血型鉴定和亚型2009-9-20华信(1)

1、ABOABO血型和亚型检查血型和亚型检查北京佰利申公司市场部北京佰利申公司市场部张松张松2009-9-24 讨论内容nABO血型及遗传n血型试剂的现状和发展nABO血型检查和亚型诊断和案例nABO亚型输血原则发现血型n1900年奥地利医生Landsteiner发现了ABO血型系统，成为血型血清学的奠基人。1932年获诺贝尔医学奖。被国际医学界称为“血型之父”n血型血清学：应用血清学的方法研究血液中抗原、抗体及其反应的科学。血型与遗传血型与遗传n基因是遗传的基本单位。n一个个体所带的基因总和，称为基因型,血型抗原通常是共显性性状。n血型血清学方法直接检测出的基因产物，称为表型。ABO血型的遗传共

2、由3个等位基因IA，IB和i控制的，通常为共显性。血型的遗传是十分稳定的，但也有一些特殊的情况血型的遗传是十分稳定的，但也有一些特殊的情况人类ABO系统血型表血型表型基因型抗原(在细胞膜上)抗体基因和产物AIAIA,IAiA（抗B）IA(9q34)N-乙酰半乳糖转移酶BIBIB,IBiB（抗A)IB(9q34)半乳糖转移酶ABIAIBAB-Oii-（抗A抗B）i(9q34)无相应产物血型系统血型系统n是指一系列等位基因产生的,可使用血清学方法或免疫学检出化学上有关的抗原。血型在医学、法医学中的应用血型在医学、法医学中的应用n器官移植n输血治疗n疾病诊断（HDN等）n疾病相关n亲子鉴定n个体识别

3、8ABOABO抗体抗体n性质：多数为IgM，或有少量IgG，IgAn天然抗体：没有明显抗原刺激而产生的抗体。n免疫抗体：通过输血、妊娠等免疫刺激获得的抗体nA型人抗BnB型人抗A多为IgMnO型人除具有抗A，抗B外，还有抗AB，为IgG，IgM或IgA混合物，IgG型抗A或抗B可通过胎盘。nB型人抗A效价高于A型人抗B效价nO型人抗A，抗B或抗AB效价高于B型或A型人相应抗A或抗B。n完全缺乏抗A、抗B者，0.01%。配血步入基因时代配血步入基因时代n为了预防输血不良反应和挽救生命，欧州学者们正在呼吁用DNA检测替代血清学方法来鉴定血型。n基因分型能更准确地完成供受者间的血型配型，从而防止同种

4、免疫和其它免疫相关的输血反应。n100多年来血清学方法面临挑战。血型试剂的现状与展望血型试剂的现状与展望n抗A抗B血型定型试剂：中国生物制品规程2000版：能检测A2、A2Bn2010版药典（正在修订）不能低于中检所的标准品。nISBT对定型试剂要求，既不能“漏检”A3、B3，理想的是能识别Ax、Bx，血凝效价至少在1：128。我国抗我国抗A A抗抗B B血型试剂标准血型试剂标准n特异性：抗-A，只凝集含A抗原红细胞，包括A1、A2、A1B、A2B;可不凝集Ax、Bx细胞。n亲和力：抗-A对A1细胞开始凝集的时间为15秒，对A2为30秒，对A2B为45秒；抗-B对B红细胞为15秒。n效价：抗-

5、A1 1：128，抗-A2B1：16、抗-B 1：128正确检查方法和高质量试剂缺一不可正确检查方法和高质量试剂缺一不可n从理论到实际可以说明，不可能绝对避免亚型红细胞“漏检现象”。n应用高质量的血型试剂，应达到ISBT标准。n正确的血型检定方法：输血规范要求，即”供受”必须做正反定型，才能正确判断血型。确保安全输血。13ABOABO亚型亚型nA 亚型 1911年, von Dungern 发现A型有2种，A1， A2 nA2与A1有量的差别，A2抗原位点数比A1少得多，糖基转移酶活性也低nA2与A1也有质的差别，1-8% A2有抗A1nA1细胞上有A及A1抗原nA2细胞上只有A抗原nA1，A

6、2亚型实际上是由H抗原结构造成的，H1，H2是非分支直链，而H3，H4为分支链，A1酶可将H1-4转化为Aa-d，而A2酶只能转化H1，H2为Aa，Ab，抗A1可能是针对Ac，Ad决定簇的。与抗与抗A A反应的相对凝集力反应的相对凝集力以及每个红细胞上以及每个红细胞上A A位点的密度位点的密度表现型凝集力抗原位点密度（每个红细胞上的A位点X105）A1A2A3AxAendAm,AyAel100962631033101050010.5(7.9514.56)2.21(1.293.53)0.35(0.071.0)0.048(0.0140.10)0.035(0.0110.044)0.012(0.001

