磷含量的测定

1、铝蓝比色法(1)仪器：瓷塔锅或石英塔锅、紫外分光光度计、移液管(5ml、10ml)、电炉高温炉、漏斗、容量瓶：100,500,1000ml、表面皿、烧杯、量筒、恒温水浴锅、增锅、试剂瓶等。4f-G(2)试剂：(?*V!Q!x-L%a、50%氢氧化钾溶液/盐酸、硫酸、氧化锌、滤纸、0.015%硫酸联氨溶液；8*/z"b、2.5%铝酸钠稀硫酸溶液：量取140ml硫酸注入300ml水中，摇匀，冷却至室温，加入12.5g铝酸钠，溶解后加水至500ml,摇匀，静置24小时备用。c、磷标准溶液：称取无水的磷酸二氢钾0.4391g溶于1000ml水中作为1号液，含磷0.1mg/ml,吸取1号?夜1

2、0ml,加水稀释至100ml含磷0.01mg/ml作为2号液，比色用。(3)操作方法：a、绘制标准曲线85N1_*H4S(Q以吸光值为纵坐标，以磷(0.01、0.02、0.04、0.06、0.08mg)为横坐标绘制标准曲线。比色管号124682号标准液/ml12468蒸储水/ml98642硫酸联氨溶液(5%)8ml铝酸钠稀硫酸溶液2ml加塞摇匀，去塞，置于正在沸腾的水浴中加热10分钟，取出冷却至室温,J用水稀释至50ml,充分摇匀10min分光光度计计在波长650nm测定吸光值b、制备被测液：用增锅称取试样约10g(准确至0.001g),加氧化锌0.5g,先在电炉上加热炭化，然后送入55060

3、0c的高温炉中灼烧至灰化(白色)，灼烧时间约2小时，取出堪锅在干燥器中冷却至室温，用热盐酸(1:1)10ml溶解灰分，并加热微沸5分钟，将溶解液过滤，注入100ml容量瓶中，用热水冲洗塔锅和滤纸，待滤液冷却至室温后，用50%氢氧化钾溶液中和至出现浑浊，缓慢滴加盐酸使氢氧化锌沉淀全部溶解后，再滴2滴，最后用水稀释至刻度，摇匀。"0m2c、比色：用移液管吸取被测液10ml注入50ml比色管中，加入0.015%硫酸联氨8.0ml,力口2.0ml铝酸钠稀硫酸溶液，加塞，摇匀，将比色管置于正在沸月的水浴中加热10分钟，取出冷却至室温，用水稀释至50ml充分摇匀，经10分钟后，用分光光度计在65

4、0nm下，用1cm液槽，用水调整零点，测定消光值。*%*Q6g'h8y;l9d、结果计算：5Y4v2$s:0N1Q0根据被测液的消光值，从标准曲线查得磷量(p),按公式计算磷脂含量微波消解-分光光度法测定食品中磷试齐1J:1、硝酸，优级纯。2、15%(v/v)硫酸溶液。3、50g/L电目酸钱溶液：(取5g电目酸俊固体，用15%的硫酸溶液稀释至100ml。)4、200g/L亚硫酸钠溶液：(根据每次的使用量，称取一定量的亚硫酸钠固体，溶解到相应的蒸储水中即可)(每次使用前临时配制)。5、对苯二酚溶液：取0.5g(对苯二酚固体溶解并定容到100ml并在配好的溶液中加入一滴浓硫酸。)6、磷标准

5、贮备液(1000ug/ml):称取预先在105c干燥至恒重并保存于干燥器中的磷酸二氢钾(优级纯)0.4393g溶解于蒸储水中，并定容至1000mlo7、磷标准使用液(10ug/ml):取磷标准贮备液进行逐级稀释，使最后浓度为10ug/ml。仪器微波消解炉、内衬杯、分光光度计标准曲线的制备：分别吸取磷标准使用液0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml至8支10ml比色管中，依次加入1ml铝酸钱溶液、0.5ml亚硫酸钠溶液及0.5ml对苯二酚溶液，加蒸储水定容到10m,l摇匀，静置30min,在波长660nm处测定其吸光度，根据测定值绘制标准曲线。参考文献：1姚祖江.微波

6、消解测定食物中磷含量.食品科学,2010(13):326-3282李淑敏，应波.微波消解-分光光度法测定食品中磷.中国卫生检验杂志,2005,11(15):1295-1297.中华人民共和国国家标准食物中磷的测定方法原理食品中的有机物经酸破坏以后，磷在酸性条件下与铝酸俊结合生成磷铝酸钱。用氯化亚锡、硫酸肿还原磷铝酸钱生成蓝色化合物一一铝蓝。蓝色强度与磷含量成正比，可进行比色定量。试齐I1硝酸。2硫酸：比重1.84。3局氯酸。415%硫酸溶液：取15mL硫酸，加入到80mL水中，混匀。放冷以后用水稀释至100mL。55%硫酸溶液：取5mL硫酸，加入到90mL水中，混匀。放冷以后用水稀释至100m

7、L。63%硫酸溶液：取3mL硫酸，加入到90mL水中，混匀。放冷以后用水稀释至100mL。7铝酸钱溶液：称取5g铝酸钱(NH4)6Mo7O244H2O用15%硫酸稀释至100mL。8氯化亚锡-硫酸肿混合液：称取0.1g氯化亚锡(SnCl22H2O),0.2g硫酸肿(NH2NH2H2SO4),加3%硫酸溶液并用其稀释至100mL。此溶液置棕色瓶中，贮冰箱至少可保存一个月。9磷标准储备液：精确称取在105c干燥至恒重的磷酸二氢钾(优级纯)0.4394g,用水溶解于100mL容量瓶中，并加水至刻度，混匀。此溶液每毫升含1mg磷。置聚乙烯瓶贮于冰箱中保存。10磷标准使用液：准确吸取磷标准储备液1.00

8、mL于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。此溶液每毫升含10dg磷。仪器：分光光度计。样品处理称取各类食品的均匀干样0.10.5g于100mL三角瓶中，力口硝酸15mL,高氯酸2mL,硫酸2mL,混匀。于电热板或电炉上小火加热消化，瓶中液体开始变棕黑色时，不断沿瓶壁补加硝酸至有机质分解完全，加大火力，至消化液发生浓密的白烟，溶液澄明或微带黄色。消化液放冷，加水20mL。放冷以后转移至100mL容量瓶中，用水多次洗涤三角瓶，合并洗液于容量瓶中，加水至刻度，混匀。作为样品测定溶液。取与消化样品同量的硝酸、高氯酸、硫酸，按同一方法做试剂空白溶液。标准曲线绘制取磷标准使用液0、0.2、0.4、0

9、.5、0.8、1.0mL(相当于磷0、2、4、6、8、10g),分别置于25mL比色管中，各加水约15mL、5%硫酸溶液2.5mL,电目酸钱溶液2mL,氯化亚锡-硫酸肿混合液0.5mL,各管均补加水至25mL,混匀。在室温放置20min以后，用2cm比色杯，在660nm波长处，以零管作参比，在分光光度计上分别测定其吸光管，以吸光度对磷含量绘制标准曲线。样品测定准确吸取样品测定溶液12mL及同量的试剂空白液，分别置于25mL比色管中，各加水约15mL,5%硫酸溶液2.5mL,电目酸钱溶液2mL,氯化亚锡-磷酸肿?昆合液0.5mL。各管均补加水至25mL,混匀。在室温放置20min以后，用2cm比色杯，在660nm波长处，用水作参比，在分光光度计分别测定其吸光度。以测出的