全身照射对创面几种愈合成分的影响及康复新的促愈合作用

1、5Gy全身照射对创面几种愈合成分的影响及康复新的促愈合作用舒崇湘 程天民【摘要】 目的 研究全身放射损伤对剖面愈合的影响及康复新的促愈合作用。方法 大鼠5Gyy线全身照射后,于背部造成2个直径1.6伽圆形全层皮肤创伤(放射创伤复合伤)，观察伤后5，10，15，20，25天刨面组织的干湿重比、蛋白质、DNA与羟脯氨酸含量的变化。结果 与单纯创伤相比较，复合伤创面组织的干湿重比和羟脯氨酸含量在伤后各时相点、蛋白质含量在伤后520天、DNA含量在伤后第5，10，15天显著降低使用康复新后，以上指标显著上升。结论 全身放射损伤使皮肤创伤愈合延缓，康复新对单纯创伤和放射复合创伤均有促愈合作用。【关键词】

2、伤口愈合 辐射损伤 羟脯氨酸 康复新放射损伤复合创伤是核武器爆炸和严重核事故发生的主要伤类之一，放射损伤对创伤愈合的抑制与促愈合措施成为放射复合伤的重要研究领域。一种多元醇类化合物康复新已证明对多类创伤具有促愈合作用，笔者则研究其对合并有放射损伤的创伤有否促愈合作用。笔者通过多项指标研究5Gy全身放射损伤对皮肤创面愈合的影响及康复新的促愈合作用，旨在对此类损伤难愈合机制的认识有所深化，并提出新的促愈合措施。材料与方法一、动物与致伤1实验动物采用健康雄性Wistar大鼠，体重(220±20)g由本校实验动物中心提供。2动物分组与观察时相点：设单纯创伤(刨伤组)和辐射复合刨伤(复合组)两

3、组。每个动物制成2个剖面，其中1个治疗，另1个不治疗作自身对照。每个伤类组又设伤后5，10，15，20，25天共5个观察时相点。3动物致伤：(1)照射：将大鼠装在特制的有机玻璃笼子内， 60Goy线全身1次照射，距离1 m，照射量率为114.38115.65cGymin，总剂量为5 Gv。(2)创伤：在大鼠背部中央切除两个直径1.6的圆形全层皮肤，但勿损伤皮下筋膜层，两圆相距约2.0。具体方法见文献1。复合伤组大鼠先照射，后创伤。于2小时后随机选择其中1个创面局部用药（康复新2.5mg/c创面，1次/d）。二、观察指标与方法1创面组织干湿重比：断头放血处死大鼠，沿剖缘刮取组织，取一部分称重，烤

4、干，称取干重，计算其干重占湿重的百分比。2创面组织中蛋白质含量按lowry法测定，结果以每克剖面组织湿重所含蛋白量的毫克数表示。3.创面组织中DNA含量按二联苯氨比色法2测定，结果以每克剖面组织湿重所含DNA毫克数表示。4羟脯氨酸(OHP)测定：参考Cordelldge法进行。按标准曲线计算出测定管的OHP含量，再计算每克湿刨面组织中OHP含量毫克数。三、统计处理实验数据用SPMR医学统计软件中的PDA一2程序作t检验及方差分析。结 果一5Gy照射创面组织干湿重比的变化及康复新的作用伤后各组创面组织的干湿重比在伤后第5天最低，随后逐渐增加，见表1。与创伤组相比，复合伤对照刨面和用药创面的创面组

5、织干湿重比均显著降低(P<0.050.01)。各用药组的干湿重比均显著高于对照组(P<0.01)二、伤后创面组织中蛋白质含量的变化及康复新对其的影响各组创面组织中蛋白质含量均于伤后第5天最低，随后逐渐升高，创伤对照组在伤后第20天达最高水平，第25天有所降低；而复合伤对照组至伤后第25天才接近创伤对照的最高值。与创伤组相比，复合伤各时相点蛋白含量均显著性降低。创伤用药组创面蛋白质含量于伤后第15天达最高峰，随后逐渐下降，与其对照组相比，各时相点蛋白质含量均显著增高，且其峰值前移5天。复合伤用药组蛋白质含量于伤后第20天达最高值，第25天有所降低；与其对照组相比，除第25天外，各时相