7、0.019)0.007(0.0010.014)亚型频率分布亚型频率分布献血者检测确定其它亚型66/440617份（除A214例，A2B35例）nA亚型22份nAxB11例，AelB3例，Ax3例，Ael2例，Amh2例，A31例nB亚型41份nBx11例，B39例，ABx7例，AB35例，Bel3例，Bm2例，ABel1例，ABend1例，ABm1例，Bend1例。nCisAB2例,nB(A)1例nB亚型多于A亚型。最常见亚型为AxB和Bx。有不规则抗体54例n引自中国输血杂志2006，19（1）：25血源“漏检”亚型nA3，B3漏检：微孔板法，正反定型相符，忽略混合视野。nAxB漏检:误定为

8、B型，医院配血次侧不合退回。nBx漏检：误定为O型，输注给O型，出现明显输血反应。nA亚型的不规则抗体通常很弱，属冷抗体，配血很容易漏检。n亚型受血者漏检，又未查出抗体，很容易导致输血反应。血型血型正定型试验正定型试验型物质型物质抗原数抗原数/细胞细胞（103）血清中血清中抗抗-A1抗抗A、抗、抗AB、抗、抗H、抗、抗A1A14+ 4+ W+ 4+A，H810-1170无无A24+ 4+ 3+ 0A，H240-2904%A32+mf 2+mf 4+ 0A，H35很少很少Ax0/w+ 1-2+ 4+ 0H4几乎全部几乎全部Am0/ 0/ 4+ 0A，H0.2-1.9无无AendWkmf Wkmf

9、 4+ 0H200(10%凝集凝集)无无Ael0 0 4+ 0H0.1-1.4经常经常A A亚型血清学反应特征亚型血清学反应特征主要A亚型：A1、A2亚型n抗原数和分泌物质量区别。n与抗A试剂血清均可直接凝集。n与抗A1试剂凝集：为A1、A1B红细胞，占80%。n与抗A1试剂不凝集：为A2、A2B红细胞，占20%。nA2、A2B红细胞：10%,25%有抗A1抗体。nA2、A2B红细胞：血样中不含抗红细胞：血样中不含抗A1抗体，则不必用抗抗体，则不必用抗A1确定其亚型。确定其亚型。亚型有意外抗体n2007某院输血科、男、输血前检查，不同试剂出现不同结果。n长春博德标清：-A（-）、-B（4+）。

10、n北京血站鉴定：A亚B。辅助检查和吸收放散试验辅助检查和吸收放散试验n进口试剂：-A(w+)、-B（4+）、-A1(-)、-H(2+w)、Ac(3+)、 Bc(-)、Oc(-)、自身(W+)n国产长春：-A(-)、-B（4+）n吸收试验：抗-A（进口）+3洗病人红细胞各6滴混匀，放4冰箱1小时（混匀/15分钟）。n放散试验：6洗吸收后红细胞56/10分钟，放散液+Ac离心3+（效价1：8）。n诊断：A亚B。n建议输B型洗涤红细胞或O型洗涤红细胞比较安全。B亚型案例n2009年02月25日、某医院正常体检n血型检测B孔双群，经正反定进一步确证，报告B型。亚型有意外抗体n2004年，某院、女、子宫

11、肌瘤、术前输血科血型检查。n戴安娜卡：正定：AB、反定：B，正反不符。n长春博德标清：正定：B、反定：B，正反相符。n对卡的血型结果提出疑问？n经北京血站鉴定：A亚B、血清中有抗A1抗体。n报告发回数天后，用户回电质疑：其夫是B型，能生出O型孩子吗？n答案：？亚型有意外抗体n2008某院、男、输血前检查，漏检弱A，会误判B型。n北京血站鉴定：B（A）型、血清中有抗A1抗体。n并做基因检查（其基因型应为B（A）/O型）。n家系调查：待查。亚型有意外抗体顺式遗传和顺式遗传和B(A)n顺式AB指从父母的一方同时得到A和B基因，在一条染色体上，而另一条染色体上是从父母中另一方来的O基因。nB（A）血型

12、是一种罕见的ABO亚型，其A和B抗原的传递呈顺式遗传方式，同cisAB血型有相似之处。ncisAB和B（A）表型的抗原含量各有偏重（其基因型应为B（A）/O型）。n注意的是：n含有不规则抗体的cisAB型、B（A）型，不宜作为普通供血者。n若为受血者，除输同型的cisAB型、B（A）型外，还可输O型洗涤红细胞及AB型血浆。正反定型不一致，则需要附加试剂进一步鉴定n正定型中增加抗-A1、抗-H、抗-AB。n抗-AB用来确认弱A、弱B抗原。n抗A1用于鉴定A亚型。n抗-H用于鉴定亚型及孟买型。n反定型试验中增加O细胞，用于鉴定是否存在ABO系统以外的同种抗体对定型的影响。n吸收试验、放散试验证实抗

