注入皮下可形成实体瘤若将腹水细胞注入皮下可形成实体瘤 2、肾包膜移植：、肾包膜移植：可将人癌组织移植于正常非免疫抑制

6、小鼠肾可将人癌组织移植于正常非免疫抑制小鼠肾包膜，癌组织成活包膜，癌组织成活6d。用于体内抗癌药物的筛选。用于体内抗癌药物的筛选 3、原位移植：、原位移植：将人体肿瘤细胞移植于与肿瘤原发部位相同的将人体肿瘤细胞移植于与肿瘤原发部位相同的裸鼠脏裸鼠脏 器内，如将肝癌移植于裸鼠的肝。器内，如将肝癌移植于裸鼠的肝。影响人体肿瘤裸鼠移植的因素影响人体肿瘤裸鼠移植的因素 1、人体肿瘤细胞本身的特征：、人体肿瘤细胞本身的特征： 人手术标本裸鼠移植成功率为人手术标本裸鼠移植成功率为28.3%,其中复发瘤其中复发瘤为为50%,转移瘤为转移瘤为38.5%,而原发瘤仅为而原发瘤仅为20.5%. 黑色素瘤和结肠癌的

7、移植成功率高黑色素瘤和结肠癌的移植成功率高,而腺癌和造血而腺癌和造血系统肿瘤移植成功率低系统肿瘤移植成功率低. 用已建株的癌细胞系移植成功率高于用人癌手术用已建株的癌细胞系移植成功率高于用人癌手术标本移植标本移植.2、裸鼠的免疫状态：、裸鼠的免疫状态： 裸鼠体内裸鼠体内NK细胞和细胞和B细胞活性正常，可采用免疫抑制细胞活性正常，可采用免疫抑制剂、射线照射等措施降低动物的免疫功能。剂、射线照射等措施降低动物的免疫功能。 采用联合免疫缺陷动物。采用联合免疫缺陷动物。3、移植部位和途径：、移植部位和途径： 皮下接种时，以接近头侧的成功率高，通常为腋下。皮下接种时，以接近头侧的成功率高，通常为腋下。一

8、般不发生转移和侵袭。一般不发生转移和侵袭。 肾包膜接种成功率高于皮下。肾包膜接种成功率高于皮下。 腹腔接种产量高，较易显示癌细胞的侵袭和转移力。腹腔接种产量高，较易显示癌细胞的侵袭和转移力。 原位接种，成功率高，生物学行为和药物动力学更接原位接种，成功率高，生物学行为和药物动力学更接近人体的原发瘤。近人体的原发瘤。4、激素和宿主性别：、激素和宿主性别： 依赖雌激素的乳腺癌接种于正常雌性裸鼠上生长较慢，依赖雌激素的乳腺癌接种于正常雌性裸鼠上生长较慢，接种到雄性裸鼠上生长则更慢。接种到雄性裸鼠上生长则更慢。PC82人前列腺癌可在雄性人前列腺癌可在雄性裸鼠中连续传代，而不能在雌性裸鼠中长出肿瘤。裸鼠

9、中连续传代，而不能在雌性裸鼠中长出肿瘤。5、鼠龄：、鼠龄： 与成年（与成年（6-8周龄）的裸鼠相比，移植在幼年或新生裸鼠周龄）的裸鼠相比，移植在幼年或新生裸鼠体内的肿瘤更易生长和转移。这与不同龄鼠体内的肿瘤更易生长和转移。这与不同龄鼠NK细胞活性不细胞活性不同有关。同有关。 6、裸鼠的健康及洁净状况：、裸鼠的健康及洁净状况： 洁净度越高，外界抗原越少，裸鼠的洁净度越高，外界抗原越少，裸鼠的NK细胞活力越细胞活力越低，更适宜移植瘤的生长及转移的形成。低，更适宜移植瘤的生长及转移的形成。 Kyriazis发现发现SPF级裸鼠皮下或腹腔接种级裸鼠皮下或腹腔接种106人喉癌细人喉癌细胞胞HEP-2均可

10、成瘤，且可见皮下肿瘤侵袭包膜，腹腔接种均可成瘤，且可见皮下肿瘤侵袭包膜，腹腔接种呈明显侵袭和转移，但相同数量瘤细胞接种到肝炎阳性裸呈明显侵袭和转移，但相同数量瘤细胞接种到肝炎阳性裸鼠身上，却未发展成肉眼可见的瘤节。鼠身上，却未发展成肉眼可见的瘤节。 一般认为裸鼠受病毒、细菌等感染，可增加抗原的刺一般认为裸鼠受病毒、细菌等感染，可增加抗原的刺激，从而影响激，从而影响NK细胞等非细胞等非T细胞依赖性免疫活性。细胞依赖性免疫活性。第四节第四节 SCID-hu模型的建立极其在肿瘤学研究模型的建立极其在肿瘤学研究中的应用中的应用一、一、SCID-hu小鼠模型的概述小鼠模型的概述 将人外周血淋巴细胞和其他

11、人体组织移植于将人外周血淋巴细胞和其他人体组织移植于SCID小鼠，小鼠，使其具有人体的某些免疫学特征，称之为使其具有人体的某些免疫学特征，称之为SCID-hu模型模型 可将自身免疫性疾病患者的淋巴细胞、脾细胞、胸腺细可将自身免疫性疾病患者的淋巴细胞、脾细胞、胸腺细胞移植于胞移植于SCID小鼠，鼠体内出现自身免疫性抗体，可出现相小鼠，鼠体内出现自身免疫性抗体，可出现相似于患者的自身免疫性组织学损伤。似于患者的自身免疫性组织学损伤。 在移植在移植SCID小鼠人皮肤组织中接种黑色素瘤组织，观察小鼠人皮肤组织中接种黑色素瘤组织，观察人正常皮肤组织与瘤组织的相互作用。人正常皮肤组织与瘤组织的相互作用。二、可移植的组织二、可移植的组织1、胎肝、胎胸腺，胎儿骨髓和成年人外周血淋巴细胞、胎肝、