6、点蛋白质含量也均显著升高，其峰值也约前移5天，见表2。三、伤后创面组织中DNA含量的变化及康复新对其的影响创伤对照组于伤后略呈升高趋势，至伤后第15天出现高峰，随后又降低，复合伤创面DNA含量变化趋势与创伤组相似，但在伤后第5,1O,15天显著低于创伤组，伤后第20,25天两组间无显著性差异。各用药组DNA含量于伤后第5，10天显著高于对照组(P<0.05)，第15天显著低于对照组(P<0.05)。在伤后第5,10天，创伤用药组的DNA含量显著高于复合伤用药组DNA含量，见表3。四、伤后创面组织中羟脯氨酸含量的变化及康复新对其的影响表1 康复新对创面组织干湿重比的影响 分比() 伤

7、后时间（d） 组别 鼠数 5 10 15 20 25单纯创伤组 对照组 6 11.19±0.49 24.13±0.51 26.17±2.80 29.60±0.98 33.36±0.76 用药组 6 16.38±1.16aa 26.64±1.41 aa 29.92±0.99 aa 32.90±1.64 aa 36.52±0.52 aa复合伤组 对照组 6 9.00±0.81b 17.83±1.71bb 21.89±1.27 bb 24.71±1.23 bb

8、26.96±0.61 bb 用药组 6 13.59±0.46 aabb 23.84±1.37 aabb 25.78±2.67 aabb 27.13±1.34 aabb 30.22±0.76 aabb与各自对照组比较：aaP0.01; 与单纯创伤组比较：bP0.05 bbP0.01表2 康复新对创面组织中蛋白质的影响（mg/g） 伤后时间（d） 组别 鼠数 5 10 15 20 25单纯创伤组 对照组 6 40.20±3.42 71.46±5.29 154.55±14.85 177.18±4.96

9、 144.99±10.63 用药组 6 47.64±2.16aa 88.84±4.39 aa 187.90±5.83 aa 186.09±18.56 aa 158.53±13.84 aa复合伤组 对照组 6 35.43±2.57b 62.58±7.65bb 122.88±4.26 bb 157.07±5.25 bb 175.93±16.84 bb 用药组 6 44.06±1.67 aabb 70.35±7.53 aabb 155.25±11.65 aabb

10、 167.00±10.31 aabb 141.86±8.48aabb与各自对照组比较：aaP0.01; 与单纯创伤组比较：bP0.05 bbP0.01表3 康复新对创面组织中DNA含量的影响（mg/g） 伤后时间（d） 组别 鼠数 5 10 15 20 25单纯创伤组 对照组 6 16.23±1.50 16.88±2.00 20.42±2.86 16.00±2.33 16.58±5.37 用药组 6 24.40±1.55a 21.57±7.38 a 15.15±1.75a 15.26±

11、1.53 15.09±1.53复合伤组 对照组 6 14.57±0.97b 15.34±3.93b 17.77±5.36b 16.85±3.60 15.45±1.60 用药组 6 19.56±2.80 ab 19.09±2.82 a 14.85±2.70 a 14.12±1.08 14.75±0.88与各自对照组比较：aP0.01; 与单纯创伤组比较：bP0.05 伤后各组创面组织中羟脯氨酸含量在伤后第5天均较低，以后逐渐增加，至伤后第25天达较高水平。复合伤组羟脯氨酸含量在伤后第10

