黄芩中黄芩苷的提取分离与鉴定

1、药学专业综合实验（二）题目：黄苓中黄苓苷的提取、分离与鉴定学院医药学院班级xxxxxxxxxxx姓名xxxxxxxxxxxxxxx学号xxxxxxxxx黄苓中黄苓苷的提取、分离与鉴定黄苓简介：黄苓又名山茶根、黄苓茶、土金茶根；为唇形科植物，以根入药。有清热燥 湿，凉血安胎，解毒等功效。含多种黄酮类化合物，主要为黄苓甙，黄苓素，汉黄苓甙，汉黄苓素，7 甲氧基黄苓素，7 -甲氧基去甲基汉黄苓素，黄苓黄酮I，黄苓黄酮U等。主治温热病、上呼吸道感染、肺热咳嗽、湿热黄胆、肺炎、痢疾、咳血、目 赤、胎动不安、高血压、痈肿疖疮等症。产于河北、辽宁、陕西、山西、山东、 内蒙古、黑龙江等。，、实验目的1掌握从黄

2、苓中提取、精制黄苓苷的原理、方法及操作要点2 掌握黄苓苷的结构鉴定原理及方法。三、实验材料与仪器材料：黄苓干燥根仪器： 旋转蒸发仪离心沉淀机 200g摇摆式高速中药粉碎机电子天平 真空泵 抽滤装置 圆底烧瓶 水浴锅 索氏提取器量筒 玻璃棒PH试纸试剂：浓盐酸 60% 乙醇 40% 氢氧化钠95% 乙醇 50% 乙醇2mol/l盐酸 镁粉二氧化锆枸橼酸三氧化铝四、实验步骤1、黄苓苷的提取、分离黄苓粗粉100g加10倍量水煎煮2次，每次1h过滤两次滤液1加浓盐酸调pH至1-2，80 C水浴保温，充分结晶，过滤滤一 物40%氢氧化钠调pH至，加入等体积95吃醇，过滤滤液滤渣(弃去)卄4加水适量混匀，

3、加浓盐酸调pH至1-2放置4h，抽滤水洗，50%乙醇洗，再用95%乙醇洗或结晶 (粗制黄苓苷)2、黄苓苷的鉴定I(1) 盐酸-镁粉反应：取黄苓苷少许置于试管中，以乙醇1ml水浴微温振摇溶解， 加镁粉适量，滴加浓盐酸数滴，观察颜色变化。(2) 锆-枸橼酸反应：取黄苓苷少许置于试管中，加水2ml置水浴上温热至溶解， 加数滴5%!氧化锆溶液，振荡后，观察颜色变化；再加 2%句橼酸试剂，观察颜 色变化。(3) 三氧化铝反应：取黄苓苷少许置于试管中，加水2ml置水浴上温热至溶解， 加入2%三氧化铝甲醇溶液数滴，观察颜色变化。五、实验结果1. 黄苓苷得率黄苓苷得率( )=M/ M x 100 %式中：M所

4、得黄苓苷精品重量Mo提取时用黄苓的重量本实验中：M为，M为100g，所以收率为%2. 苓苷鉴定结果(1) . 盐酸-镁粉反应：取黄苓苷少许置于试管中，以乙醇 1ml水域微温振摇 溶解，加镁粉适量，滴加浓盐酸数滴，溶液产生樱红色。(2) .锆-枸橼酸反应：取黄苓苷少许置于试管中，加水 2ml置水浴上温热至溶解，加数滴5汇氧化锆溶液，振荡后，显黄色并有黄绿色荧光。再加2%枸橼酸试剂，黄色和荧光褪去（3）.三氧化铝反应：取黄苓苷少许置于试管中，加水2ml置水浴上温热至溶 解，加入2%三氧化铝甲醇溶液数滴，溶液产生鲜黄色，在紫外光下显黄绿色荧 光。试剂盐酸-镁粉锆-枸橼酸三氧化铝颜色橙色至微红色黄色和

5、荧光褪去黄色六、结果分析、注意事项1、 结果分析：本实验中产率不高，原因可能有：？粗粉未浸泡（或粉末浸泡不 完全）；？静置时间短，沉淀不完全；？调PH时温度控制不好。2、注意事项：?提取过程中为防止黄苓苷的酶解、氧化和减少有效成分被破坏，应控制在一 定温度下进行。?在用酸、碱进行提取纯化黄酮类化合物时，应当注意温度和碱度都不宜过高， 以免破坏黄酮类化合物的母核。酸化时，酸度也不宜过高，否则酸会与黄酮类化 合物生成盐而溶解。?在选择乙醇溶液做提取剂时要注意提取溶液的溶度。浓度在（50%70%的乙醇水溶液其极性与黄苓苷的极性相近，便于其溶出。 低浓度（40%及以下）的乙醇极性较大，杂质的溶出量大大

6、增加，高浓度（90%及以 上）的乙醇溶液极性较小，主要用于药材中的挥发油、叶绿素、树脂等的溶出。七、思考题1、 黄苓苷提取过程中为什么要控制温度和调节 PH答：（1）温度的控制：黄苓苷在一定温度和湿度下能酶水解成黄苓素及葡萄 糖醛酸。黄苓素分子中具有邻三酚羟基， 在空气中易氧化成醌式结构显绿色。 以 防提取过程中黄苓苷的酶解、氧化和有效成分被破坏。（2）PH的调节：在提取纯化黄酮类化合物时，碱度过高，会破坏黄酮类化合 物的母核；酸度过高，会使酸与黄酮类化合物生成盐而溶解。因此在黄苓苷的提取过程中要控制温度和调节PH2、为什么要选用一定浓度的乙醇溶液作为提取液答：黄苓苷在黄苓中以羧酸盐存在， 可以被溶剂溶出，传统的提取方法以水 做提取剂， 但黄芩苷只能微溶于热水， 而且在水煎煮的过程中引入了大量的水溶 性杂质。 黄芩苷为一连有葡萄糖醛酸结构的黄酮化合物， 具有一定的脂溶性， 所 以在提取时可以选择一定浓度的乙醇溶液作为提取液， 大大增加它的溶出率， 并 且抑制象鞣质、蛋白、粘液等高分子杂质的溶出，便于过滤纯化。浓度（50%70%） 的乙醇水溶液其极性与黄芩苷的极性相近，便于其溶出。低浓度（