连续流动分析法测定烟草中的氯

1、实验3 连续流动分析法测定烟草中的氯1、 实验目的1、了解连续流动分析仪的基本原理。2、掌握连续流动分析法测定烟草中的氯的基本操作与数据分析。3、掌握连续流动分析仪使用安全注意事项。2、 实验原理1、 氯测定原理 用水萃取烟草样品中的氯，氯与硫氰酸汞反应，释放出硫氰酸根进而与三价铁反应形成络合物，反应产物在480 nm比色测定。2、 仪器原理及功能简介 该仪器是德国SEAL的AA3连续流动分析仪。 （1）仪器原理该仪器检测原理为在系统中连续通入反应试剂，使其与待测样品物质发生反应，试剂的量由不同流速的泵管精确控制，样品被每隔2秒注入的空气气泡分割成很多的小片断，增加延时圈使反应完全，用比色计检

2、测有色络合物的吸光度，然后与标准品建立校准数据库，达到准确分析的目的。检测过程中我们所看到的容纳化学反应的空气气泡，不仅能保证被分隔开的每一片断内部充分混合，而且反应效果一致，同时能清洁管道内壁，降低扩散与内部带过。由此可见，连续流动分析法是一种非常精准的定量测定方法。 （2）功能简介仪器目前的分析模块共有7个，可进行总糖/还原糖、烟碱、钾、氯/总氮/氨态氮/硝态氮/亚硝态氮/磷酸盐/硼、多酚、挥发碱/挥发酸、淀粉等14个指标的检测。现有的检测标准以烟草行业标准为主，部分方法是BRAN+LUEBBE结合连续流动分析技术提供的国内外有关土壤、水、植物等相对较成熟的检测方法。3、 操作步骤 1、根

3、据烟草行业标准YC/T162-2002要求，做好准备工作。（1）样品处理按要求抽取待测样品，制备试样，测定试样水分含量。称取 0. 25 g 试样于50 mL 磨口三角瓶中，精确至0. 0001 g，加入25 mL水. 盖上塞子，在振荡器上振荡萃取 30 min。用定性滤纸过滤，弃去前几毫升滤液，收集后续滤液，待上机检测。（2）试剂准备所用试剂为分析纯级试剂，水应为蒸馏水或同等纯度的水。 Brij 35 溶液( 聚乙氧基月桂醚)。 硫氰酸汞储备液：称取硫氰酸汞2.1 g于烧杯中，加入甲醇溶解，转入500mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度。 硝酸铁储备液：称取硝酸铁101.0g于烧杯中，加入15.

4、8 mL硝酸，用水溶解，转入500 m l 容量瓶中，用水定容至刻度。 显色剂：各取硫氰酸汞储备液和硝酸铁储备液300 mL于1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度，加入1 mL Bri j 35 溶液（提前一天配制，用前需过滤）。 稀释水：取1000 mL水，加入1 ml Brij 35溶液。 标准溶液储备液：称取基准氯化钠0. 824 g于烧杯中，精确至0. 0001 g ，用水溶解，转入250 mL容量瓶中，用水定容至刻度。 工作标准液：使用由储备液用制备至少5个工作标准液，其浓度范围应覆盖预计检测到的样品含量。 （3）仪器的准备工作 在检测器中放入对应波段480nm的滤光片；如果已放置

5、有滤光片，请务必检查确定是波段480nm的滤光片，否则严重影响增益的设置与样品检测的进行！ 对照氯测定的泵管线路图，将所用管道与对应样品或溶剂做好标记。 各泵管做好标记后，按要求将泵管平行压入蠕动泵轨道，盖好蠕动泵盖，将所有进样针先放入去离子水中。 依次打开UPS电源、电脑主机、显示屏、进样器、蠕动泵及检测器的电源。打开所有电源后，将蠕动泵的速度调为“Normal”，打开“Run”键。 2、AACE软件操作 （1）启动AACE软件。 在主菜单中左下角双击左键，选择设置好的有关“氯”使用方法。在主菜单中单击“charting”进行联机，下载程序（下载过程中泵会停止工作）。下载结束后，出现通道运行