12、，15，20，25天均显著低于单纯创伤组。两伤用药组羟脯氨酸含量在伤后各时相点均显著高于各自对照组(P<0.01)；而复合伤用药组羟脯氨酸含量在各时相点均显著低于单纯刨伤用药组，见表4。表4 康复新对创面组织中羟脯氨酸含量的影响（mg/g） 伤后时间（d） 组别 鼠数 5 10 15 20 25单纯创伤组 对照组 6 2.57±0.45 8.79±1.76 12.02±0.27 13.60±2.10 16.37±0.48 用药组 6 3.47±0.46a 10.91±0.53 aa 16.99±1.35 aa

13、 17.74±1.00 aa 17.63±1.69 a复合伤组 对照组 6 2.12±0.17 3.77±0.86bb 9.66±0.25 bb 11.20±1.44 bb 13.73±1.27 bb 用药组 6 2.80±0.19 a 6.40±0.71 aabb 11.02±0.99 aabb 14.29±0.95 aabb 15.18±0.99 aabb与各自对照组比较：aP0.05 aaP0.01 与单纯创伤组比较：bbP0.01讨 论放射损伤使刨伤愈合延迟的文献报道

14、很多，但深入的研究特别是促愈合措施的报道较少。本研究结果表明，5Gy照射后第525天内刨面组织干湿重比均显著低于单纯创伤组。在创伤愈合的过程中，蛋白质为创面组织干重的主要成分，创面再生组织蛋白质可分为细胞蛋白质和细胞外基质蛋白质两种成分，在肉芽组织增生高峰期是以细胞蛋白质成分主，而随后逐渐以细胞外基质蛋白质成分为主。复合伤后第525天，大鼠皮肤创面再生组织中蛋白质含量显著低于单纯创伤组蛋白质含量，间接说明辐射不仅抑制成纤维细胞和血管内皮细胞的增生，而且对细胞外基质蛋白质成分的产生和分泌也有抑制作用。胶原是创面组织中的主要基质成分，目前胶原已分为19种类型3，但皮肤组织中主要含有I，型胶原。在创

15、伤愈合过程中，胶原的作用主要包括：(1)对细胞起支持作用，有利于细胞的铺展和黏附；(2)决定组织牵张强度；(3)诱导上皮细胞的分化和增殖，促进其生长。因而创伤愈合的过程中胶原的产生和存积不仅可显示愈合的程度，也可标志愈合的质量。由于胶原成分中羟脯氨酸的含量较为固定所以创面组织中羟脯氨酸的含量可以直接反映创面胶原成分的含量。本研究结果表明；复合伤后第525天，大鼠皮肤创面再生组织中羟脯氨酸的含量显著低于单纯创伤组，说明辐射降低了创面组织中的胶原含量。创面组织中DNA含量的变化不仅反映刨面组织中DNA代谢状况，而且也能间接说明刨面组织中细胞增殖快慢。复合伤组刨面DNA含量在伤后第515天显著低于单

16、纯创伤组，提示辐射对创面组织中DNA合成代谢具有抑制作用。辐射通过对DNA合成代谢的抑制，使细胞增殖受限，从而抑制创面组织肉芽组织的增生。康复新是从美洲大蠊体内提取的一种特殊的多元醇类化合物。以前的研究4表明，康复新具有促进肉芽组织增生的作用，且能促进单纯刨伤和放射创伤复合伤创面愈合，增加创面组织牵张强度1。笔者进一步证实康复新在伤后第5l0天能显著提高单纯创伤组和复合伤组的DNA含量，在伤后第520天均能显著提高两伤类组创面蛋白质含量，在伤后各时相点均能显著提高两伤类组刨面组织的干湿比和羟脯氨酸的含量。提示康复新通过促进创面组织中核酸、蛋白质和胶原的合成，从而一方面促进组织的再生修复，另一方面则提高再生组织的质量。但康复新是直接通过促进成纤维细胞和血管内皮细胞的增生与产生和分泌细胞外基质蛋白质而起作用，还是通过作用于其他细胞如巨噬细