大肠菌群检测(三)重点课件_第1页
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文档简介

1、大肠菌群检测(三)重点牛乳大肠菌群复发酵牛乳大肠菌群复发酵(f jio)(f jio)实验实验BGLBBGLB液体接种操作液体接种操作第一页,共十三页。大肠菌群检测(三)重点实训目的实训目的(md)(md)进一步理解大肠菌群检测的操作流程了解(lioji)大肠菌群液体接种方法 进一步熟悉无菌操作要点第二页,共十三页。大肠菌群检测(三)重点实训仪器实训仪器(yq)(yq)与设备与设备酒精灯、接种针、火柴(huchi)、75%酒精棉、LST肉汤培养物、BGLB肉汤培养基第三页,共十三页。大肠菌群检测(三)重点实训步骤实训步骤(bzhu)(bzhu)1、LST肉汤培养基的产气检查(jinch) 观察

2、培养完毕的LST肉汤培养液,观察小倒管中是否有气体产生。若有气体产生,则疑似疑似大肠菌群,需要进行BGLB肉汤培养基接种。第四页,共十三页。大肠菌群检测(三)重点 LST LST肉汤肉汤 BGLBBGLB肉汤肉汤 结果结果(ji (ji gu)gu) 1:10 产气 产气 阳性 1:100 产气 产气 阳性 1:1000 产气 产气 阳性第五页,共十三页。大肠菌群检测(三)重点2、BGLB液体接种 将产气的LST肉汤培养基进行(jnxng)液体接种。 在酒精灯上灼烧接种环,从LST肉汤培养基中挑取一环菌液,接种于BGLB肉汤培养基中,36培养48小时后。观察产气情况。第六页,共十三页。大肠菌群

3、检测(三)重点液体接种操作要点液体接种操作要点(yodin)(yodin):1、操作前消毒2、接种环灼烧完全,镍丝要烧红。3、棉塞夹于拿接种针手的无名指和小指之 间4、打开棉塞后试管口要在酒精灯旁,避免杂菌进入。第七页,共十三页。大肠菌群检测(三)重点BGLBBGLB接种操作接种操作(cozu)(cozu)问题:问题: 1 1、如何进行、如何进行LSTLST肉汤培养基的产气检查?肉汤培养基的产气检查?2 2、如何用接种针进行挑菌操作?、如何用接种针进行挑菌操作?3 3、液体接种过程中如何使用才能保证无菌状态?、液体接种过程中如何使用才能保证无菌状态?第八页,共十三页。大肠菌群检测(三)重点1、

4、观察试管内的小倒管,如果小倒管有气泡存在或者小导管上漂,说明试管产气。2、首先点燃酒精灯,在酒精灯旁进行操作(cozu)。其次接种前充分灼烧接种针,将镍丝烧红为止。接种时将试管放于酒精灯上方火焰外焰处,棉塞加于无名指和小指之间。3、吸量管在使用前进行灼烧,拿管要求远离实训服,使用前检查是否包扎完好无玻璃外露。第九页,共十三页。大肠菌群检测(三)重点思考题:1 1、大肠菌群检测流程、大肠菌群检测流程2 2、回顾初发酵试验步骤、回顾初发酵试验步骤 3 3、大肠菌群检测涉及到几种、大肠菌群检测涉及到几种(j zhn)(j zhn)培养基?培养基?LSTLST肉汤培养基的制备肉汤培养基的制备步骤、配方

5、是什么?步骤、配方是什么?第十页,共十三页。大肠菌群检测(三)重点2、初发酵实验步骤1)称取25g固体样品,加入225mL无菌水中,均质制备成1:10 样品溶液。 2)用1只1mL无菌吸量管吸取1:10样品溶液,用无菌方法(fngf)各取1mL,分别加入到3只LST肉汤培养基中。 3)吸取1mL1:10样品溶液,加入到装有9mL无菌试管中摇匀,制备成1:100样品溶液。 4)换1只吸量管各取1mL1:100溶液,加入到3只LST肉汤培养基中。 5)吸取1mL1:100样品溶液,加入到装有9mL无菌试管中摇匀,制备成1:1000样品溶液。 6)换1只支吸量管各取1mL1:1000溶液,加入到3只

6、LST肉汤培养基中。7)36度1度,48小时2小时培养后观察第十一页,共十三页。大肠菌群检测(三)重点3、2种培养基,LST肉汤培养基和BGLB肉汤培养基。 LSTLST肉汤培养基:肉汤培养基:胰蛋白胨或胰酪胨 20.0 g氯化钠 5.0 g 乳糖 5.0 g 磷酸氢二钾(K2HPO4) 2.75 g 磷酸二氢钾(KH2PO4) 2.75 g 月桂基硫酸钠 0.1 g 蒸馏水 1 000 mL pH 6.80.2 将上述成分溶解于蒸馏水中,调节 pH。分装到有玻璃小倒管的试管中,每管10 mL。121 高压(goy)灭菌15 min。第十二页,共十三页。大肠菌群检测(三)重点内容(nirng)总结牛乳大肠菌群复发酵(f jio)实验BGLB液体接种操作。观察培养完毕的LST肉汤培养液,观察小倒管中是否有气体产生。2、首先点燃酒精灯,在酒精灯旁进行操作。其次接种前充分灼烧接种针,将镍丝烧红为止。接种时将试管放于酒精灯上方火焰外焰处,

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