6、情况的画面，泵继续工作。 （2）关闭不需要的通道，在正在使用的“氯”通道的中，单击右键，在下拉菜单中调灯强度，单击“autolamp”，左下角会出现“autolamp in progress”，稍等，出现灯值“lamp value：2.8V”。再单击右键，在下拉菜单中调节基线，单击“set base”，等待基线稳定。基线平稳后，把管道放入对应的试剂瓶中。确定所有试剂已通过流通池，检查试剂吸收。如果试剂吸收远远超过所给方法的标准，更换相应试剂。如果基线不平稳，检查管路中的气泡，特别是流通池流出管路中气泡，塑料管中的气泡必须前后都是圆的，如果不是，请检查是否加了表面活性剂，管路是否正确或被污染。等

7、待通入试剂的基线稳定后，再单击“set base”。 （3）设置新方法或新的运行文件。建立新的运行文件，先从“set up”下拉菜单“analysis”中选一个运行，按“copy run”，复制新的运行，根据本次实验实际标准曲线工作液数量及样品数量，按照下图中的序列顺序，依次重新设定标准曲线数目与样品数目。并将所使用标准曲线浓度填入通道内。与此同时，根据已设定的序列，将标准曲线工作液按照从高浓度至低浓度依次倒入样品杯后放入样品架，其中最高浓度工作液倒三杯；将样品按照己定的顺序依次倒入样品杯后放入样品架，注意做好样品顺序记录。 （4）设增益。在仪器通入试剂基线稳定后，在主菜单中双击左键进样器“X

8、Y2 sampler1”，出现一个新的界面，单击“sample”，样品针开始吸样，保持1.5分钟，再单击“wash”，使样品针回到清洗处。等待出峰，在峰上升至最高点并保持平稳之前，可进行一次调节增益操作：单击右键，在下拉菜单中调节增益，单击“set gain”。设完增益，再次等待基线平稳，然后单击“set base”。 （5）在主菜单中，单击“stop”，关闭所有通道的画面，然后单击“run”，选择步骤3设置好的运行文件，仪器开始运行检测。如果样品数量较多，请在运行前提前关注试剂和洗针液的量是否能完成所有样品检测；运行过程中，注意防止废液溢出。如果出现超标的标准或样品，会自动出现提示对话框，按

9、“yes”即可。 （6）运行结束后，也会自动出现提示对话框，按“yes”，完全结束分析。 3、管路的清洗与维护 （1）带解析池的管路需进行特殊的清洁。通常情况下，用碱性洗液清洁使用酸试剂的管道，用酸性洗液清洁使用碱性试剂的管道： 1 N NaOHÞ 40 g/L NaOH； 1 N HClÞ约83 mL 浓盐酸/ L （2）把泵的速度调到快速，吸入清洗液约10min以上，直到管道清洁干净。 （3）使用去离子水或者蒸馏水清洁所有管路15min以上； （4）长时间不使用，把所有管路置于空气中，排干水份。 4、关闭仪器 （1）关掉泵的电源，取下泵的压盖，放松泵管，把压盖倒扣在泵上

10、。 （2）依次关闭进样器、蠕动泵、检测器、电脑主机及UPS电源。 四、数据分析 1、氯含量的计算 以干基计的氯含量，由下式得出： 氯% = 式中： C样品液氯的仪器观测值，mg m试料的重量，mg W试样的水份含量。 2、重新计算的情况原文件不能修改，必须建立一个重新计算的文件，再进行修改。先在“run”的下拉菜单中选“recalculate”(重新计算)，选上需要修改的运行文件，这时出现一个新的文件xxxxxxR1。（1）如果要删除多余的检测点，在杯序中选定要删去的杯，按一下“null”,该杯被删去，再点“OK”,出现一个对话框，划上勾（重新进行峰检测），点“yes”。修改后的报告生成。（2）如果要修改或者补充样品的重量、稀释倍数等数据，直接更改后点“OK”。（3）如果检测点没有识别到最高点需要移动校正。在“retrieve”中选上“view chart”, 再选上已经建立的重新计算的文件“xxxxxxR1”，点击移动的图标，移动点，然后再点击重新计算的图标。五、安全注意事项1、运行中不可以移开比色计的罩。因为偏射光会干扰测量。2、运行中确保试剂和清洗水的充足，同时防止废液溢出。3、废液管 (如从比色计和透析器出来的管) 应尽可能的短，不要没入液体，否则系统压力会变化。4、运行前，检查气泡形状