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文档简介

1、霉菌的形态观察一、【实验目的】1、学习并掌握观察霉菌形态的基本方法2、了解四类常见霉菌(曲霉、毛霉、青霉、根霉)的基本形态特征二、【实验原理】1、霉菌霉菌可产生复什分枝的菌丝体,分基内菌丝和气生菌丝,气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝,由繁殖菌丝产生抱子。霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及抱子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和抱子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多(约310m),常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍,因此,用低倍显微镜即可观察。2、观察方法观察霉菌的形态有多种方法,常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法,本次实验采用载玻片培养观察法(小室培养法)

2、。3、载玻片培养观察法(小室培养法)用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上,接种后盖上盖玻片培养,霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后,将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态,还便于观察不同发育期的培养物。三、【实验器材】1、菌种:曲霉(Aspergillussp.),青霉,根霉(Rhizopussp.),毛霉(Mucorsp.),培养7d的马铃薯琼脂平板培养物2、培养基:马铃薯培养基(简称PDA(配方见附表)3、仪器或其他用具:平皿,载玻片,盖玻片,无菌吸管,U型玻棒,解剖刀,银子,50%JI,20%T油,显微镜,接种环,酒精

3、灯等四、【操作步骤】1、载玻片培养观察法(小室培养法)(1)、培养小室的灭菌:在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片,再放一U形玻棒,具上放一洁净载玻片和两块盖玻片,盖上皿盖,包扎后于110c灭菌203吩钟,烘干备用。(2)、琼脂薄片的制作:取已灭菌的马铃薯琼脂培养基各67ml注入另两个灭菌平皿中,使之凝固成薄层。通过无菌操作,用解剖刀将其切成1cmx1cm勺琼脂块,并将其移至上述培养室中的载玻片上(每片放两块)。(3)、接种:通过无菌操作,用接种环从斜面培养物上挑取很少量的抱子,接种于培养小室中琼脂块的边缘上,用无菌银子将盖玻片覆盖在琼脂块上。(3)、培养:通过无菌操作,在培养小室中的圆滤纸上

4、加23ml灭菌的20%的甘油(用于保持平皿内的湿度),盖上皿盖,27C正置培养一周。(4)、镜检:根据需要可以在不同的培养时间内取出载玻片置低倍镜下观察,必要时换高倍镜。五、【注意事项】1、载玻片培养观察中,注意无菌操作,接种量要少,同时尽可能将分散的抱子接种在琼脂块边缘上,否则培养后菌丝过于稠密影响观察。六、【实验结果及绘图】菌种曲霉根霉毛霉青霉形态特征营养菌丝具有分隔;气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生抱子梗,顶端膨大成球状顶囊,表面辐射出一层或两层小梗,小梗上着生成用的球形分生抱子。分生抱子梗生于足细胞上,并通过足细胞匕甘养菌丝相连。菌丝无隔、多核、分枝状,有匍匐菌丝和假根。在假根的上方

5、直立地生长出一至数根抱囊梗,其顶端膨大成球形抱子囊。囊的基部有囊托,中何启球形或半球形囊轴。囊内J人量抱囊抱子,有性生殖时由/、同性别的菌丝或匍匐菌丝上生出配子囊,配子囊双双异宗配合形成一接合抱子。菌丝无隔、多核、分枝状,无假根或匍匐菌丝。菌丝体上直接生出单生、总状分枝或假轴状分枝的抱囊梗。各分枝顶端着生球形抱子囊,无囊托。菌丝有横隔,分生抱子梗亦启横隔,光滑或粗糙。基部无足细胞,顶端不形成膨大的顶囊,其分生抱子梗经过多次分枝,产生几轮对称或/、对称的小梗,形如扫帚,称为帚状体。小梗顶端有抱子。四种霉菌形态特征表【绘图】曲琴曲10X10球状预期及泡广梗10x40司与回局内放人困分生例子梗及足细胞10x40根再的10x10根毒菌假根10*40青霉菌10x10青霉菌10x10【附表】马铃薯培养基配方(PDA马铃薯200g葡稳糖(蔗糖)20g

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