实验九 紫外分光光度法测定核酸的含量_第1页
实验九 紫外分光光度法测定核酸的含量_第2页
实验九 紫外分光光度法测定核酸的含量_第3页
实验九 紫外分光光度法测定核酸的含量_第4页
实验九 紫外分光光度法测定核酸的含量_第5页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、实验九实验九 紫外分光光度法测定紫外分光光度法测定 核酸的含量核酸的含量一一 实验原理实验原理 核酸、核苷酸及其衍生物都具有共轭核酸、核苷酸及其衍生物都具有共轭双键系统，能吸收双键系统，能吸收紫外光紫外光。RNA和和DNA的的紫外吸收高峰在紫外吸收高峰在A260nm波长处。一般在波长处。一般在A260nm波长下，每波长下，每ml含含1gRNA溶液的光吸溶液的光吸收值为收值为0.022。所以测定未知浓度。所以测定未知浓度RNA溶液溶液A260nm波长的光吸收值即可计算出其中核酸波长的光吸收值即可计算出其中核酸的含量。的含量。二二 实验操作实验操作 1. 称取核酸样品称取核酸样品0.05g加入加入

2、2ml左右的左右的DW溶解（可在水浴锅上加热促其溶解）溶解（可在水浴锅上加热促其溶解）然后用玻璃棒然后用玻璃棒蘸取蘸取稀氨水调节稀氨水调节pH到到7使用使用pH试纸调节试纸调节调好后将样品液定容调好后将样品液定容到到5ml（使用（使用10ml量筒定容）量筒定容） 2. 取取2支离心管，按下表加样支离心管，按下表加样振荡振荡均匀均匀在冰箱中冷却在冰箱中冷却30min然后然后离心离心15min,V=8000离心管号离心管号12样品液样品液2ml2mlDW2ml-沉淀剂沉淀剂-2ml 3. 上清液稀释上清液稀释100倍：倍： 用移液管从离心管中移取用移液管从离心管中移取0.5ml上清液置上清液置于量筒中于量筒中用用DW定容到定容到50ml倒入小倒入小烧杯搅拌均匀烧杯搅拌均匀然后用紫外分光光度计测然后用紫外分光光度计测OD260nm值值A1,A24.

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论