13、原存在。ABO以外的同种抗体对定型的影响n影响反定型的血型抗体，抗-M抗体多见n试管法用O细胞与病人血浆离心看结果有凝集，即ABO以外抗体Am 亚型及家系调查n正定型：抗A(-)抗B (-)抗A1 (-)抗AB (w+)n反定型： Ac (-) Bc (3+) Oc (-)自身(-)n血型物质测定：A、H物质n吸收放散：证实：An家系：其父A 其母O ，子代:2个Am 2个An推断其父血型基因是A/Am,其母血型基因是O/OA3型特征：n与抗-A试剂血清出现混合视野n与抗-AB试剂血清出现混合视野n与抗A1不凝集n与抗-H反应n偶尔血清中有抗-A1抗体。n分泌型有A和H物质。血站对亚型结果判断

14、n血站对某些血型鉴定结果为：“暂定”或“初定”疑问：由于病人有过输血或治疗。某些疾病或治疗影响抗体减弱或抗原生成、减弱。一般亚型可以用抗A1检查，若阴性可以定为亚型。但新生儿本身抗原就弱，用抗A1确定亚型时，最好用正常的新生儿红细胞用抗A1对照后，再确定结果（保证抗A1抗体的准确性）。Ax型特征：填空n与抗-A试剂血清出现（）n与抗-AB试剂血清出现（）n与抗A1试剂血清（）n与抗-H试剂血清反应（）n其血清中是否有抗-A1抗体（）。n分泌型有A（）H（）物质。n简述吸收放散试验？n如何输血？Oh(孟买）型特征：n血型检定：正定：-A（-）、-B（-）、-AB（-）、-H（-)， 反定：Ac+

15、、Bc+、Oc+n抗筛：(+）、（+）、（+）、自身（-）n鉴别Oh型、O型？nOh型输血？总结：亚型鉴定试验n红细胞与抗A及抗A1的凝集强度。n红细胞与抗AB的凝集强度。n红细胞上H抗原活性强弱n血清中是否存在抗A1抗体。n分泌型人唾液中A及H物质的存在。n吸收放散试验证明A抗原的存在。n家系调查nDNA临床输血技术规范n2000 184号卫生部关于临床输血技术规范n第十五条第十五条 输血科（血库）要逐项核对输血申请单、受血者和供血输血科（血库）要逐项核对输血申请单、受血者和供血者血样，复查受血者和供血者者血样，复查受血者和供血者ABOABO血型（正、反定型血型（正、反定型) )n除新生儿外

16、，除新生儿外，ABOABO血型检测必须做正反定型血型检测必须做正反定型nABOABO正反定型不一致时正反定型不一致时重复试验，排除技术原因重复试验，排除技术原因询问患者病史，包括诊断、输血史等询问患者病史，包括诊断、输血史等不可根据自己经验，随意下结论不可根据自己经验，随意下结论临床输血技术规范输血前检查“三保险”nABO血型：相合99.4%，nRHD：相合99.8%n抗体筛查：相合99.94%n交叉配血：相合99.95%疑难血型/配血，紧急输血怎么办？n输血前检查（血型、抗筛、配血）与常规血液血检查不同，如：Hb、WBC、PT可直接报结果。n血型报告是综合分析结果（诊断？）不是直接报告结果。

17、n如：正定（AB)、反定（O）直接结果几分钟可报告。n分析结果（到底是什么血型） ？n许多补充试验几小时 几天外送。n输血科与医生沟通：血型报告O/A/B?相当于临床诊断休克/原因待查（？）疑似非典。n政策依据临床技术规范第10条，对稀有血型患者（疑难必稀有）输血原则：自身输血、同型输血、配合型输血。n配合性输血（没有要求供受同型），不必为纠缠血型而耽误输血抢救。疑难血型/配血，紧急输血怎么办？例：血液病、亚型（疑难）血型：A? O? 进一步确定血型：吸收、放散、血型物质、抗-H、家系、DNA 需要4h-几天。若紧急抢救。患者：当“O”处理。 真是O，输O细胞，安全。 真是A，输O细胞，安全。例:AIHA,正定：AB型，反定：O型。 血型：AB? O? 患者：当“O”处理。 真是“O”输O细胞，安全。 真是“AB”输O细胞，安全。疑难血型/配血，紧急输血怎么办？n其它血型不容易判断，照此办理。n注意：n这种情况下，必须做抗体筛选和两种方法配血。n遇到疑难血型，输血科和临床应该理解沟通，提供选择解决方案： 等待4h-3天（自己做）外送几天？（血型鉴定清楚再输血）。 上述紧急办法，立即配血/紧急抢救。